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服務(wù)流程:
接受訂單及樣品——RNA提取——RNA質(zhì)量檢測(cè)——樣品cDNA合成——定量試驗(yàn)——數(shù)據(jù)分析——結(jié)果交付——售后服務(wù)。
產(chǎn)品名稱 |
規(guī)格 |
貨號(hào) |
50T流感病毒H4亞型PCR檢測(cè)試劑盒 |
50T |
BH-P63227 |
它具有下列特點(diǎn):
1. 即開即用,用戶只需要提供樣品RNA模板。
2. 引物和探針經(jīng)過優(yōu)化,靈敏性高。
3. 提供陽(yáng)性對(duì)照,便于區(qū)分假陰性樣品。
4. 特異性高,引物是根據(jù)高度保守區(qū)設(shè)計(jì),不會(huì)跟其他病毒的RNA發(fā)生交叉反應(yīng)。
5. 本產(chǎn)品足夠 50 次 20μL 體系的探針法熒光定量 RT-PCR 反應(yīng)。
6. 本產(chǎn)品只能用于科研。
實(shí)驗(yàn)方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無(wú)熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s →58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保溫7min。
使用方法:
一、樣品 DNA 的制備
用自選方法提取 Cps DNA。注意:DNA 純化方法是決定檢測(cè)靈敏度的關(guān)鍵因素。如果不能很好純化樣品 DNA,后面的 PCR 再靈敏也不能提高整體檢測(cè)靈敏度。
二、制備 Cps 標(biāo)準(zhǔn)曲線(以 10-10E6 這 6 個(gè) 10 倍稀釋度為例。由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行,千萬(wàn)不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散傳染性病原,本產(chǎn)品不提供活體病毒做陽(yáng)性對(duì)照,只提供沒有傳染性的、可以直接使用的 DN**段作為陽(yáng)性對(duì)照。
1. 標(biāo)記 6 個(gè)離心管,分別為 6,5,4,3,2 和 1 號(hào)。
2. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 超純水(*好用帶芯槍頭,下同)。
3. 先將本試劑盒提供的陽(yáng)性對(duì)照用 TE 緩沖液或超純水 10 倍梯度稀釋到10E7 拷貝/μL(注:請(qǐng)不要將本試劑盒提供的標(biāo)準(zhǔn)品一次性稀釋至 10E7拷貝/μL,建議每次稀釋 10 倍,梯度稀釋至 10E7 拷貝/μL)。
4. 在 6 號(hào)管中加入 5 μL 10E7 拷貝/μL 的 Cps 陽(yáng)性對(duì)照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 10E6 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照。
5. 換槍頭,從 6 號(hào)管中取 5 μL 溶液到 5 號(hào)管中,充分震蕩 1 分鐘,得 10E5拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照。
6. 換槍頭,從 5 號(hào)管中取 5 μL 溶液到 4 號(hào)管中,重復(fù)上面的操作直到得到 6個(gè)稀釋度的陽(yáng)性對(duì)照。
7. NC 管中不加任何陽(yáng)性對(duì)照。
8. 從 1-6 號(hào)管中分別取 5 μL 和待測(cè)樣品一起進(jìn)行定量 PCR(見下步),每個(gè)樣品做 3 次重復(fù)。PCR 后得到每個(gè)陽(yáng)性對(duì)照稀釋樣品的熒光 PCR Ct 值,并以之為縱軸,以濃度的對(duì)數(shù)值為橫軸,繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。
異質(zhì)性胞核核糖核蛋白M(hnRNP M)ELISA試劑盒 hnRNP M ELISA Kit 載脂蛋白D抗體英文名稱:APOD 0.2ml
異質(zhì)性胞核核糖核蛋白L(hnRNP L)ELISA試劑盒 hnRNP L ELISA Kit 酸敏感離子通道1抗體英文名稱:ASIC1/BNaC2/ASIC1A 0.1ml
異質(zhì)性胞核核糖核蛋白K(hnRNP K)ELISA試劑盒 hnRNP K ELISA Kit 雙鏈RNA腺苷酸脫氨基酶抗體(C端)英文名稱:ADAR1 (C-terminus) 0.2ml
異質(zhì)性胞核核糖核蛋白I(hnRNP I/PTB)ELISA試劑盒 hnRNP I/PTB ELISA Kit 髓系、、混合系白血病易位基因10抗體英文名稱:AF10 0.1ml
異質(zhì)性胞核核糖核蛋白H(hnRNP H)ELISA試劑盒 hnRNP H ELISA Kit 腺苷酸環(huán)化酶1抗體英文名稱:ADCY1 0.2ml
