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服務(wù)流程:
產(chǎn)品名稱
規(guī)格
貨號(hào)
50T豬圓環(huán)病毒II型PCR檢測(cè)試劑盒
50T
BH-P63686
它具有下列特點(diǎn):
1. 即開即用,用戶只需要提供樣品RNA模板。
方法
生長(zhǎng)抑素受體3(SSTR3)ELISA試劑盒 SSTR3 ELISA Kit 突觸結(jié)合蛋白2抗體英文名稱:EF-CBP2 0.2ml
生長(zhǎng)抑素受體2(SSTR2)ELISA試劑盒 SSTR2 ELISA Kit 核苷酸焦磷酸酶2抗體英文名稱:ENPP2 0.2ml
生長(zhǎng)抑素受體1(SSTR1)ELISA試劑盒 SSTR1 ELISA Kit 長(zhǎng)鏈烯脂酰輔酶A水化酶抗體英文名稱:ECHS1 0.1ml
生長(zhǎng)抑素(SST)ELISA試劑盒 SST ELISA Kit 神經(jīng)元,肌肉特異性烯醇化酶抗體英文名稱:ENO1+ENO2+ENO3 0.2ml
生長(zhǎng)停滯特異性蛋白6(GAS6)ELISA試劑盒 GAS6 ELISA Kit 內(nèi)皮分化型G蛋白偶聯(lián)受體3抗體英文名稱:EDG3 0.1ml
生長(zhǎng)停滯DNA損傷可誘導(dǎo)蛋白α(GADD45α)ELISA試劑盒 GADD45α ELISA Kit 發(fā)育相關(guān)蛋白ERCC6L抗體(乙醇致畸因子)英文名稱:ERCC6L 0.2ml
生長(zhǎng)調(diào)節(jié)致癌基因γ(GROγ)ELISA試劑盒 GROγ ELISA Kit 豬源產(chǎn)腸性大腸桿K99抗體英文名稱:Escherichka coli K99 0.2ml
生長(zhǎng)調(diào)節(jié)致癌基因β(GROβ)ELISA試劑盒 GROβ ELISA Kit α內(nèi)磺肽抗體英文名稱:ENSA 0.2ml
生長(zhǎng)誘導(dǎo)跨膜蛋白(GHITM)ELISA試劑盒 GHITM ELISA Kit 磷酸化轉(zhuǎn)錄因子E2F-1抗體英文名稱:phospho-E2F1 (Ser337) 0.1ml
生長(zhǎng)受體(GHR)ELISA試劑盒 GHR ELISA Kit 表皮生長(zhǎng)因子樣受體1抗體英文名稱:EMR1 0.1ml
生長(zhǎng)促素受體(GHSR)ELISA試劑盒 GHSR ELISA Kit CREB結(jié)合蛋白p300抗體英文名稱:Ep300 0.1ml
生長(zhǎng)2(GH2)ELISA試劑盒 GH2 ELISA Kit EB病毒LMP-2A蛋白抗體英文名稱:LMP2A 0.2ml
生長(zhǎng)分化因子9(GDF9)ELISA試劑盒 GDF9 ELISA Kit 磷酸化雌受體β抗體英文名稱:phospho-Estrogen Receptor beta (Ser87) 0.1ml
生長(zhǎng)關(guān)聯(lián)蛋白43(GAP43)ELISA試劑盒 GAP43 ELISA Kit EB病毒核抗原1抗體英文名稱:EBV Nuclear Antigen 0.1ml
50T豬圓環(huán)病毒II型PCR檢測(cè)試劑盒250mg α- 環(huán)狀糊精 α-Cyclodextrin 室溫干燥保存
5g β- 環(huán)狀糊精 β-Cyclodextrin 室溫干燥保存
25mg γ- 環(huán)狀糊精 γ-Cyclodextrin 室溫保存
25mg 8- 環(huán)戊基 -1,3- 二丙基黃嘌呤 8-Cyclopentyl-1,3-Dipropylxanthine 室溫保存
1g 環(huán)磷酰胺 Cyclophosphamide Monolydrate 4℃保存
5mg 環(huán)孢霉素 A Cyclosporin A 4℃保存
25g L- 鹽酸半胱氨酸 L-Cysteine Hydrochloride 室溫干燥保存
25g L- 半胱氨酸 L- Cysteine 室溫干燥保存
25g L- 胱氨酸 L-Cystine 室溫干燥保存
1mg 細(xì)胞松弛素 B Cytochalasin B -20℃保存
100mg 細(xì)胞色素 C Cytochrome C -20℃保存
50mg β-D- 阿糖胞苷 Cytosine β-D-Arabinofuranoside 4℃保存
5g 胞嘧啶 Cytosine 室溫保存
注意事項(xiàng):
接受訂單及樣品——RNA提取——RNA質(zhì)量檢測(cè)——樣品cDNA合成——定量試驗(yàn)——數(shù)據(jù)分析——結(jié)果交付——售后服務(wù)。
2. 引物和探針經(jīng)過優(yōu)化,靈敏性高。
3. 提供陽(yáng)性對(duì)照,便于區(qū)分假陰性樣品。
4. 特異性高,引物是根據(jù)高度保守區(qū)設(shè)計(jì),不會(huì)跟其他病毒的RNA發(fā)生交叉反應(yīng)。
5. 本產(chǎn)品足夠 50 次 20μL 體系的探針法熒光定量 RT-PCR 反應(yīng)。
6. 本產(chǎn)品只能用于科研。
