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產(chǎn)品詳情
  • 產(chǎn)品名稱(chēng):50T馬鏈球菌(S. equi)PCR檢測(cè)試劑盒

  • 產(chǎn)品型號(hào):BH-P63932
  • 產(chǎn)品**:博湖
  • 產(chǎn)品文檔:
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簡(jiǎn)單介紹:
50T馬鏈球菌(S. equi)PCR檢測(cè)試劑盒均經(jīng)過(guò)了20余種標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的保守性驗(yàn)證及40余種近緣標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的特異性驗(yàn)證,確保在使用過(guò)程中不會(huì)出現(xiàn)任何的假陽(yáng)性及假陰性報(bào)告結(jié)果。
詳情介紹:

服務(wù)流程:
接受訂單及樣品——RNA提取——RNA質(zhì)量檢測(cè)——樣品cDNA合成——定量試驗(yàn)——數(shù)據(jù)分析——結(jié)果交付——售后服務(wù)。

產(chǎn)品名稱(chēng)

規(guī)格

貨號(hào)

50T馬鏈球菌(S. equi)PCR檢測(cè)試劑盒

50T

BH-P63932

它具有下列特點(diǎn):

1. 即開(kāi)即用,用戶(hù)只需要提供樣品RNA模板。
2. 引物和探針經(jīng)過(guò)優(yōu)化,靈敏性高。
3. 提供陽(yáng)性對(duì)照,便于區(qū)分假陰性樣品。
4. 特異性高,引物是根據(jù)高度保守區(qū)設(shè)計(jì),不會(huì)跟其他病毒的RNA發(fā)生交叉反應(yīng)。
5. 本產(chǎn)品足夠 50 次 20μL 體系的探針?lè)晒舛?RT-PCR 反應(yīng)。
6. 本產(chǎn)品只能用于科研。


實(shí)驗(yàn)方法步驟:

方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix (2mM)             
4 μl     引物1(10pM)                 
2 μl     引物2(10pM)                 
2 μl     Taq酶 (2U/μl)               
1 μl     DNA模板(50ng-1μg/μl)  
1 μl      加ddH2O至 50 μl  
PCR儀有無(wú)熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s →58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保溫7min。
使用方法:
一、樣品 DNA 的制備
用自選方法提取 Cps DNA。注意:DNA 純化方法是決定檢測(cè)靈敏度的關(guān)鍵因素。如果不能很好純化樣品 DNA,后面的 PCR 再靈敏也不能提高整體檢測(cè)靈敏度。
二、制備 Cps 標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)(以 10-10E6 這 6 個(gè) 10 倍稀釋度為例。由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行,千萬(wàn)不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散傳染性病原,本產(chǎn)品不提供活體病毒做陽(yáng)性對(duì)照,只提供沒(méi)有傳染性的、可以直接使用的 DN**段作為陽(yáng)性對(duì)照。
1. 標(biāo)記 6 個(gè)離心管,分別為 6,5,4,3,2 和 1 號(hào)。
2. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 超純水(*好用帶芯槍頭,下同)。
3. 先將本試劑盒提供的陽(yáng)性對(duì)照用 TE 緩沖液或超純水 10 倍梯度稀釋到10E7 拷貝/μL(注:請(qǐng)不要將本試劑盒提供的標(biāo)準(zhǔn)品一次性稀釋至 10E7拷貝/μL,建議每次稀釋 10 倍,梯度稀釋至 10E7 拷貝/μL)。
4. 在 6 號(hào)管中加入 5 μL 10E7 拷貝/μL 的 Cps 陽(yáng)性對(duì)照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 10E6 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照。
5. 換槍頭,從 6 號(hào)管中取 5 μL 溶液到 5 號(hào)管中,充分震蕩 1 分鐘,得 10E5拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照。
6. 換槍頭,從 5 號(hào)管中取 5 μL 溶液到 4 號(hào)管中,重復(fù)上面的操作直到得到 6個(gè)稀釋度的陽(yáng)性對(duì)照。
7. NC 管中不加任何陽(yáng)性對(duì)照。
8. 從 1-6 號(hào)管中分別取 5 μL 和待測(cè)樣品一起進(jìn)行定量 PCR(見(jiàn)下步),每個(gè)樣品做 3 次重復(fù)。PCR 后得到每個(gè)陽(yáng)性對(duì)照稀釋樣品的熒光 PCR Ct 值,并以之為縱軸,以濃度的對(duì)數(shù)值為橫軸,繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)。
BH3相互作用域死亡激動(dòng)劑(Bid)ELISA試劑盒  Bid ELISA Kit  LIN7C蛋白抗體英文名稱(chēng):LIN7C 0.2ml

Bcl2樣蛋白11(BCL2L11)ELISA試劑盒  BCL2L11 ELISA Kit  富含亮氨酸重復(fù)序列Nogo受體反應(yīng)蛋白4抗體英文名稱(chēng):LINGO4 0.2ml

Bcl2相關(guān)髓細(xì)胞白血病序列1(MCL1)ELISA試劑盒  MCL1 ELISA Kit  富含亮氨酸α2糖蛋白抗體英文名稱(chēng):LRG1 0.2ml

