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細(xì)胞復(fù)蘇與凍存
日期：2024-11-25 01:30
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摘要：
1、細(xì)胞復(fù)蘇：
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化，時(shí)間min左右，加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。
②在000RPM左右條件下離心4min，棄上清,加-2ml培養(yǎng)基吹勻，將細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中，補(bǔ)加適量培養(yǎng)基。
2、細(xì)胞凍存：
待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)進(jìn)行細(xì)胞凍存保種
1、棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗-2次，加入mL 0.25%（T25瓶）
2、-2min后，顯微鏡下觀察細(xì)胞，大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落，輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入*培養(yǎng)基終止消化；
3、將細(xì)胞懸液000RPM左右條件下離心4min，棄上清，加ml凍存液重懸細(xì)胞；...
1、細(xì)胞復(fù)蘇：
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化，時(shí)間min左右，加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。
②在000RPM左右條件下離心4min，棄上清,加-2ml培養(yǎng)基吹勻，將細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中，補(bǔ)加適量培養(yǎng)基。
2、細(xì)胞凍存：
待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)進(jìn)行細(xì)胞凍存保種
1、棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗-2次，加入mL 0.25%（T25瓶）
2、-2min后，顯微鏡下觀察細(xì)胞，大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落，輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入*培養(yǎng)基終止消化；
3、將細(xì)胞懸液000RPM左右條件下離心4min，棄上清，加ml凍存液重懸細(xì)胞；
4、將凍存管放入程序降溫盒，放入-80℃冰箱，4小時(shí)后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲(chǔ)存。