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操作步驟:
A:組織中提取
1.收集 0.1g 組織,加入 1.0ml Lysis Buffer 1 及適量蛋白酶抑制劑(依據(jù)實(shí)驗(yàn)選擇),冰上用組織研磨器或勻 漿管研磨。
2.將勻漿后樣品轉(zhuǎn)移至 1.5ml 離心管中,11000rpm 5min,吸棄上清保留沉淀。
3.至步驟 2。
B:細(xì)胞中提取
1.收集約 10 8個(gè)細(xì)胞,3000rpm 5min(懸浮細(xì)胞直接離心,貼壁細(xì)胞使用細(xì)胞刮刀或胰蛋白酶消化離心收集 均可。注意用預(yù)冷 PBS 清洗殘留培養(yǎng)基和胰蛋白酶等),吸棄上清。
2.至步驟 1。
步驟 1:加 1.0ml Lysis Buffer 1 及適量蛋白酶抑制劑(依據(jù)實(shí)驗(yàn)選擇),冰上孵育 30min(每 10min 用移液槍 吹打一次),4°C 11000rpm 離心 5min,棄上清。
步驟 2:于上述步驟離心管中加入 200μl Lysis Buffer 2,置于冰上 30min(每 10min 渦旋一次),4°C 11000rpm 離心 5min,吸取上清于一新離心管中。
步驟 3:加入 40μl Balance Buffer 于上述步驟離心管中,用移液槍輕輕吹勻。
步驟 4:使用 BCA 定量試劑盒定量。
步驟 5:于步驟 3 離心管中加入 2.4μl Adjust Buffer,輕輕吹勻,并應(yīng)用于下游研究。
產(chǎn)品簡(jiǎn)介:
產(chǎn)品名稱 |
規(guī)格 |
檢測(cè)方法 |
適用樣本 |
保存溫度 |
貨號(hào) |
AAF固定液 |
500ml |
|
|
2-8℃ |
BH-D85654 |
自備儀器和試劑耗材:
儀器準(zhǔn)備:
1.離心機(jī)
2.振蕩器
3.勻漿機(jī)/勻漿器
4.渦旋混勻器
5.移液器
6.冰箱
7.冰盒
試劑準(zhǔn)備:
1.PBS 緩沖液
2.蛋白定量試劑盒
耗材準(zhǔn)備:
1.離心管
2.吸頭
3.一次性手套
使用方法:
旋帽離心管裝的試劑在開(kāi)蓋前請(qǐng)短暫離心,將蓋內(nèi)壁上的液體甩至管底,避免開(kāi)蓋時(shí)液體灑落。
蛋白酶抑制劑在 2-8℃時(shí)是固體狀態(tài),從冰箱取出后恢復(fù)至室溫或 37℃短時(shí)間水浴,變成液體狀態(tài)后離心至管底部再開(kāi)蓋。
實(shí)驗(yàn)過(guò)程中的所有試劑須預(yù)冷;所有器具須放-20℃冰箱預(yù)冷。整個(gè)過(guò)程須保持樣品處于低溫。本公司產(chǎn)品僅用于科研實(shí)驗(yàn)。
注意事項(xiàng):
1. 正式實(shí)驗(yàn)前請(qǐng)選取幾個(gè)樣本做預(yù)實(shí)驗(yàn),以優(yōu)化實(shí)驗(yàn)條件,取得佳實(shí)驗(yàn)效果。
2. 螺旋蓋微量試劑管裝的試劑在開(kāi)蓋前請(qǐng)短暫離心,將蓋和管內(nèi)壁上的液體離心至管底,避免開(kāi)蓋時(shí)試劑損失。
3. 禁止與其他品牌的試劑混用,否則會(huì)影響使用效果。
4. 樣品或試劑被污染或試劑交叉污染可能會(huì)導(dǎo)致錯(cuò)誤的結(jié)果。
5. 好使用一次性吸頭、管、瓶或玻璃器皿,可重復(fù)使用的玻璃器皿必須在使用前清洗并徹底殘留清潔劑。
6. 實(shí)驗(yàn)后完成后所有樣品及接觸過(guò)的器皿應(yīng)按照規(guī)定程序處理。
人性結(jié)合球蛋白(SHBG)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人內(nèi)皮素1(ET-1)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人SH2攜帶蛋白(SHC/SLP-76)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子受體2 48T/96T
血小板糖蛋白vi 48T/96T
人布病抗體(Brucellosis-Ab)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
兔子白介素9(IL-9)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
S-100蛋白 48T/96T
犬腫瘤壞死因子α (TNF-α)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
大鼠吡啶交聯(lián)物(PY)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
大鼠抗α-胞襯蛋白抗體IgG/IgA(α-Fodrin IgG/IgA)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
AAF固定液人胱天蛋白酶9 規(guī)格: 48T Casp-9(Human Caspase-9) ELISA Kit
人血管緊張素轉(zhuǎn)化酶 規(guī)格: 48T ACE(Human Angiotensin converting enzyme) ELISA Kit
人α橫紋肌肌動(dòng)蛋白 規(guī)格: 48T Alpha-SCA(Human Alpha-sarcomeric actin) ELISA Kit
人類似RIKEN cDNA 2610307008 基因 規(guī)格: 48T Human similar to RIKEN cDNA 2610307008 gene ELISA Kit
人孤腓肽 規(guī)格: 48T OFQ/N(Human orphanin FQ/nociceptin) ELISA Kit
人凝聚素 規(guī)格: 48T CLU(Human clusterin) ELISA Kit
人B受體 規(guī)格: 48T BCR(Human B cell receptor) ELISA Kit
人雄結(jié)合蛋白 規(guī)格: 48T ABP(Human Androgen Binding Protein) ELISA Kit
人活化凝血因子Ⅻ 規(guī)格: 48T F XII a(Human activated coagulation factor XII ) ELISA Kit
人功能相關(guān)抗原3 規(guī)格: 48T Human lymphocyte function associated antigen 3,LFA-3 ELISA Kit
人apelin 12 規(guī)格: 48T Human apelin 12,AP12 ELISA Kit
M-ENDO broth 膜過(guò)濾ENDO肉湯 1.10750.0500MERCK默克
Membrane-fiter Enterococcus selective agar acc.to SLANETZ and BARTLEY(base) 膜過(guò)濾腸球選擇瓊脂(基礎(chǔ)) 1.05289.0500MERCK默克
Membrane-fiter Enterococcus selective agar acc.to SLANETZ and BARTLE 1.05262.0500MERCK默克
Esculin bile agar 七葉苷膽鹽瓊脂 1.11432.0500MERCK默克
FRASER Listeria Selective Enrichment Broth( base) 1.10398.0500MERCK默克
膜過(guò)濾腸球選擇瓊脂
弗雷澤李斯特選擇富集肉湯(基礎(chǔ))
Thioglycolate medium G 疏基乙酸鹽培養(yǎng)基G 1.16761.0500MERCK默克
Fluid thilglycolate medium 疏基乙酸鹽培養(yǎng)基 1.08191.0500MERCK默克
FRASER Listeria Selective Supplement 弗雷澤李斯特選擇添加劑 1.10399.0001MERCK默克