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它具有下列特點:
1. 即開即用,用戶只需要提供樣品RNA模板。
2. 引物和探針經(jīng)過優(yōu)化,靈敏性高。
3. 提供陽性對照,便于區(qū)分假陰性樣品。
4. 特異性高,引物是根據(jù)高度保守區(qū)設計,不會跟其他病毒的RNA發(fā)生交叉反應。
5. 本產(chǎn)品足夠 50 次 20μL 體系的探針法熒光定量 RT-PCR 反應。
6. 本產(chǎn)品只能用于科研。
服務流程:
接受訂單及樣品——RNA提取——RNA質(zhì)量檢測——樣品cDNA合成——定量試驗——數(shù)據(jù)分析——結果交付——售后服務。
產(chǎn)品名稱 |
規(guī)格 |
貨號 |
50T土拉弗朗西斯菌PCR檢測試劑盒 |
50T |
BH-P63778 |
實驗方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s →58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保溫7min。
使用方法:
一、樣品 DNA 的制備
用自選方法提取 Cps DNA。注意:DNA 純化方法是決定檢測靈敏度的關鍵因素。如果不能很好純化樣品 DNA,后面的 PCR 再靈敏也不能提高整體檢測靈敏度。
二、制備 Cps 標準曲線(以 10-10E6 這 6 個 10 倍稀釋度為例。由于標準品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨立的區(qū)域進行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴散傳染性病原,本產(chǎn)品不提供活體病毒做陽性對照,只提供沒有傳染性的、可以直接使用的 DN**段作為陽性對照。
1. 標記 6 個離心管,分別為 6,5,4,3,2 和 1 號。
2. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 超純水(*好用帶芯槍頭,下同)。
3. 先將本試劑盒提供的陽性對照用 TE 緩沖液或超純水 10 倍梯度稀釋到10E7 拷貝/μL(注:請不要將本試劑盒提供的標準品一次性稀釋至 10E7拷貝/μL,建議每次稀釋 10 倍,梯度稀釋至 10E7 拷貝/μL)。
4. 在 6 號管中加入 5 μL 10E7 拷貝/μL 的 Cps 陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 10E6 拷貝/μL 的陽性對照。
5. 換槍頭,從 6 號管中取 5 μL 溶液到 5 號管中,充分震蕩 1 分鐘,得 10E5拷貝/μL 的陽性對照。
6. 換槍頭,從 5 號管中取 5 μL 溶液到 4 號管中,重復上面的操作直到得到 6個稀釋度的陽性對照。
7. NC 管中不加任何陽性對照。
8. 從 1-6 號管中分別取 5 μL 和待測樣品一起進行定量 PCR(見下步),每個樣品做 3 次重復。PCR 后得到每個陽性對照稀釋樣品的熒光 PCR Ct 值,并以之為縱軸,以濃度的對數(shù)值為橫軸,繪制標準曲線。
注意事項:
①加入試劑的順序應一致,以保證所有反應板孔溫育的時間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照雞血紅蛋白(HB)ELISA檢測試劑盒說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。
④底物A應揮發(fā),避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實驗完成后應立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標板時應充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標反應孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時,避免使用帶金屬部分的加樣器 。
⑦實驗中不用的板條應立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。
⑧試劑應按標簽說明書儲存,使用前恢復到室溫。稀稀過后的標準品應丟棄,不可保存。
⑨不用的其它試劑應包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。
角蛋白20(KRT20)ELISA試劑盒 KRT20 ELISA Kit 顆粒酶A抗體英文名稱:GZMA/Granzyme A 0.1ml
角蛋白2(KRT2)ELISA試劑盒 KRT2 ELISA Kit 顆粒酶D/B/E/N/G/F/H抗體英文名稱:Granzyme D/B/E/N/G/F/H 0.1ml
角蛋白19(KRT19)ELISA試劑盒 KRT19 ELISA Kit 粒細胞-巨噬細胞集落刺激因子3受體抗體英文名稱:G-CSFR/CD114/GCSF Receptor 0.1ml
角蛋白18(KRT18)ELISA試劑盒 KRT18 ELISA Kit 血型糖蛋白A/涎糖蛋白抗體英文名稱:GPA/GYPA/CD235a 0.1ml
角蛋白17(KRT17)ELISA試劑盒 KRT17 ELISA Kit G蛋白修補結構域蛋白3抗體英文名稱:GPATCH3 0.2ml
角蛋白16(KRT16)ELISA試劑盒 KRT16 ELISA Kit G蛋白偶聯(lián)受體GPR63蛋白抗體英文名稱:GPR63 0.2ml
角蛋白15(KRT15)ELISA試劑盒 KRT15 ELISA Kit 磷酸化珠蛋白轉(zhuǎn)錄因子1抗體英文名稱:phospho-GATA1(Ser161) 0.1ml
角蛋白14(KRT14)ELISA試劑盒 KRT14 ELISA Kit G蛋白偶聯(lián)受體109A抗體英文名稱:GPR109A 0.1ml
角蛋白13(KRT13)ELISA試劑盒 KRT13 ELISA Kit G蛋白偶聯(lián)受體15抗體英文名稱:GPR15 0.1ml
角蛋白12(KRT12)ELISA試劑盒 KRT12 ELISA Kit 粒細胞-巨噬細胞集落刺激因子受體β抗體英文名稱:IL3RB 0.1ml
角蛋白10(KRT10)ELISA試劑盒 KRT10 ELISA Kit 生長停滯特異性蛋白8抗體英文名稱:GAS8 0.2ml
角蛋白1(KRT1)ELISA試劑盒 KRT1 ELISA Kit G蛋白偶聯(lián)受體GPR135蛋白抗體英文名稱:GPR135 0.2ml
焦磷酸酶2(PPA2)ELISA試劑盒 PPA2 ELISA Kit 磷脂?;嫉鞍拙厶?5抗體英文名稱:Glypican 5 0.2ml
膠質(zhì)細胞系來源神經(jīng)營養(yǎng)因子受體α1(GFRα1)ELISA試劑盒 GFRα1 ELISA Kit GTP結合蛋白4抗體(慢性腎功能衰竭蛋白)英文名稱:GTPBP4 0.2ml
焦磷酸酶1(PPA1)ELISA試劑盒 PPA1 ELISA Kit GADD45γ相互作用蛋白1抗體英文名稱:GADD45GIP1 0.2ml
50T土拉弗朗西斯菌PCR檢測試劑盒1瓶 MEL細胞株 MEL 低溫運輸和保存
1瓶 MFC-GFP細胞株 MFC-GFP 低溫運輸和保存
1瓶 MFC細胞株 MFC 低溫運輸和保存
1瓶 MG-63細胞株 MG-63 低溫運輸和保存
1瓶 MGC-803細胞株 MGC-803 低溫運輸和保存
1瓶 MKN-28細胞株 MKN-28 低溫運輸和保存
1瓶 MKN45細胞株 MKN45 低溫運輸和保存
1瓶 MLTC-1細胞株 MLTC-1 低溫運輸和保存
1瓶 MMQ細胞株 MMQ 低溫運輸和保存
1瓶 MNNG/HOSCl#5 [R-1059-D]細胞株 MNNG/HOSCl#5 [R-1059-D] 低溫運輸和保存
1瓶 MOLM-13細胞株 MOLM-13 低溫運輸和保存
1瓶 MOLT-4細胞株 MOLT-4 低溫運輸和保存
1瓶 Mouse podocyte(含 tsSV40T 序列)細胞株 Mouse podocyte(含 tsSV40T 序列) 低溫運輸和保存