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標準品的管理規(guī)范
標準品的管理規(guī)范:
一、接收
收到標準品后,應(yīng)檢查外包裝是否完好密封,標簽是否清晰完整,并及時填好相關(guān)貯存記錄,記錄信息要完整無缺,至少要包括產(chǎn)品名稱、儲存條件、存入日期、保質(zhì)期、規(guī)格、批號、含量、數(shù)量、瓶號以及備注信息等。
二、貯存
對于標準品的存放期間,要經(jīng)常性的核查標準品是否失效,對于怕光怕熱易揮發(fā)的標準品,是否密封實了,是否按照存放要求進行存放。
三、使用
采用登記制度,如需要取用,則需要填寫取用的產(chǎn)品名、對應(yīng)的批號、數(shù)量、使用目的、取用人等相關(guān)詳細的信息,以明確責任主體,保證能夠查到標準品使用的來龍去脈。
四、銷毀
及時檢查基準標準品是否過期,如有過期,需要收集起來及時做銷貨處理。
1、 單克隆環(huán)法:此類方法多用于整合率低的轉(zhuǎn)染方法或者需要得到單克隆細胞株的實驗。其優(yōu)點在于工作量小,只需將轉(zhuǎn)染或者病毒載體感染后的細胞按照一定的細胞密度轉(zhuǎn)移至新皿中,并使用合適的藥wu 進行篩選,zui 后在克隆環(huán)的幫助下對單克隆細胞株進行挑選,并在新皿中完成擴增。
缺點在于需要對細胞密度和藥wu 濃度繪制致死曲線并選取合適的細胞密度和藥wu 濃度進行篩選,一些細小的密度和濃度差別都會導致難以獲取均一的單克隆,結(jié)果導致獲取的克隆不純,含有非整合的細胞。穩(wěn)定整合的細胞在這樣一類混合細胞中,很快會失去生長優(yōu)勢,zui 終導致失去穩(wěn)定株。
2、 96孔單克隆稀釋法:此類方法同樣多用于整合率低的轉(zhuǎn)染方法或者需要得到單克隆細胞株以及篩選懸浮細胞穩(wěn)定株的實驗。其優(yōu)點在于,理論上可以得到非常均一的單克隆,同時可以篩選懸浮細胞穩(wěn)定株。其缺點在于,工作量比較大。
3、 逆轉(zhuǎn)錄病毒混合克隆制備法:此類方法適用于需要制備混合穩(wěn)定株。
優(yōu)點在于可以在短時間內(nèi)(1周)獲得穩(wěn)定細胞株,同時也可以隨時將細胞稀釋轉(zhuǎn)移至新皿中獲得單克隆細胞株。缺點在于需要制備逆轉(zhuǎn)錄病毒載體。