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熒光抗體技術(shù)應(yīng)用領(lǐng)域
熒光抗體技術(shù),用熒光物標(biāo)記抗體來檢測細(xì)胞或組織中相應(yīng)抗原或抗體的技術(shù)。熒光物種類一般有異硫氰酸熒光素、羅丹明熒光素、二氯三嗪基氨基熒光素等。一般是將待測標(biāo)本固定于玻片表面,滴加已知熒光抗體后再以緩沖液沖洗,干燥后于熒光顯微鏡下觀察陽性是可見帶熒光的抗原抗體復(fù)合物; 陰性無熒光(因為帶熒光的抗體不能與抗原結(jié)合,被沖冼掉)。該技術(shù)具有簡單、特異性高、敏感性低、同時檢測多種抗原時較復(fù)雜等特點(diǎn)。
熒光抗體技術(shù)是以熒光物標(biāo)記抗體進(jìn)行抗原定位的技術(shù)。本技術(shù)較其他鑒定的血清學(xué)方法有速度快、操作簡單、敏感性高等特點(diǎn),它在臨床檢驗上已用作病毒和寄生蟲的檢驗及自身病的診斷等。
應(yīng)用領(lǐng)域:
熒光抗體技術(shù)在臨床檢驗上已用作病毒和寄生蟲的檢驗及自身病的診斷等。在學(xué)檢驗中主要用于菌種的鑒定。標(biāo)本材料可以是培養(yǎng)物、感染組織、病人分泌排泄物等。熒光間接染色法測定血清中的抗體,可用于流行病學(xué)調(diào)查和臨床回顧診斷。熒光用于梅毒螺旋體抗體的檢測是梅毒特異性診斷常用方法之一。熒光技術(shù)在病毒學(xué)檢驗中有重要意義,因為普通光學(xué)顯微鏡看不到病毒,用熒光抗體染色法可檢出病毒及其繁殖情況。
在寄生蟲感染診斷中,間接熒光抗體染色法有非常廣泛的應(yīng)用。間接熒光試驗(ifat)是當(dāng)前公認(rèn)的*有效的檢測瘧疾抗體的方法。常用抗原為瘧疾患者血液中紅內(nèi)期裂殖體抗原。ifat對腸外阿米巴、尤其是阿米巴肝膿腫也有很高的診斷價值,所用抗原是阿米巴培養(yǎng)物懸液或提取的可溶性抗原。
熒光法還是檢測自身抗體的好工具,在自身病的實驗診斷中應(yīng)用廣泛。其突出優(yōu)點(diǎn)是能以簡單方法同時檢測抗體和與抗體起特異反應(yīng)的組織成分,并能在同一組織中同時檢查抗不同組織成分的抗體。主要有抗核抗體、抗平滑肌抗體和抗線粒體抗體等??购丝贵w的檢測*常采用鼠肝作核抗原,可做成冰凍切片、印片或勻漿。用組織培養(yǎng)細(xì)胞如hep-2細(xì)胞或hela細(xì)胞涂片還可檢出抗著絲點(diǎn)抗體、抗中性粒細(xì)胞漿抗體等。應(yīng)用熒光技術(shù)可以檢出的其他自身抗體有抗(胃)壁細(xì)胞抗體、抗雙鏈dna抗體、抗甲狀腺球蛋白抗體、抗甲狀腺微粒體抗體、抗骨髓肌抗體及抗腎上腺抗體等。