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注意事項(xiàng):
①加入試劑的順序應(yīng)一致,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時(shí)間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照雞血紅蛋白(HB)ELISA檢測試劑盒說明書中標(biāo)明的時(shí)間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。
④底物A應(yīng)揮發(fā),避免長時(shí)間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時(shí)間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實(shí)驗(yàn)完成后應(yīng)立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標(biāo)板時(shí)應(yīng)充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時(shí),避免使用帶金屬部分的加樣器 。
⑦實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。
⑧試劑應(yīng)按標(biāo)簽說明書儲(chǔ)存,使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄,不可保存。
⑨不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。
服務(wù)流程:
接受訂單及樣品——RNA提取——RNA質(zhì)量檢測——樣品cDNA合成——定量試驗(yàn)——數(shù)據(jù)分析——結(jié)果交付——售后服務(wù)。
產(chǎn)品名稱 |
規(guī)格 |
貨號 |
50T登革病毒1型PCR檢測試劑盒 |
50T |
BH-P63542 |
它具有下列特點(diǎn):
1. 即開即用,用戶只需要提供樣品RNA模板。
2. 引物和探針經(jīng)過優(yōu)化,靈敏性高。
3. 提供陽性對照,便于區(qū)分假陰性樣品。
4. 特異性高,引物是根據(jù)高度保守區(qū)設(shè)計(jì),不會(huì)跟其他病毒的RNA發(fā)生交叉反應(yīng)。
5. 本產(chǎn)品足夠 50 次 20μL 體系的探針法熒光定量 RT-PCR 反應(yīng)。
6. 本產(chǎn)品只能用于科研。
實(shí)驗(yàn)方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s →58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保溫7min。
使用方法:
一、樣品 DNA 的制備
用自選方法提取 Cps DNA。注意:DNA 純化方法是決定檢測靈敏度的關(guān)鍵因素。如果不能很好純化樣品 DNA,后面的 PCR 再靈敏也不能提高整體檢測靈敏度。
二、制備 Cps 標(biāo)準(zhǔn)曲線(以 10-10E6 這 6 個(gè) 10 倍稀釋度為例。由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散傳染性病原,本產(chǎn)品不提供活體病毒做陽性對照,只提供沒有傳染性的、可以直接使用的 DN**段作為陽性對照。
1. 標(biāo)記 6 個(gè)離心管,分別為 6,5,4,3,2 和 1 號。
2. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 超純水(*好用帶芯槍頭,下同)。
3. 先將本試劑盒提供的陽性對照用 TE 緩沖液或超純水 10 倍梯度稀釋到10E7 拷貝/μL(注:請不要將本試劑盒提供的標(biāo)準(zhǔn)品一次性稀釋至 10E7拷貝/μL,建議每次稀釋 10 倍,梯度稀釋至 10E7 拷貝/μL)。
4. 在 6 號管中加入 5 μL 10E7 拷貝/μL 的 Cps 陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 10E6 拷貝/μL 的陽性對照。
5. 換槍頭,從 6 號管中取 5 μL 溶液到 5 號管中,充分震蕩 1 分鐘,得 10E5拷貝/μL 的陽性對照。
