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提高 RT-PCR 反應(yīng)的靈敏度與特異性方法
日期:2024-11-25 02:47
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摘要:
提高 RT-PCR 反應(yīng)的靈敏度與特異性方法:
① 確定模板 RNA 完整性好,無 DNA 污染。
② RNA 模板中不應(yīng)含有擴增反應(yīng)抑制劑。
③ 使用適量的模板 RNA ,模板量太多會降低特異性,太少會導(dǎo)致擴增不出條帶或條帶太弱。
④ 若模板中有二級結(jié)構(gòu),可通過提高逆轉(zhuǎn)錄反應(yīng)溫度來提高擴增效果。
提高 RT-PCR 反應(yīng)的靈敏度與特異性方法:
① 確定模板 RNA 完整性好,無 DNA 污染。
② RNA 模板中不應(yīng)含有擴增反應(yīng)抑制劑。
③ 使用適量的模板 RNA ,模板量太多會降低特異性,太少會導(dǎo)致擴增不出條帶或條帶太弱。
④ 若模板中有二級結(jié)構(gòu),可通過提高逆轉(zhuǎn)錄反應(yīng)溫度來提高擴增效果。