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它具有下列特點(diǎn):
1. 即開即用,用戶只需要提供樣品RNA模板。
服務(wù)流程:
產(chǎn)品名稱
規(guī)格
貨號(hào)
50T淋球菌PCR檢測(cè)試劑盒
50T
BH-P63728
實(shí)驗(yàn)方法步驟:
方法
注意事項(xiàng):
凝血因子Ⅱ(F2)ELISA試劑盒 F2 ELISA Kit 磷酸化癌基因FOS蛋白B抗體英文名稱:phospho-Fos B (Ser27) 0.1ml
凝血酶/抗凝血酶復(fù)合體(TAT)ELISA試劑盒 TAT ELISA Kit 叉頭蛋白D2抗體英文名稱:FOXD2 0.2ml
凝集素樣氧化低密度脂蛋白受體1(LOX1)ELISA試劑盒 LOX1 ELISA Kit 叉頭蛋白E3抗體英文名稱:FOXE3 0.2ml
檸檬酸合酶(CS)ELISA試劑盒 CS ELISA Kit 叉頭蛋白F2抗體英文名稱:FOXF2 0.2ml
檸檬素(Citrin)ELISA試劑盒 Citrin ELISA Kit 叉頭蛋白H1抗體英文名稱:FOXH1 0.2ml
鎳紋蛋白(METRN)ELISA試劑盒 METRN ELISA Kit 叉頭蛋白I1抗體英文名稱:FOXI1 0.2ml
脲酰丙酸酶β(UPβ1)ELISA試劑盒 UPβ1 ELISA Kit 磷酸化叉頭蛋白4抗體英文名稱:phospho-FOXO4 (Thr451) 0.1ml
尿調(diào)蛋白(UMOD)ELISA試劑盒 UMOD ELISA Kit 單跨膜蛋白FOXRED1抗體英文名稱:FOXRED1 0.2ml
尿酸鹽轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白1(URAT1)ELISA試劑盒 URAT1 ELISA Kit FOXRED2蛋白抗體英文名稱:FOXRED2 0.2ml
尿溶蛋白3B(UPK3B)ELISA試劑盒 UPK3B ELISA Kit 巖藻糖1磷酸鳥苷酰轉(zhuǎn)移酶抗體英文名稱:FPGT 0.2ml
尿溶蛋白3A(UPK3A)ELISA試劑盒 UPK3A ELISA Kit 細(xì)胞外基質(zhì)蛋白FREM1抗體英文名稱:FREM1 0.2ml
尿溶蛋白2(UPK2)ELISA試劑盒 UPK2 ELISA Kit 原癌基因FRAT1抗體英文名稱:FRAT1 0.2ml
尿溶蛋白1A(UPK1A)ELISA試劑盒 UPK1A ELISA Kit 凝血因子11重鏈抗體英文名稱:Factor XI heavy chain 0.1ml
尿溶蛋白1B(UPK1B)ELISA試劑盒 UPK1B ELISA Kit 叉頭蛋白D1抗體英文名稱:FOXD1 0.2ml
50T淋球菌PCR檢測(cè)試劑盒100g 氯化鈉 Sodium Chloride 密封保存
100g 檸檬酸鈉,二水 Sodium Citrate Dihydrate 室溫保存
5g Sodium Cyanoborohydride 室溫陰涼干燥保存
25g 氟化鈉 Sodium Fluoride 室溫保存
25g 十二烷基肌氨酸鈉 Sodium Lauroylsarcosine 室溫保存
25g 偏釩酸鈉 Sodium Metavanadate 室溫保存
25g 原釩酸鈉,十二水 Sodium Orthovanadate Dodecahydrate 室溫密封保存
25g 琥珀酸鈉,六水 Sodium Succinic Hexahydrate 室溫保存
500g 四硼酸鈉,十水 Sodium Tetraborate Decahydrate 室溫保存
250g D- 山梨醇 D-Sorbitol 室溫保存
5g L- 山梨糖 L-(?)-Sorbose 室溫干燥保存
1g 鹽酸壯觀霉素 Spectinomycindihydrochloride Pentahydrate 4℃保存
1g 四鹽酸精胺 Spermidine 4HCl 室溫保存
2. 引物和探針經(jīng)過優(yōu)化,靈敏性高。
3. 提供陽性對(duì)照,便于區(qū)分假陰性樣品。
4. 特異性高,引物是根據(jù)高度保守區(qū)設(shè)計(jì),不會(huì)跟其他病毒的RNA發(fā)生交叉反應(yīng)。
5. 本產(chǎn)品足夠 50 次 20μL 體系的探針法熒光定量 RT-PCR 反應(yīng)。
6. 本產(chǎn)品只能用于科研。
接受訂單及樣品——RNA提取——RNA質(zhì)量檢測(cè)——樣品cDNA合成——定量試驗(yàn)——數(shù)據(jù)分析——結(jié)果交付——售后服務(wù)。
