試劑配制:

1、酶聯(lián)板assay plate ：一塊96孔或者48孔。
2、標(biāo)準(zhǔn)品standard：2瓶?jī)龈善贰?br> 3、樣品稀釋液sample diluent：1×20ml/瓶。
4、生物素標(biāo)記抗體稀釋液biotin-antibody diluent：1×10ml/瓶。
5、辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記親和素稀釋液 hrp-avidin diluent：1×10ml/瓶。
6、生物素標(biāo)記抗體biotin-antibody：1×120μl/瓶1：100
7、辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記親和素hrp-avidin：1×120μl/瓶1：100
8、底物溶液tmb e：1×10ml/瓶。
9、濃洗滌液wash buffer：1×20ml/瓶，使用時(shí)每瓶用蒸餾水稀釋25倍。
10、終止液stop solution：1×10ml/瓶2n h2so4。

試劑準(zhǔn)備：
1. 使用前將所有的試劑和標(biāo)本緩慢均衡至室溫(18-25oC)，試劑不能直接在37oC溶解。
2. 標(biāo)準(zhǔn)品(凍干品)：每瓶標(biāo)準(zhǔn)品加入標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液1mL，蓋好后室溫靜置大約10分鐘，同時(shí)反復(fù)顛倒/搓動(dòng)以助溶解，其濃度為2000pg/mL。準(zhǔn)備7個(gè)稀釋標(biāo)準(zhǔn)品的EP管，每個(gè)EP管中加入150μL的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液，如圖所示依次倍比稀釋成不同的梯度， 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液(0pg/mL)直接作為空白孔。為保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果有效性，每次實(shí)驗(yàn)請(qǐng)使用新的標(biāo)準(zhǔn)品溶液。
3. 濃洗滌液：用580mL蒸餾水或去離子水將20mL濃洗滌液稀釋至600mL，進(jìn)行30倍稀釋。

我司主營(yíng)產(chǎn)品之一，產(chǎn)品皆嚴(yán)格按照相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行生產(chǎn)，并經(jīng)過(guò)了嚴(yán)格地反復(fù)地檢測(cè)，我們以嚴(yán)謹(jǐn)?shù)膽B(tài)度保證產(chǎn)品的質(zhì)量，從而保證您的實(shí)驗(yàn)順利進(jìn)行。產(chǎn)品供貨周期短，供貨及時(shí)，且我司還提供完整的售前和售后服務(wù)。本公司產(chǎn)品僅用于科研。

樣本實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備：
ELISA試劑盒液體樣本：包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清等。
（1）血清
室溫血液自然凝固10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。
（2）血漿：
應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑，混合10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。
（3）尿液：
用無(wú)菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實(shí)行。
（4）細(xì)胞培養(yǎng)上清：
檢測(cè)分泌性的成份時(shí)，用無(wú)菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。
（5）培養(yǎng)細(xì)胞
檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)的成份時(shí)，用PBS（PH7.2-7.4）稀釋細(xì)胞懸液，細(xì)胞濃度達(dá)到100萬(wàn)/ml左右。通過(guò)反復(fù)凍融或加入組織蛋白萃取試劑，以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。
（6）組織標(biāo)本
切割標(biāo)本后，稱取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS（PH7.4），或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿化。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測(cè)，其余冷凍備用。

注意事項(xiàng)：

1. 試劑盒應(yīng)在有效期內(nèi)使用，請(qǐng)不要使用過(guò)期的試劑。
2. 試劑盒未使用時(shí)應(yīng)保存在 2-8℃冰箱，已復(fù)溶但未用完的標(biāo)準(zhǔn)品，請(qǐng)丟棄。
3. 試劑盒使用前請(qǐng)?jiān)谑覝鼗謴?fù) 30 min，且充分混勻試劑盒里的各種成份及制備的樣品。
4. 在試驗(yàn)中標(biāo)準(zhǔn)品和樣本建議作復(fù)孔檢測(cè)，且加入試劑的順序應(yīng)保持一致。
5. 為避免交叉污染，請(qǐng)?jiān)谠囼?yàn)中使用 1 次性試管，槍頭，封板膜及潔凈塑料容器。
6. 濃縮生物素化抗體和濃縮酶結(jié)合物的體積較少，在運(yùn)輸過(guò)程中微量液體會(huì)沾到管壁及瓶蓋上，使用前請(qǐng)離心處理（5-10 S 即可），使管壁上的液體集中在管底部，取用時(shí)，請(qǐng)用移液器小心吹打幾次。
7. 除了試劑盒中的濃縮洗滌液和終止液可以通用外，請(qǐng)不要使用其他來(lái)源試劑盒內(nèi)含的試劑代替本試劑盒中的某單個(gè)組分。
8. 為保證結(jié)果準(zhǔn)確，每次檢測(cè)均需做標(biāo)準(zhǔn)曲線。

