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PCR的兩步法和三步法不同點
日期:2024-11-25 02:40
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摘要:
1、步驟不同:兩步法退火和延伸同時在60℃-65℃間進行,以減少一次升降溫過程,而三步法則分兩次完成。
2、用時不同:兩步法減少一次升降溫過程,提高了反應速度,用時較短。而三步法則比兩步法用時更長。
3、適用條件不同:兩步法中,PCR擴增區(qū)很短,即使Taq酶活性不是zui佳也能在很短的時間內(nèi)復制完成。三步法的PCR擴增區(qū)則較長,需要降低系統(tǒng)溫度,引物與DNA模板結合,形成局部雙鏈。
1、步驟不同:兩步法退火和延伸同時在60℃-65℃間進行,以減少一次升降溫過程,而三步法則分兩次完成。
2、用時不同:兩步法減少一次升降溫過程,提高了反應速度,用時較短。而三步法則比兩步法用時更長。
3、適用條件不同:兩步法中,PCR擴增區(qū)很短,即使Taq酶活性不是zui佳也能在很短的時間內(nèi)復制完成。三步法的PCR擴增區(qū)則較長,需要降低系統(tǒng)溫度,引物與DNA模板結合,形成局部雙鏈。