試劑配制:

1、酶聯(lián)板assay plate ：一塊96孔或者48孔。
2、標(biāo)準(zhǔn)品standard：2瓶?jī)龈善贰?br> 3、樣品稀釋液sample diluent：1×20ml/瓶。
4、生物素標(biāo)記抗體稀釋液biotin-antibody diluent：1×10ml/瓶。
5、辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記親和素稀釋液 hrp-avidin diluent：1×10ml/瓶。
6、生物素標(biāo)記抗體biotin-antibody：1×120μl/瓶1：100
7、辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記親和素hrp-avidin：1×120μl/瓶1：100
8、底物溶液tmb e：1×10ml/瓶。
9、濃洗滌液wash buffer：1×20ml/瓶，使用時(shí)每瓶用蒸餾水稀釋25倍。
10、終止液stop solution：1×10ml/瓶2n h2so4。

試劑準(zhǔn)備：
1. 使用前將所有的試劑和標(biāo)本緩慢均衡至室溫(18-25oC)，試劑不能直接在37oC溶解。
2. 標(biāo)準(zhǔn)品(凍干品)：每瓶標(biāo)準(zhǔn)品加入標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液1mL，蓋好后室溫靜置大約10分鐘，同時(shí)反復(fù)顛倒/搓動(dòng)以助溶解，其濃度為2000pg/mL。準(zhǔn)備7個(gè)稀釋標(biāo)準(zhǔn)品的EP管，每個(gè)EP管中加入150μL的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液，如圖所示依次倍比稀釋成不同的梯度， 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液(0pg/mL)直接作為空白孔。為保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果有效性，每次實(shí)驗(yàn)請(qǐng)使用新的標(biāo)準(zhǔn)品溶液。
3. 濃洗滌液：用580mL蒸餾水或去離子水將20mL濃洗滌液稀釋至600mL，進(jìn)行30倍稀釋。

我司主營(yíng)產(chǎn)品之一，產(chǎn)品皆嚴(yán)格按照相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行生產(chǎn)，并經(jīng)過(guò)了嚴(yán)格地反復(fù)地檢測(cè)，我們以嚴(yán)謹(jǐn)?shù)膽B(tài)度保證產(chǎn)品的質(zhì)量，從而保證您的實(shí)驗(yàn)順利進(jìn)行。產(chǎn)品供貨周期短，供貨及時(shí)，且我司還提供完整的售前和售后服務(wù)。本公司產(chǎn)品僅用于科研。

樣本實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備：
ELISA試劑盒液體樣本：包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清等。
（1）血清
室溫血液自然凝固10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。
（2）血漿：
應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑，混合10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。
（3）尿液：
用無(wú)菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實(shí)行。
（4）細(xì)胞培養(yǎng)上清：
檢測(cè)分泌性的成份時(shí)，用無(wú)菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。
（5）培養(yǎng)細(xì)胞
檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)的成份時(shí)，用PBS（PH7.2-7.4）稀釋細(xì)胞懸液，細(xì)胞濃度達(dá)到100萬(wàn)/ml左右。通過(guò)反復(fù)凍融或加入組織蛋白萃取試劑，以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。
（6）組織標(biāo)本
切割標(biāo)本后，稱(chēng)取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS（PH7.4），或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿化。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測(cè)，其余冷凍備用。

注意事項(xiàng)：

1. 試劑盒應(yīng)在有效期內(nèi)使用，請(qǐng)不要使用過(guò)期的試劑。
2. 試劑盒未使用時(shí)應(yīng)保存在 2-8℃冰箱，已復(fù)溶但未用完的標(biāo)準(zhǔn)品，請(qǐng)丟棄。
3. 試劑盒使用前請(qǐng)?jiān)谑覝鼗謴?fù) 30 min，且充分混勻試劑盒里的各種成份及制備的樣品。
4. 在試驗(yàn)中標(biāo)準(zhǔn)品和樣本建議作復(fù)孔檢測(cè)，且加入試劑的順序應(yīng)保持一致。
5. 為避免交叉污染，請(qǐng)?jiān)谠囼?yàn)中使用 1 次性試管，槍頭，封板膜及潔凈塑料容器。
6. 濃縮生物素化抗體和濃縮酶結(jié)合物的體積較少，在運(yùn)輸過(guò)程中微量液體會(huì)沾到管壁及瓶蓋上，使用前請(qǐng)離心處理（5-10 S 即可），使管壁上的液體集中在管底部，取用時(shí)，請(qǐng)用移液器小心吹打幾次。
7. 除了試劑盒中的濃縮洗滌液和終止液可以通用外，請(qǐng)不要使用其他來(lái)源試劑盒內(nèi)含的試劑代替本試劑盒中的某單個(gè)組分。
8. 為保證結(jié)果準(zhǔn)確，每次檢測(cè)均需做標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)。

