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原理是由一對引物介導(dǎo),能在動植物體外對特定基因(DNA)片斷進(jìn)行快速酶促擴(kuò)增,經(jīng)過n個熱循環(huán)擴(kuò)增,擴(kuò)增產(chǎn)物中所含特定基因數(shù)是原始模板數(shù)的(1+E)n(0<E<1,擴(kuò)增效率=倍,使得檢測擴(kuò)增產(chǎn)物中的特定基因成為可能。
產(chǎn)品名稱:50T斑點熱立克次體PCR檢測試劑盒
貨號:BH-P63667
規(guī)格:50T
分類:熒光PCR法
儲存條件:-20℃避光保存,避免反復(fù)凍融。
運輸:低溫、避光,快遞免費送貨上門。
組成及試劑配制:
1、酶標(biāo)板:一塊(96孔)
2、 標(biāo)準(zhǔn)品(凍干品): 2瓶,請臨用前15分鐘內(nèi)配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時反復(fù)顛倒/搓動以助溶解,其濃度為200 U/L,然后做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進(jìn)行倍比稀釋),分別配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標(biāo)準(zhǔn)品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述標(biāo)準(zhǔn)品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。
3、 樣品稀釋液:1×20ml。
4、 檢測稀釋液A:1×10ml。
5、 檢測稀釋液B:1×10ml。
實驗注意事項:
1)RT-PCR可以檢測組織、細(xì)胞、血液、等很多材料,不同的樣本有不同要求,實驗前請充分溝通確認(rèn)實驗方案和樣本情況;本公司產(chǎn)品僅于科研。
2)客戶盡可能提供實驗的背景信息、物種、基因準(zhǔn)確的名稱和ID號;
3)客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4)樣本保存于液氮或干冰,也可以保存于Trizol液中。
實時熒光定量PCR是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán),利用熒光信號積累實時監(jiān)測整個PCR進(jìn)程,*后通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對未知模板進(jìn)行定量分析的方法。實時熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類,探針類是利用與靶細(xì)胞序列特異性雜交的探針來指示擴(kuò)增產(chǎn)物的增加,非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計的引物來指示擴(kuò)增的增加。運用該技術(shù)可以對DNA、RNA樣品進(jìn)行定量(包括優(yōu)良定量和相對定量)和定性分析。
主要服務(wù):DNA或RNA的優(yōu)良定量分析、基因表達(dá)差異分析、基因分型。
主要技術(shù):引物設(shè)計、RNA提取、cDNA合成、qPCR。
特點優(yōu)勢:
1. 特異性:所有產(chǎn)品使用的引物均經(jīng)過詳盡的生物信息學(xué)分析,經(jīng)過GenBank及自建龐大數(shù)據(jù)庫的比對,確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段,可實現(xiàn)對種屬及血清型的特異檢測,特異性均達(dá)到100%。
2. 重現(xiàn)性:該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過大量實驗菌株的驗證,重現(xiàn)性為100%。
3. 靈敏性:該系列產(chǎn)品可實現(xiàn)對檢測菌的高靈敏檢測,當(dāng)樣品中的濃度達(dá)到103cfu/ml時,可實現(xiàn)對其的直接檢測,無需繁瑣的增菌過程。
4. 實用性:檢測范圍廣,涵蓋了對人體危害較為嚴(yán)重的17種呼吸道及腸道致病菌,可實現(xiàn)對臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測,整個檢測過程為3-4個小時。
5. 優(yōu)勢1:序列資源豐富,除公布的序列外,公司還進(jìn)行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性
6. 優(yōu)勢2:該系列試劑盒均經(jīng)過大量的保守性及特異性實驗驗證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測試劑盒均經(jīng)過了20余種標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的保守性驗證及40余種近緣標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的特異性驗證,確保在使用過程中不會出現(xiàn)任何的假陽性及假陰性報告結(jié)果。
