試劑配制:

1、酶聯(lián)板assay plate ：一塊96孔或者48孔。
2、標(biāo)準(zhǔn)品standard：2瓶凍干品。
3、樣品稀釋液sample diluent：1×20ml/瓶。
4、生物素標(biāo)記抗體稀釋液biotin-antibody diluent：1×10ml/瓶。
5、辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素稀釋液 hrp-avidin diluent：1×10ml/瓶。
6、生物素標(biāo)記抗體biotin-antibody：1×120μl/瓶1：100
7、辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素hrp-avidin：1×120μl/瓶1：100
8、底物溶液tmb e：1×10ml/瓶。
9、濃洗滌液wash buffer：1×20ml/瓶，使用時每瓶用蒸餾水稀釋25倍。
10、終止液stop solution：1×10ml/瓶2n h2so4。

試劑準(zhǔn)備：
1. 使用前將所有的試劑和標(biāo)本緩慢均衡至室溫(18-25oC)，試劑不能直接在37oC溶解。
2. 標(biāo)準(zhǔn)品(凍干品)：每瓶標(biāo)準(zhǔn)品加入標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液1mL，蓋好后室溫靜置大約10分鐘，同時反復(fù)顛倒/搓動以助溶解，其濃度為2000pg/mL。準(zhǔn)備7個稀釋標(biāo)準(zhǔn)品的EP管，每個EP管中加入150μL的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液，如圖所示依次倍比稀釋成不同的梯度， 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液(0pg/mL)直接作為空白孔。為保證實驗結(jié)果有效性，每次實驗請使用新的標(biāo)準(zhǔn)品溶液。
3. 濃洗滌液：用580mL蒸餾水或去離子水將20mL濃洗滌液稀釋至600mL，進行30倍稀釋。

我司主營產(chǎn)品之一，產(chǎn)品皆嚴(yán)格按照相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)進行生產(chǎn)，并經(jīng)過了嚴(yán)格地反復(fù)地檢測，我們以嚴(yán)謹(jǐn)?shù)膽B(tài)度保證產(chǎn)品的質(zhì)量，從而保證您的實驗順利進行。產(chǎn)品供貨周期短，供貨及時，且我司還提供完整的售前和售后服務(wù)。本公司產(chǎn)品僅用于科研。

樣本實驗前準(zhǔn)備：
ELISA試劑盒液體樣本：包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細胞培養(yǎng)上清等。
（1）血清
室溫血液自然凝固10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。
（2）血漿：
應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑，混合10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。
（3）尿液：
用無菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實行。
（4）細胞培養(yǎng)上清：
檢測分泌性的成份時，用無菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細收集上清。
（5）培養(yǎng)細胞
檢測細胞內(nèi)的成份時，用PBS（PH7.2-7.4）稀釋細胞懸液，細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融或加入組織蛋白萃取試劑，以使細胞破壞并放出細胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。
（6）組織標(biāo)本
切割標(biāo)本后，稱取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS（PH7.4），或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿化。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細收集上清。分裝后一份待檢測，其余冷凍備用。

注意事項：

1. 試劑盒應(yīng)在有效期內(nèi)使用，請不要使用過期的試劑。
2. 試劑盒未使用時應(yīng)保存在 2-8℃冰箱，已復(fù)溶但未用完的標(biāo)準(zhǔn)品，請丟棄。
3. 試劑盒使用前請在室溫恢復(fù) 30 min，且充分混勻試劑盒里的各種成份及制備的樣品。
4. 在試驗中標(biāo)準(zhǔn)品和樣本建議作復(fù)孔檢測，且加入試劑的順序應(yīng)保持一致。
5. 為避免交叉污染，請在試驗中使用 1 次性試管，槍頭，封板膜及潔凈塑料容器。
6. 濃縮生物素化抗體和濃縮酶結(jié)合物的體積較少，在運輸過程中微量液體會沾到管壁及瓶蓋上，使用前請離心處理（5-10 S 即可），使管壁上的液體集中在管底部，取用時，請用移液器小心吹打幾次。
7. 除了試劑盒中的濃縮洗滌液和終止液可以通用外，請不要使用其他來源試劑盒內(nèi)含的試劑代替本試劑盒中的某單個組分。
8. 為保證結(jié)果準(zhǔn)確，每次檢測均需做標(biāo)準(zhǔn)曲線。