實(shí)驗(yàn)方法步驟:
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無(wú)熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s →58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保溫7min。
使用方法:
一、樣品 DNA 的制備
用自選方法提取 Cps DNA。注意:DNA 純化方法是決定檢測(cè)靈敏度的關(guān)鍵因素。如果不能很好純化樣品 DNA,后面的 PCR 再靈敏也不能提高整體檢測(cè)靈敏度。
二、制備 Cps 標(biāo)準(zhǔn)曲線(以 10-10E6 這 6 個(gè) 10 倍稀釋度為例。由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行,千萬(wàn)不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散傳染性病原,本產(chǎn)品不提供活體病毒做陽(yáng)性對(duì)照,只提供沒有傳染性的、可以直接使用的 DN**段作為陽(yáng)性對(duì)照。
1. 標(biāo)記 6 個(gè)離心管,分別為 6,5,4,3,2 和 1 號(hào)。
2. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 超純水(*好用帶芯槍頭,下同)。
3. 先將本試劑盒提供的陽(yáng)性對(duì)照用 TE 緩沖液或超純水 10 倍梯度稀釋到10E7 拷貝/μL(注:請(qǐng)不要將本試劑盒提供的標(biāo)準(zhǔn)品一次性稀釋至 10E7拷貝/μL,建議每次稀釋 10 倍,梯度稀釋至 10E7 拷貝/μL)。
4. 在 6 號(hào)管中加入 5 μL 10E7 拷貝/μL 的 Cps 陽(yáng)性對(duì)照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 10E6 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照。
5. 換槍頭,從 6 號(hào)管中取 5 μL 溶液到 5 號(hào)管中,充分震蕩 1 分鐘,得 10E5拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照。
6. 換槍頭,從 5 號(hào)管中取 5 μL 溶液到 4 號(hào)管中,重復(fù)上面的操作直到得到 6個(gè)稀釋度的陽(yáng)性對(duì)照。
7. NC 管中不加任何陽(yáng)性對(duì)照。
8. 從 1-6 號(hào)管中分別取 5 μL 和待測(cè)樣品一起進(jìn)行定量 PCR(見下步),每個(gè)樣品做 3 次重復(fù)。PCR 后得到每個(gè)陽(yáng)性對(duì)照稀釋樣品的熒光 PCR Ct 值,并以之為縱軸,以濃度的對(duì)數(shù)值為橫軸,繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。
生長(zhǎng)抑素受體4(SSTR4)ELISA試劑盒 SSTR4 ELISA Kit EFHD1蛋白抗體英文名稱:EFHD1 0.2ml
①加入試劑的順序應(yīng)一致,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時(shí)間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照雞血紅蛋白(HB)ELISA檢測(cè)試劑盒說明書中標(biāo)明的時(shí)間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。
④底物A應(yīng)揮發(fā),避免長(zhǎng)時(shí)間打開蓋子。底物B對(duì)光敏感,避免長(zhǎng)時(shí)間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實(shí)驗(yàn)完成后應(yīng)立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標(biāo)板時(shí)應(yīng)充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時(shí),避免使用帶金屬部分的加樣器 。
⑦實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。
⑧試劑應(yīng)按標(biāo)簽說明書儲(chǔ)存,使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄,不可保存。
⑨不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號(hào)的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。