肽酶抑制因子16(PI16)ELISA試劑盒 PI16 ELISA Kit 微管相關(guān)蛋白EB家族3抗體英文名稱:EB3 0.2ml
肽酶抑制因子15(PI15)ELISA試劑盒 PI15 ELISA Kit 真核翻譯起始因子5抗體英文名稱:EIF5 0.2ml
肽酶D(PEPD)ELISA試劑盒 PEPD ELISA Kit 遺傳性前列腺癌蛋白2抗體英文名稱:ELAC2 0.2ml
肽聚糖識別蛋白2(PGLYRP2)ELISA試劑盒 PGLYRP2 ELISA Kit 磷酸化絲裂原活化蛋白激酶1抗體英文名稱:phospho-MEK1 (Ser385) 0.1ml
肽聚糖識別蛋白1(PGLYRP1)ELISA試劑盒 PGLYRP1 ELISA Kit 磷酸化絲裂原活化蛋白激酶1抗體英文名稱:phospho-MEK1 (Thr292) 0.1ml
肽基脯氨酰異構(gòu)酶F(PPIF)ELISA試劑盒 PPIF ELISA Kit 磷酸化絲裂原活化蛋白激酶1抗體英文名稱:phospho-MEK1 + MEK2 (Ser222 + Ser226) 0.1ml
肽基脯氨酰異構(gòu)酶E(PPIE)ELISA試劑盒 PPIE ELISA Kit 染色體區(qū)域穩(wěn)定蛋白/核輸出蛋白1/染色體區(qū)域穩(wěn)定必需蛋白抗體英文名稱:Exportin 1 0.1ml
肽基脯氨酰順反式異構(gòu)酶NIMA相互作用蛋白4(PIN4)ELISA試劑盒 PIN4 ELISA Kit 上皮細(xì)胞微管相關(guān)蛋白7抗體英文名稱:Ensconsin 0.2ml
肽基精氨酸脫亞氨酶Ⅵ(PADI6)ELISA試劑盒 PADI6 ELISA Kit 堿性鞘磷脂酶7抗體英文名稱:ENPP7 0.1ml
肽基精氨酸脫亞氨酶Ⅳ(PADI4)ELISA試劑盒 PADI4 ELISA Kit 表皮生長因子樣重復(fù)折疊1結(jié)構(gòu)域蛋白3抗體英文名稱:EDIL3 0.2ml
胎球蛋白B(FETUB)ELISA試劑盒 FETUB ELISA Kit 長鏈脂肪酸延長酶長ELOVL6抗體英文名稱:ELOVL6 0.2ml
胎盤特異性蛋白9(PLAC9)ELISA試劑盒 PLAC9 ELISA Kit 酪氨酸蛋白激酶受體A6抗體英文名稱:EphA6 0.2ml
胎盤膠原凝集素1(CLP1)ELISA試劑盒 CLP1 ELISA Kit 酪氨酸蛋白激酶受體A3抗體英文名稱:EphA3 0.1ml
胎盤鈣黏蛋白(CDHP)ELISA試劑盒 CDHP ELISA Kit 酪氨酸蛋白激酶受體B1抗體英文名稱:EphB1 0.2ml
胎盤堿性磷酸酶(ALPP)ELISA試劑盒 ALPP ELISA Kit 酪氨酸蛋白激酶受體A7抗體英文名稱:EphA7 0.2ml
50T斑點熱立克次體PCR檢測試劑盒10g 溶酶干粉 Lysozyme Powder 4℃或-20℃保存
1.5mL 溶酶溶液,10mg/mL Lysozyme Solution -20℃保存
400μL 乙?;Q灏椎鞍?Bovine Serum Albumin, Acetylated -20℃保存
100μg 人玻連蛋白 Vitronectin -20℃保存
5mg 硫氧還蛋白 Thioredoxin -20℃保存
1mg 鏈霉親和素 Streptavidin -20℃保存
0.1mL 鏈霉親和素,HRP標(biāo)記 Streptavidin,HRP conjugated 頻繁使用時放4℃,長期不用時放-20℃
0.5mL 鏈霉親和素,AP標(biāo)記 Streptavidin,AP Conjugated 4℃保存,請勿冷凍
10mg 親和素 Avidin -20℃保存
2mg 辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素 HRP-Avidin -20℃保存
100mg 堿性磷酸酶標(biāo)記親和素 AP-Avidin -20℃保存
5mg 熒光素(FITC) 標(biāo)記親和素 FITC-Avidin -20℃保存
1mg R-藻紅蛋白標(biāo)記親和素 R-Phycoerythrin Avidin -20℃保存
技術(shù)原理:
DNA的半保留復(fù)制是生物進(jìn)化和傳代的重要途徑。雙鏈DNA在多種酶的作用下可以變性解鏈成單鏈,在DNA聚合酶與啟動子的參與下,根據(jù)堿基互補(bǔ)配對原則復(fù)制成同樣的兩分子挎貝。
在聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)實驗中發(fā)現(xiàn),DNA在高溫時也可以發(fā)生變性解鏈,當(dāng)溫度降低后又可以復(fù)性成為雙鏈。因此,通過溫度變化控制DNA的變性和復(fù)性,并設(shè)計引物做啟動子,加入DNA聚合酶、dNTP就可以完成特定基因的體外復(fù)制。( DNA高溫變性低溫復(fù)性)
發(fā)現(xiàn)耐熱DNA聚合同酶--Taq酶對于PCR的應(yīng)用有里程碑的意義,該酶可以耐受90℃以上的高溫而不失活,不需要每個循環(huán)加酶,使PCR技術(shù)變得非常簡捷、同時也大大降低了成本,PCR技術(shù)得以大量應(yīng)用,并逐步應(yīng)用于臨床。