操作流程：
（1）待測(cè)樣品孔中每孔加入待測(cè)樣品100μl，每種樣品設(shè)3個(gè)平行孔；設(shè)兩個(gè)陰性對(duì)照孔，每孔加未處理組的細(xì)胞裂解液100μl；另設(shè)一個(gè)空白對(duì)照孔，加入純細(xì)胞裂解液100μl。 
（2）酶標(biāo)板置4℃，包被過(guò)夜。
（3）洗板：吸干孔內(nèi)反應(yīng)液，用洗滌液過(guò)洗一遍（將洗滌液注滿(mǎn)板孔后，即甩去），之后將洗滌液注滿(mǎn)板孔，浸泡1-2分鐘，間歇搖動(dòng)。甩去孔內(nèi)液體后在吸水紙上拍干。重復(fù)洗滌3-4次。
（4）陰性對(duì)照孔每孔加入PBS 50μl，樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。 
（5）酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi)，孵育60min。 
（6）洗板，同（4）。 
（7）每孔加1:5000稀釋的HRP-標(biāo)記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。 
（8）酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi)，孵育60min。 
（9）洗板，同（4）。 
（10）每孔加TMB顯色液 100μl，輕輕混勻10s，置37℃暗處反應(yīng)15-20min。 
（11）每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應(yīng)。 
（12）分別測(cè)450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2，終測(cè)得的OD值為兩者之差（W1-W2），以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
（13）數(shù)據(jù)處理：在得出標(biāo)本（S）和陰性對(duì)照（N）的 OD值后，計(jì)算S/N值。S/N≥2.1為陽(yáng)性判定標(biāo)準(zhǔn)。
刺五加苷E 英文名稱(chēng) Eleutheroside E  規(guī)格:  20mg/支進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 含量： 95%

三碘甲腺原氨酸 英文名稱(chēng) 測(cè)定用  規(guī)格:  20mg/支進(jìn)口/國(guó)產(chǎn)

肝素鈉 英文名稱(chēng) 效價(jià)測(cè)定  規(guī)格:  20mg/支進(jìn)口/國(guó)產(chǎn)

竹節(jié)香附素 A 英文名稱(chēng) 含量測(cè)定  規(guī)格:  20mg/支進(jìn)口/國(guó)產(chǎn)

對(duì)氨基酚 英文名稱(chēng) 檢查用  規(guī)格:  20mg/支進(jìn)口/國(guó)產(chǎn)

牡荊素鼠李糖苷 英文名稱(chēng) 含量測(cè)定  規(guī)格:  20mg/支進(jìn)口/國(guó)產(chǎn)

抑靈 標(biāo)準(zhǔn)品  CAS號(hào)：1085-98-9 250MG 英文名稱(chēng)   規(guī)格:  20mg/支進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 含量：

煙酰胺 英文名稱(chēng) 維生素B3；維生素PP；酰胺；尼古丁酰胺  規(guī)格:  20mg/支進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 含量： Nicotinamide

黃柏(黃皮樹(shù)) 英文名稱(chēng) 中藥對(duì)照藥材  規(guī)格:  20mg/支進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 含量： TLC法鑒別

紅大戟 英文名稱(chēng) 中藥對(duì)照藥材  規(guī)格:  20mg/支進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 含量： TLC法鑒別

色腙 英文名稱(chēng) 對(duì)照品  規(guī)格:  20mg/支進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 含量： 含量測(cè)定Polyethylene glycol sorbitan monolaurate， Polyoxyethylenesorbitan monolaurateTween 20， MegaPure Detergent， 10% Solution

1-O-Octadecyl-2-O-methyl-sn-glycerol （500 mg）2S-methoxy-3-（octadecyloxy）-1-propanol； PIA 7|2-Methyl-1-octadecyl-sn-glycerol； 1-O-Octadecyl-2-O-methyl-sn-glycerol

