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50T艱難梭狀芽孢桿菌PCR檢測試劑盒
50T
BH-P63500
它具有下列特點:
1. 即開即用,用戶只需要提供樣品RNA模板。
方法
胸腺活化調節(jié)趨化因子(TAFA/CCL17)ELISA試劑盒 TAFA/CCL17 ELISA Kit 嗜鉻粒蛋白C抗體英文名稱:Chromogranin C/Sg II 0.2ml
細胞外基質金屬蛋白酶誘導因子(EMMPRIN/CD147)ELISA試劑盒 EMMPRIN/CD147 ELISA Kit 煙堿型乙酰膽堿受體α10/AChRα10抗體英文名稱:CHRNA10 0.2ml
細胞凋亡因子配體(Fas-Ligand)ELISA試劑盒 Fas-Ligand ELISA Kit 煙堿型乙酰膽堿受體α6/AChRα6抗體英文名稱:CHRNA6 0.2ml
糖蛋白130(gp130/CD130)ELISA試劑盒 gp130/CD130 ELISA Kit 煙堿型乙酰膽堿受體α9/AChRα9抗體英文名稱:CHRNA9 0.2ml
胎球蛋白A(Fetuin-A)ELISA試劑盒 Fetuin-A ELISA Kit 煙堿型乙酰膽堿受體δ/AChRδ抗體英文名稱:CHRND 0.2ml
胎球蛋白A(FetuinA)ELISA試劑盒 FetuinA ELISA Kit 凋亡加強結構域蛋白8抗體英文名稱:CARD8 0.1ml
酸性成纖維細胞生長因子(FGF1)ELISA試劑盒 FGF1 ELISA Kit 凋亡加強結構域蛋白7抗體英文名稱:CARD7 0.1ml
酸性成纖維細胞生長因子(AFGF/FGF1)ELISA試劑盒 AFGF/FGF1 ELISA Kit β衣被蛋白抗體英文名稱:beta COP 0.2ml
瘦素受體(Leptin receptor)ELISA試劑盒 Leptin receptor ELISA Kit 半胱胺酸蛋白酶4/11抗體英文名稱:Caspase 4+Caspase 11 0.1ml
瘦素(LEP/Leptin)ELISA試劑盒 LEP/Leptin ELISA Kit 1號染色體開放閱讀框187抗體英文名稱:C1orf187 0.2ml
噬酸性細胞趨化因子-2(Eotaxin-2)ELISA試劑盒 Eotaxin-2 ELISA Kit 9號染色體開放閱讀框61抗體英文名稱:C9orf61 0.2ml
噬酸性細胞趨化因子(Eotaxin)ELISA試劑盒 Eotaxin ELISA Kit C末端結合蛋白2抗體英文名稱:CTBP2 0.1ml
嗜酸粒細胞趨化蛋白Eotaxin 2(Eotaxin 2/CCL24)ELISA試劑盒 Eotaxin 2/CCL24 ELISA Kit 冠蛋白3抗體英文名稱:Coronin 3 0.2ml
嗜酸性粒細胞趨化因子(Eotaxin)ELISA試劑盒 Eotaxin ELISA Kit 21號染色體開放閱讀框13抗體英文名稱:C21ORF13 0.2ml
50T艱難梭狀芽孢桿菌PCR檢測試劑盒20次 即用型藍白T載體C型(T7-T3,無MCS) Instant Blue-White Vector T,Type C -20℃保存
20次 即用型藍白T載體D型(無啟動子,有MCS) Instant Blue-White Vector T,Type D -20℃保存
20次 即用型藍白T載體E型(無啟動子,無MCS) Instant Blue-White Vector T,Type E -20℃保存
50ng 可保種型藍白T載體 Blue-White Vector T -20℃保存
20次 克必隆零背景T載體 Zero Background T Vector 低溫保存
1ug PCR專用LIC克隆套裝 LIC Cloning Kit for PCR -20℃保存
10ug M13mp 18 DNA(雙鏈) M13mp18 DNA -20℃保存
10ug M13mp 18 DNA(單鏈) M13mp18 DNA -20℃保存
5ug lambda(λ) DNA(普通) Lambda DNA(λ DNA) -20℃保存
250ug lambda(λ) DNA(不含N6-甲基腺嘌呤) Lambda DNA(λ DNA) -20℃保存
250ug lambda(λ) DNA(非甲基化的cl857 Sam7) Lambda DNA(λ DNA) -20℃保存
30ug φX174 RFⅠDNA φX174 RFⅠDNA -20℃避光保存