操作流程：
（1）待測(cè)樣品孔中每孔加入待測(cè)樣品100μl，每種樣品設(shè)3個(gè)平行孔；設(shè)兩個(gè)陰性對(duì)照孔，每孔加未處理組的細(xì)胞裂解液100μl；另設(shè)一個(gè)空白對(duì)照孔，加入純細(xì)胞裂解液100μl。 
（2）酶標(biāo)板置4℃，包被過(guò)夜。
（3）洗板：吸干孔內(nèi)反應(yīng)液，用洗滌液過(guò)洗一遍（將洗滌液注滿板孔后，即甩去），之后將洗滌液注滿板孔，浸泡1-2分鐘，間歇搖動(dòng)。甩去孔內(nèi)液體后在吸水紙上拍干。重復(fù)洗滌3-4次。
（4）陰性對(duì)照孔每孔加入PBS 50μl，樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。 
（5）酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi)，孵育60min。 
（6）洗板，同（4）。 
（7）每孔加1:5000稀釋的HRP-標(biāo)記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。 
（8）酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi)，孵育60min。 
（9）洗板，同（4）。 
（10）每孔加TMB顯色液 100μl，輕輕混勻10s，置37℃暗處反應(yīng)15-20min。 
（11）每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應(yīng)。 
（12）分別測(cè)450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2，終測(cè)得的OD值為兩者之差（W1-W2），以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
（13）數(shù)據(jù)處理：在得出標(biāo)本（S）和陰性對(duì)照（N）的 OD值后，計(jì)算S/N值。S/N≥2.1為陽(yáng)性判定標(biāo)準(zhǔn)。
乙酰檸檬酸三丁酯標(biāo)準(zhǔn)品 英文名稱  Acetyltributyl Citrate 規(guī)格：  500mg 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)

乙酰檸檬酸三乙酯標(biāo)準(zhǔn)品 英文名稱  Acetyltriethyl Citrate 規(guī)格：  500mg 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)

N-乙酰-L-酪氨酸標(biāo)準(zhǔn)品 英文名稱  N-Acetyl-L-Tyrosine 規(guī)格：  100mg 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)

阿維A標(biāo)準(zhǔn)品 英文名稱  Acitretin 規(guī)格：  200mg 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)

阿維A相關(guān)物質(zhì)A標(biāo)準(zhǔn)品 英文名稱   規(guī)格：  20mg 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)

阿維A相關(guān)物質(zhì)B標(biāo)準(zhǔn)品 英文名稱   規(guī)格：  20mg 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)

阿達(dá)帕林雜質(zhì)C標(biāo)準(zhǔn)品 英文名稱   規(guī)格：  25mg 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)

黃肉楠堿標(biāo)準(zhǔn)品 英文名稱  Actein 規(guī)格：  20mg 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)

阿昔洛韋標(biāo)準(zhǔn)品 英文名稱  Acyclovir 規(guī)格：  300mg 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)

阿昔洛韋相關(guān)物質(zhì)A標(biāo)準(zhǔn)品 英文名稱   規(guī)格：  50mg 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) 人 IGSF21 基因全長(zhǎng)ORF克隆

人 IGSF21 基因全長(zhǎng)ORF克隆

人 Coagulation Factor X / FX / F10 桿狀病毒-昆蟲(chóng)細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) (變性)

甲型流感 H11N9 (A/mallard/Alberta/294/1977) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 基因全長(zhǎng)ORF克隆 (密碼子優(yōu)化)(表達(dá)載體)

小鼠 VEGF-A 轉(zhuǎn)錄變體3 基因全長(zhǎng)ORF克隆 (表達(dá)載體), 無(wú)標(biāo)簽

Immunoprecipitation/ IP Kit - Anti-Peroxiredoxin 1 / PRDX1 Immunomagnetic Beads IP    5 mL

甲型流感 H1N1 (A/Ohio/07/2009) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) (變性)

Immunoprecipitation/ IP Kit - Anti-NT5C3A Immunomagnetic Beads IP    5 mL

小鼠 SDC4 基因全長(zhǎng)ORF克隆 (表達(dá)載體), 無(wú)標(biāo)簽

大鼠 GZMC 基因全長(zhǎng)ORF克隆

人 CD208 / DC-LAMP / LAMP3 ELISA配對(duì)抗體

人 ASUN 基因全長(zhǎng)ORF克隆

小鼠腫瘤壞死因子可溶性受體Ⅱ(TNFsR-Ⅱ)ELISA KitCAMTA1  鈣調(diào)蛋白結(jié)合轉(zhuǎn)錄激活因子1抗體 0.2ml

巖藻糖基轉(zhuǎn)移酶7(FUT7)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)吸附試驗(yàn)法)    ELISA Kit for Fucosyltransferase 7 (FUT7)    規(guī)格：48T/96T 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)

p95 NBS1/Cell cycle regulatory protein p95  細(xì)胞周期調(diào)節(jié)蛋白P95抗體 0.2ml

Cullin 4A蛋白(CUL4A)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)吸附試驗(yàn)法)    ELISA Kit for Cullin 4A (CUL4A)    規(guī)格：48T/96T 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)

VHR/DUSP3  絲氨酸/蘇氨酸特定蛋酸酶抗體 0.2ml

黑素皮質(zhì)4受體(MC4R)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)吸附試驗(yàn)法)    ELISA Kit for Melacortin 4 Receptor (MC4R)    規(guī)格：48T/96T 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)

FAM107A  腎細(xì)胞癌下調(diào)蛋白1抗體 0.2ml

Actamin 8蛋白(A8)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)吸附試驗(yàn)法)    ELISA Kit for Actamin 8 (A8)    規(guī)格：48T/96T 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)

RLLM1/C14orf166  胰腺癌轉(zhuǎn)移相關(guān)蛋白R(shí)LLM1抗體 0.2ml

Nesprin 1蛋白(Nesp1)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)吸附試驗(yàn)法)    ELISA Kit for Nesprin 1 (Nesp1)    規(guī)格：48T/96T 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)

ZDHHC17/HIP14  NFκB激活蛋白205抗體 0.1ml

磷酸核糖甲酰甘氨酸脒合酶(PFAS)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)吸附試驗(yàn)法)    ELISA Kit for Phosphoribosylformylglycinamidine Synthase (PFAS)    規(guī)格：48T/96T 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)