Bovine Serum Albumin – Heat Shock， Standard Grade， pH 7.0Bovine Serum Albumin – Heat Shock， Standard Grade， pH 7.0

NSC-622141； UFC 1CManumycin A

JWH 398 7-chloronaphthyl isomer （1 mg）（7-chloronaphthalen-1-yl）（1-pentyl-1H-indol-3-yl）methanone； JWH 398 7-chloronaphthyl isomer

2C-D （hydrochloride） （exempt preparation） （1 mg）2,5-Dimethoxy-4-methylphenethylamine； 2,5-dimethoxy-4-methyl-benzeneethanamine, monohydrochloride

PtdIns--4,5)-P2 -1,2-dipalmitoyl) -sodium salt) (5 mg)DPPI-4,5-P2|Phosphatidylinositol-4,5-diphosphate C-16, PtdIns--4,5)-P2 -1,2-dipalmitoyl) -sodium salt), 1-(1,2-dihexadecanoylphosphatidyl)inositol-4,5-bisphosphate, trisodium salt

RCS-4 N-（5-hydroxypentyl） metabolite-d5 （1 mg）（1-（5-hydroxypentyl）-1H-indol-3-yl-2，4，5，6，7-d5）（4-methoxyphenyl）methanone； RCS-4 N-（5-hydroxypentyl） metabolite-d5

DiaEasy Dialyzer (20 ml) MWCO 1 kDaDiaEasy Dialyzer (20 ml) MWCO 1 kDa

20-ethyl Prostaglandin E2 (50 mg)2-ethyl PGE2, 20-ethyl Prostaglandin E2, 9-oxo-11.alpha.,15S-dihydroxy-2a,2b-dihomoprosta-5Z,13E-dien-1-oic acid

MTEP （hydrochloride） （10 mg）3-[2-（2-methyl-4-thiazolyl）ethynyl]-pyridine， monohydrochloride； MTEP （hydrochloride）

Prostaglandin E Synthase-1 （microsomal） Blocking Peptide （1 ea）MGST1-L1|Membrane-Associated PGES-1|PGE Synthase-1|PGES-1|PIG12|Prostaglandin H/E Isomerase-1|mPGES-1； Prostaglandin E Synthase-1 （microsomal） Blocking Peptide

小鼠溶血磷脂酸受體3(LPAR3)免費(fèi)代測(cè)ELISA Kit60g/L化鈉蛋白胨肉湯 現(xiàn)貨促銷(xiāo) 250(g)

基質(zhì)γ羧基谷氨酸蛋白(MGP)ELISA試劑盒 英文名稱(chēng)：Human Matrix Gla Protein,MGP ELISA Kit規(guī)格:96T/48T大鼠吡啶交聯(lián)物(PY)ELISA Kit，48T/96T 進(jìn)口/分裝

化鈉三糖鐵 特價(jià)供應(yīng) 250(g)

小鼠白介素13(IL-13)ELISA試劑盒英文名稱(chēng)：Mouse Interleukin 13,IL-13 ELISA Kit 規(guī)格:96T/48T兔乙酰膽堿(ACh)ELISA Kit，48T/96T 進(jìn)口/國(guó)產(chǎn)

胰胨大豆瓊脂斜面（含3% NaCl） 現(xiàn)貨促銷(xiāo) 250(g)

小鼠孕酮受體(PROGR)ELISA試劑盒 英文名稱(chēng)：Rat Progesterone receptor,PROGR ELISA Kit規(guī)格:96T/48T磷脂酰肌醇抗體IgG/IgM(PI Ab-IgG/IgM)ELISA Kit，48T/96T進(jìn)口/分裝

42℃生長(zhǎng)培養(yǎng)基 特價(jià)供應(yīng) 250(g)

小鼠白介素2受體(IL-2R)ELISA試劑盒 英文名稱(chēng)：Mouse Interleukin-2 receptor,IL-2R ELISA Kit規(guī)格:96T/48T抗鏈球溶血素O/抗O(ASO)ELISA Kit，48T/96T

Hugh-Leifon葡萄糖肉湯（HLGB） 現(xiàn)貨促銷(xiāo) 250(g)

小鼠抗血小板抗體IgG/M/A(PA-IgG/M/A)ELISA試劑盒 英文名稱(chēng)：Mouse platelet antibodies IgG/M/A,PA-IgG/M/A ELISA Kit規(guī)格:96T/48T大鼠抗IgE受體抗體ELISA Kit，48T/96T