Bcl2拮抗/殺傷因子1(BAK1)ELISA試劑盒  BAK1 ELISA Kit  腦特異性磷脂酸磷酸酶樣蛋白1抗體英文名稱(chēng):LPPR4 0.2ml

Bcl2關(guān)聯(lián)永生基因3(BAG3)ELISA試劑盒  BAG3 ELISA Kit  跨膜蛋白TMEM176B抗體英文名稱(chēng):LR8 0.2ml

Bcl2關(guān)聯(lián)X蛋白(Bax)ELISA試劑盒  Bax ELISA Kit  富含亮氨酸重復(fù)跨膜神經(jīng)元蛋白2抗體英文名稱(chēng):LRRTM2 0.2ml

Battenin蛋白(BTS)ELISA試劑盒  BTS ELISA Kit  富含亮氨酸重復(fù)跨膜神經(jīng)元蛋白4抗體英文名稱(chēng):LRRTM4 0.2ml

Bassoon蛋白(BSN)ELISA試劑盒  BSN ELISA Kit  LZIC蛋白抗體英文名稱(chēng):LZIC 0.2ml

Axotrophin蛋白(AXOT)ELISA試劑盒  AXOT ELISA Kit  Lgi3蛋白抗體英文名稱(chēng):LGI3 0.2ml

Axis抑制蛋白2(AXIN2)ELISA試劑盒  AXIN2 ELISA Kit  Lhx4蛋白抗體英文名稱(chēng):Lhx4 0.2ml

Attractin蛋白(ATRN)ELISA試劑盒  ATRN ELISA Kit  信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)分子SCDO3抗體英文名稱(chēng):Lunatic Fringe 0.2ml

Atrophin1蛋白(ATN1)ELISA試劑盒  ATN1 ELISA Kit  RNA聚合酶相關(guān)蛋白LEO1抗體英文名稱(chēng):LEO1 0.1ml

ATP結(jié)合盒轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白G2(ABCG2)ELISA試劑盒  ABCG2 ELISA Kit  細(xì)胞性脈絡(luò)叢腦膜炎病毒蛋白抗體英文名稱(chēng):LCMV 0.2ml

ATP結(jié)合盒轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白A4(ABCA4)ELISA試劑盒  ABCA4 ELISA Kit  黃體釋放/促性腺釋放抗體英文名稱(chēng):Gonadoliberin-1 0.2ml

ATP結(jié)合盒轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白G1(ABCG1)ELISA試劑盒  ABCG1 ELISA Kit  自噬微管相關(guān)蛋白輕鏈3A/3B抗體英文名稱(chēng):LC3A/B 0.1ml

50T馬鏈球菌(S. equi)PCR檢測(cè)試劑盒100mL Hybridization Solutions in SSC  Hybridization Solutions in SSC  常溫保存

100mL Hybridization Solutions in SSPE  Hybridization Solutions in SSPE  常溫保存

10mL Hygromycin B Solution  Hygromycin B Solution  常溫保存

500mL IEF Anode Buffer,50X IEF Anode Buffer,50X 常溫保存

250mL IEF Cathode Buffer,10X IEF Cathode Buffer,10X 常溫保存

25mL IEF Sample Buffer,2X,pH 3-10  IEF Sample Buffer,2X,pH 3-10  常溫保存

25mL IEF Sample Buffer,4X,pH 3-7  IEF Sample Buffer,4X,pH 3-7  常溫保存

100mL Imidazole Buffer(咪唑緩沖液),0.5M,pH6.0  Imidazole Buffer,0.5M,pH6.0  常溫保存

100mL Imidazole Buffer(咪唑緩沖液),0.5M,pH6.5  Imidazole Buffer,0.5M,pH6.5  常溫保存

100mL Imidazole Buffer(咪唑緩沖液),0.5M,pH7.0  Imidazole Buffer,0.5M,pH7.0  常溫保存

100mL Imidazole Buffer(咪唑緩沖液),0.5M,pH7.4   Imidazole Buffer,0.5M,pH7.4   常溫保存

500mL Imidazole Buffered Saline(咪唑緩沖鹽水),5X,pH7.0  Imidazole Buffered Saline,5X,pH7.0  常溫保存

5g IPTG Solution(IPTG溶液),20% IPTG Solution,20% 常溫保存

注意事項(xiàng):
①加入試劑的順序應(yīng)一致,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時(shí)間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照雞血紅蛋白(HB)ELISA檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書(shū)中標(biāo)明的時(shí)間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。
④底物A應(yīng)揮發(fā),避免長(zhǎng)時(shí)間打開(kāi)蓋子。底物B對(duì)光敏感,避免長(zhǎng)時(shí)間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實(shí)驗(yàn)完成后應(yīng)立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標(biāo)板時(shí)應(yīng)充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時(shí),避免使用帶金屬部分的加樣器 。
⑦實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。
⑧試劑應(yīng)按標(biāo)簽說(shuō)明書(shū)儲(chǔ)存,使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過(guò)后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄,不可保存。
⑨不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號(hào)的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。

 


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