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引物純化方式選擇

日期:2024-11-25 03:53
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摘要: 引物純化方式選擇: 1、C18柱脫鹽: 有人稱其為簡易反相柱,它對DNA有特異性的吸附,可以被有機溶解洗脫,但不會被水洗脫,所以能有效地去除鹽分。它不能有效去除比目的片段短的小片段。實際上,它是一種脫鹽的作用。這種方法一般不會對普通PCR反應產(chǎn)生影響。對于需要用于測序、克隆的引物不能使用這個級別。 2、OPC純化: OPC純化是根據(jù)DNA保護基(DMTr基)和Cartridge柱中樹脂間的親合力作用的原理進行純化目的DNA片段。OPC法純化的DNA純度大于95%。適用于40mer以下引物的純化。 3、PAGE純: PAGE純化...

引物純化方式選擇:

1、C18柱脫鹽:

有人稱其為簡易反相柱,它對DNA有特異性的吸附,可以被有機溶解洗脫,但不會被水洗脫,所以能有效地去除鹽分。它不能有效去除比目的片段短的小片段。實際上,它是一種脫鹽的作用。這種方法一般不會對普通PCR反應產(chǎn)生影響。對于需要用于測序、克隆的引物不能使用這個級別。
2、OPC純化: 

OPC純化是根據(jù)DNA保護基(DMTr基)和Cartridge柱中樹脂間的親合力作用的原理進行純化目的DNA片段。OPC法純化的DNA純度大于95%。適用于40mer以下引物的純化。
3、PAGE純:

PAGE純化法是使用變性聚丙烯酰胺凝膠電泳,對DNA片段進行分離,然后從凝膠中回收目的DNA的方法。PAGE純化法也是一種非常有效的DNA純化方法,純化后的DNA純度大于95%,對長鏈Oligo DNA (大于50mer)的純化特別有效。
4、HPLC純化:

HPLC純化是使用高效液相色譜的原理,對DNA片段進行純化。純度可以大于99%。主要用于短鏈和修飾引物的純化。該法的弱點是成本較高,批量生產(chǎn)效率不高。