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Elisa常見血漿樣本抗凝劑的選取
血漿:血漿樣本需要抗凝,一般建議用2.0%EDTA,1%肝素,3.8%枸櫞酸鈉作為抗凝劑采集標(biāo)本,并將標(biāo)本在采集后的30分鐘內(nèi)于2~8度1000g離心15分鐘,取上清即可檢測。根據(jù)待檢測目標(biāo)物的性質(zhì)不同選取不同的抗凝劑。
枸櫞酸鈉(檸檬酸鈉):Ca2+有凝血作用,枸櫞酸鈉能與血液中的鈣離子形成可溶性的螯合物,從而阻止血液凝固。配成 109mmol/L的濃度和血液1:9, 106mmol/L的濃度和血液1:4
缺點(diǎn):血液中溶解度低,抗凝作用較弱。
優(yōu)點(diǎn):對(duì)凝血因子有很好的保護(hù)作用,大部分凝血試驗(yàn)都可用枸櫞酸鈉抗凝。
二胺四乙酸(EDTA)鹽:與血液中的鈣離子結(jié)合形成配位化合物, 從而阻止血液凝固。15g/L EDTA和血液 1:10
優(yōu)點(diǎn):對(duì)紅細(xì)胞和白細(xì)胞形態(tài)影響小。
缺點(diǎn):影響血小板的聚集。不適用于凝血實(shí)驗(yàn)和血小板功能相關(guān)實(shí)驗(yàn)的檢 測。
肝素:通過與抗凝血酶Ⅲ結(jié)合,增強(qiáng)抗凝血酶的作用,滅活絲氨酸蛋白 酶,從而可阻止凝血酶的形成和阻止血小板聚集,阻止血液凝固。肝素鈉 1g/L 與血液 1:10
優(yōu)點(diǎn):抗凝能力強(qiáng)、不影響血細(xì)胞體積、不易溶血、能耐高溫。
缺點(diǎn):引起白細(xì)胞聚集。肝素抗凝血應(yīng)于短時(shí)間內(nèi)使用,否則放置過久血 液又可凝固。