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s →58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保溫7min。
使用方法:
一、樣品 DNA 的制備
用自選方法提取 Cps DNA。注意:DNA 純化方法是決定檢測(cè)靈敏度的關(guān)鍵因素。如果不能很好純化樣品 DNA,后面的 PCR 再靈敏也不能提高整體檢測(cè)靈敏度。
二、制備 Cps 標(biāo)準(zhǔn)曲線(以 10-10E6 這 6 個(gè) 10 倍稀釋度為例。由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散傳染性病原,本產(chǎn)品不提供活體病毒做陽性對(duì)照,只提供沒有傳染性的、可以直接使用的 DN**段作為陽性對(duì)照。
1. 標(biāo)記 6 個(gè)離心管,分別為 6,5,4,3,2 和 1 號(hào)。
2. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 超純水(*好用帶芯槍頭,下同)。
3. 先將本試劑盒提供的陽性對(duì)照用 TE 緩沖液或超純水 10 倍梯度稀釋到10E7 拷貝/μL(注:請(qǐng)不要將本試劑盒提供的標(biāo)準(zhǔn)品一次性稀釋至 10E7拷貝/μL,建議每次稀釋 10 倍,梯度稀釋至 10E7 拷貝/μL)。
4. 在 6 號(hào)管中加入 5 μL 10E7 拷貝/μL 的 Cps 陽性對(duì)照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 10E6 拷貝/μL 的陽性對(duì)照。
5. 換槍頭,從 6 號(hào)管中取 5 μL 溶液到 5 號(hào)管中,充分震蕩 1 分鐘,得 10E5拷貝/μL 的陽性對(duì)照。
6. 換槍頭,從 5 號(hào)管中取 5 μL 溶液到 4 號(hào)管中,重復(fù)上面的操作直到得到 6個(gè)稀釋度的陽性對(duì)照。
7. NC 管中不加任何陽性對(duì)照。
8. 從 1-6 號(hào)管中分別取 5 μL 和待測(cè)樣品一起進(jìn)行定量 PCR(見下步),每個(gè)樣品做 3 次重復(fù)。PCR 后得到每個(gè)陽性對(duì)照稀釋樣品的熒光 PCR Ct 值,并以之為縱軸,以濃度的對(duì)數(shù)值為橫軸,繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。
①加入試劑的順序應(yīng)一致,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時(shí)間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照雞血紅蛋白(HB)ELISA檢測(cè)試劑盒說明書中標(biāo)明的時(shí)間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。
④底物A應(yīng)揮發(fā),避免長(zhǎng)時(shí)間打開蓋子。底物B對(duì)光敏感,避免長(zhǎng)時(shí)間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實(shí)驗(yàn)完成后應(yīng)立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標(biāo)板時(shí)應(yīng)充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時(shí),避免使用帶金屬部分的加樣器 。
⑦實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。
⑧試劑應(yīng)按標(biāo)簽說明書儲(chǔ)存,使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄,不可保存。
⑨不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號(hào)的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。
凝血因子Ⅴ(F5)ELISA試劑盒 F5 ELISA Kit 胚胎干細(xì)胞相關(guān)蛋白FOPNL抗體英文名稱:FOPNL 0.2ml