30ug φX174 RF Ⅱ DNA φX174RF Ⅱ DNA -20℃避光保存
①加入試劑的順序應一致,以保證所有反應板孔溫育的時間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照雞血紅蛋白(HB)ELISA檢測試劑盒說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。
④底物A應揮發(fā),避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實驗完成后應立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標板時應充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標反應孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時,避免使用帶金屬部分的加樣器 。
⑦實驗中不用的板條應立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質。
⑧試劑應按標簽說明書儲存,使用前恢復到室溫。稀稀過后的標準品應丟棄,不可保存。
⑨不用的其它試劑應包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質前使用。
接受訂單及樣品——RNA提取——RNA質量檢測——樣品cDNA合成——定量試驗——數據分析——結果交付——售后服務。
2. 引物和探針經過優(yōu)化,靈敏性高。
3. 提供陽性對照,便于區(qū)分假陰性樣品。
4. 特異性高,引物是根據高度保守區(qū)設計,不會跟其他病毒的RNA發(fā)生交叉反應。
5. 本產品足夠 50 次 20μL 體系的探針法熒光定量 RT-PCR 反應。
6. 本產品只能用于科研。
實驗方法步驟:
1:在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s →58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保溫7min。
使用方法:
一、樣品 DNA 的制備
用自選方法提取 Cps DNA。注意:DNA 純化方法是決定檢測靈敏度的關鍵因素。如果不能很好純化樣品 DNA,后面的 PCR 再靈敏也不能提高整體檢測靈敏度。
二、制備 Cps 標準曲線(以 10-10E6 這 6 個 10 倍稀釋度為例。由于標準品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨立的區(qū)域進行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產品穩(wěn)定性和避免擴散傳染性病原,本產品不提供活體病毒做陽性對照,只提供沒有傳染性的、可以直接使用的 DN**段作為陽性對照。
1. 標記 6 個離心管,分別為 6,5,4,3,2 和 1 號。
2. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 超純水(*好用帶芯槍頭,下同)。
3. 先將本試劑盒提供的陽性對照用 TE 緩沖液或超純水 10 倍梯度稀釋到10E7 拷貝/μL(注:請不要將本試劑盒提供的標準品一次性稀釋至 10E7拷貝/μL,建議每次稀釋 10 倍,梯度稀釋至 10E7 拷貝/μL)。
4. 在 6 號管中加入 5 μL 10E7 拷貝/μL 的 Cps 陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 10E6 拷貝/μL 的陽性對照。
5. 換槍頭,從 6 號管中取 5 μL 溶液到 5 號管中,充分震蕩 1 分鐘,得 10E5拷貝/μL 的陽性對照。
6. 換槍頭,從 5 號管中取 5 μL 溶液到 4 號管中,重復上面的操作直到得到 6個稀釋度的陽性對照。
7. NC 管中不加任何陽性對照。
8. 從 1-6 號管中分別取 5 μL 和待測樣品一起進行定量 PCR(見下步),每個樣品做 3 次重復。PCR 后得到每個陽性對照稀釋樣品的熒光 PCR Ct 值,并以之為縱軸,以濃度的對數值為橫軸,繪制標準曲線。
血漿炎性趨化因子(CXCL9/MIG)ELISA試劑盒 CXCL9/MIG ELISA Kit 豬瘟病毒抗體英文名稱:CSFV 0.1ml