6. 換槍頭,從 5 號管中取 5 μL 溶液到 4 號管中,重復(fù)上面的操作直到得到 6個(gè)稀釋度的陽性對照。
7. NC 管中不加任何陽性對照。
8. 從 1-6 號管中分別取 5 μL 和待測樣品一起進(jìn)行定量 PCR(見下步),每個(gè)樣品做 3 次重復(fù)。PCR 后得到每個(gè)陽性對照稀釋樣品的熒光 PCR Ct 值,并以之為縱軸,以濃度的對數(shù)值為橫軸,繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。
脂質(zhì)運(yùn)載蛋白10(LCN10)ELISA試劑盒 LCN10 ELISA Kit 磷酸化細(xì)胞表面趨化因子受體4抗體英文名稱:phospho-CXCR4 (Ser339) 0.2ml
脂質(zhì)運(yùn)載蛋白1(LCN1)ELISA試劑盒 LCN1 ELISA Kit 磷酸化細(xì)胞表面趨化因子受體2抗體英文名稱:phospho-CXCR2 (Ser347) 0.2ml
脂素3(LPIN3)ELISA試劑盒 LPIN3 ELISA Kit 中心體蛋白104抗體英文名稱:CEP104 0.2ml
脂素2(LPIN2)ELISA試劑盒 LPIN2 ELISA Kit 膽堿/乙醇胺磷酸轉(zhuǎn)移酶1抗體英文名稱:CEPT1 0.2ml
脂素1(LPIN1)ELISA試劑盒 LPIN1 ELISA Kit 6號染色體開放閱讀框163抗體英文名稱:C6orf163 0.1ml
脂生蛋白(ADIG)ELISA試劑盒 ADIG ELISA Kit 6號染色體開放閱讀框165抗體英文名稱:C6orf165 0.2ml
脂解激活脂蛋白受體(LSR)ELISA試劑盒 LSR ELISA Kit 6號染色體開放閱讀框168抗體英文名稱:C6orf168 0.2ml
脂肪細(xì)胞型脂肪酸結(jié)合蛋白(FABP4)ELISA試劑盒 FABP4 ELISA Kit 6號染色體開放閱讀框173抗體英文名稱:C6ORF173 0.2ml
脂肪細(xì)胞膜關(guān)聯(lián)蛋白(APMAP)ELISA試劑盒 APMAP ELISA Kit 6號染色體開放閱讀框182抗體英文名稱:C6ORF182 0.2ml
脂肪酸轉(zhuǎn)移酶2(LIPT2)ELISA試劑盒 LIPT2 ELISA Kit 6號染色體開放閱讀框186抗體英文名稱:C6orf186 0.2ml
脂肪酸轉(zhuǎn)移酶1(LIPT1)ELISA試劑盒 LIPT1 ELISA Kit 6號染色體開放閱讀框191抗體英文名稱:C6orf191 0.2ml
脂肪酸去飽和酶3(FADS3)ELISA試劑盒 FADS3 ELISA Kit 6號染色體開放閱讀框195抗體英文名稱:C6orf195 0.2ml
脂肪酸去飽和酶2(FADS2)ELISA試劑盒 FADS2 ELISA Kit 6號染色體開放閱讀框199抗體英文名稱:C6ORF199 0.2ml
脂肪酸合酶(FASN)ELISA試劑盒 FASN ELISA Kit 6號染色體開放閱讀框201抗體英文名稱:C6orf201 0.2ml
脂肪酸去飽和酶1(FADS1)ELISA試劑盒 FADS1 ELISA Kit 7號染色體開放閱讀框34抗體英文名稱:C7orf34 0.2ml
50T登革病毒1型PCR檢測試劑盒100次 動(dòng)物細(xì)胞核蛋白微量制備試劑盒 Animal Nuclear Protein Miniprep Kit 4℃保存
50次 動(dòng)物線粒體總蛋白提取劑盒
30次 一步式胞漿蛋白微量制備試劑盒 One-Step Cytoplasmic Protein Miniprep Kit 4℃保存
100次 一步式胞漿蛋白微量制備試劑盒 One-Step Cytoplasmic Protein Miniprep Kit 4℃保存
50次 細(xì)胞核蛋白提取試劑盒
50次 液體樣品蛋白純化回收試劑盒 Liquid Sample Protein Purification Kit 常溫保存
50次 石蠟包埋組織蛋白提取試劑盒
50次 昆蟲細(xì)胞裂解液
30次 植物總蛋白質(zhì)微量提取試劑盒 (SDS-PAGE) Plant Total Protein Miniprep Kit (SDS-PAGE) 常溫保存
30次 植物總蛋白質(zhì)微量提取試劑 (2DE) Plant Total Protein Miniprep Kit (2DE) 常溫保存
100次 植物總蛋白質(zhì)微量提取試劑 (3DE) Plant Total Protein Miniprep Kit (3DE) 常溫保存
50次 植物線粒體總蛋白提取試劑盒
50次 植物葉綠體蛋白提取試劑盒