異質(zhì)性胞核核糖核蛋白G(hnRNP G)ELISA試劑盒 hnRNP G ELISA Kit 腺瘤樣息肉抗體英文名稱:APC 0.1ml
異質(zhì)性胞核核糖核蛋白E(hnRNP E)ELISA試劑盒 hnRNP E ELISA Kit 溶血磷脂酰基轉(zhuǎn)移酶抗體英文名稱:AGPAT1 0.2ml
異質(zhì)性胞核核糖核蛋白D(hnRNP D)ELISA試劑盒 hnRNP D ELISA Kit 錨蛋白重復(fù)及SAM結(jié)構(gòu)域蛋白3抗體英文名稱:ANKS3 0.2ml
異質(zhì)性胞核核糖核蛋白C(hnRNP C)ELISA試劑盒 hnRNP C ELISA Kit 磷酸化間變型瘤激酶抗體英文名稱:phospho-ALK (Tyr1586) 0.1ml
異質(zhì)性胞核核糖核蛋白A3(hnRNP A3)ELISA試劑盒 hnRNP A3 ELISA Kit ?;o酶A脫氫酶很長(zhǎng)鏈抗體英文名稱:ACADVL 0.2ml
異質(zhì)性胞核核糖核蛋白A2/B1(hnRNP A2/B1)ELISA試劑盒 hnRNP A2/B1 ELISA Kit 信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)銜接結(jié)合蛋白抗體英文名稱:AMSH 0.2ml
異質(zhì)性胞核核糖核蛋白A1(hnRNP A1)ELISA試劑盒 hnRNP A1 ELISA Kit 錨蛋白重復(fù)序列-細(xì)胞因子信號(hào)抑制物盒蛋白家族3抗體英文名稱:ASB3 0.2ml
異質(zhì)性胞核核糖核蛋白A0(hnRNP A0)ELISA試劑盒 hnRNP A0 ELISA Kit 有絲分裂激酶B抗體英文名稱:Aurora C 0.2ml
異質(zhì)核糖核蛋白Q(SYNCRIP/HNRPQ/NSAP1)ELISA試劑盒 SYNCRIP/HNRPQ/NSAP1 ELISA Kit 磷酸化Ack1抗體英文名稱:Phospho-Ack1 (Tyr326) 0.1ml
異質(zhì)型核糖核蛋白復(fù)合物/抗RA33抗體(hnRNP/RA33)ELISA試劑盒 hnRNP/RA33 ELISA Kit 磷酸化Ack1抗體英文名稱:Phospho-Ack1 (Tyr284) 0.1ml
50T流感病毒H4亞型PCR檢測(cè)試劑盒刺芒柄花素 Formononetin 485-72-3 20mg
芒柄花苷 Ononin 486-62-4 20mg
川楝素 Toosendanin 58812-37-6 20mg
次野鳶尾黃素 Irisflorentin 41743-73-1 20mg
射干苷 Tectoridin 611-40-5 20mg
鳶尾黃素 Tectorigenin 548-77-6 20mg
柴胡皂苷A Saikosaponin A 20736-09-8 20mg
柴胡皂苷B1 Saikosaponin B1 58558-08-0 10mg
柴胡皂苷B2 Saikosaponin B2 58316-41-9 20mg
柴胡皂苷C Saikosaponin C 20736-08-7 20mg
柴胡皂苷D Saikosaponin D 20874-52-6 20mg
蟾毒靈 Bufalin 465-21-4 20mg
蟾毒它靈 Bufotaline 471-95-4 10mg
注意事項(xiàng):
①加入試劑的順序應(yīng)一致,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時(shí)間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照雞血紅蛋白(HB)ELISA檢測(cè)試劑盒說明書中標(biāo)明的時(shí)間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。
④底物A應(yīng)揮發(fā),避免長(zhǎng)時(shí)間打開蓋子。底物B對(duì)光敏感,避免長(zhǎng)時(shí)間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實(shí)驗(yàn)完成后應(yīng)立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標(biāo)板時(shí)應(yīng)充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時(shí),避免使用帶金屬部分的加樣器 。
⑦實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。
⑧試劑應(yīng)按標(biāo)簽說明書儲(chǔ)存,使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄,不可保存。
⑨不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號(hào)的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。