操作流程：
（1）待測樣品孔中每孔加入待測樣品100μl，每種樣品設(shè)3個平行孔；設(shè)兩個陰性對照孔，每孔加未處理組的細胞裂解液100μl；另設(shè)一個空白對照孔，加入純細胞裂解液100μl。 
（2）酶標(biāo)板置4℃，包被過夜。
（3）洗板：吸干孔內(nèi)反應(yīng)液，用洗滌液過洗一遍（將洗滌液注滿板孔后，即甩去），之后將洗滌液注滿板孔，浸泡1-2分鐘，間歇搖動。甩去孔內(nèi)液體后在吸水紙上拍干。重復(fù)洗滌3-4次。
（4）陰性對照孔每孔加入PBS 50μl，樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。 
（5）酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi)，孵育60min。 
（6）洗板，同（4）。 
（7）每孔加1:5000稀釋的HRP-標(biāo)記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。 
（8）酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi)，孵育60min。 
（9）洗板，同（4）。 
（10）每孔加TMB顯色液 100μl，輕輕混勻10s，置37℃暗處反應(yīng)15-20min。 
（11）每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應(yīng)。 
（12）分別測450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2，終測得的OD值為兩者之差（W1-W2），以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
（13）數(shù)據(jù)處理：在得出標(biāo)本（S）和陰性對照（N）的 OD值后，計算S/N值。S/N≥2.1為陽性判定標(biāo)準(zhǔn)。
脫水穿心蓮內(nèi)酯 英文名稱 對照品  規(guī)格:  20mg/支進口/國產(chǎn) 含量： 含量測定

水楊酸 英文名稱 對照品  規(guī)格:  20mg/支進口/國產(chǎn) 含量： HPLC法含量測定用

新橙皮苷 英文名稱 供含量測定用  規(guī)格:  20mg/支進口/國產(chǎn)

路路通酸 英文名稱 含量測定  規(guī)格:  20mg/支進口/國產(chǎn)

槲葉 英文名稱 中藥對照藥材  規(guī)格:  20mg/支進口/國產(chǎn) 含量： TLC法鑒別

7-木糖基-紫杉醇 英文名稱 7-xylosyltaxol   規(guī)格:  20mg/支進口/國產(chǎn) 含量： ≥95%

對葉百部堿 英文名稱 tuberostemonine  規(guī)格:  20mg/支進口/國產(chǎn) 含量： ≥97%

朝藿定A1 英文名稱   規(guī)格:  20mg/支進口/國產(chǎn) 含量： Epimedin A1

氧化苦參堿（苦參素） 英文名稱 Oxymatrine  規(guī)格:  20mg/支進口/國產(chǎn) 含量： HPLC≥98%

馬兜鈴酸 A 英文名稱 TLC檢查  規(guī)格:  20mg/支進口/國產(chǎn)

Desloratadine （50 mg）Aerius

Beraprost （sodium salt） （1 mg）2，3，3a，8b-tetrahydro-2-hydroxy-1-（3-hydroxy-4-methyl-1-octen-6-ynyl）-1H-cyclopenta[b]benzofuran-5-butanoic acid， monosodium salt； ML 1129|Procyclin|TRK 10Beraprost （sodium salt）

Ascorbate Assay Buffer （25 ml）Ascorbate Assay Buffer

BIO （25 mg）6-bromo-3-[（3E）-1，3-dihydro-3-（hydroxyimino）-2H-indol-2-ylidene]-1，3-dihydro-（3Z）-2H-indol-2-one； GSK 3 IX|MLS 2052|6-Bromoindirubin-3’-oxime； BIO

5-methyl-2’-deoxy Cytidine EIA Monoclonal Antibody （500 dtn）5-methyl-2’-deoxy Cytidine EIA Monoclonal Antibody

Nitrocefin （1 mg）Nitrocephin； （6R）-3-[（1E）-2-（2,4-dinitrophenyl）ethenyl]-8-oxo-7R-[（2-thienylacetyl）amino]-5-thia-1-azabicyclo[4.2.0]oct-2-ene-2-carboxylic acid

1-（3-（（（（2R，3S，4R，5R）-5-（4-amino-7H-pyrrolo[2，3-d]pyrimidin-7-yl）-3，4-dihydroxytetrahydrofuran-2-yl）methyl）（isopropyl）amino）propyl）-3-（4-（tert-butyl）phenyl）ureaEPZ004777

RCS-4 4-hydroxyphenyl metabolite （5 mg）（4-hydroxyphenyl）（1-pentyl-1H-indol-3-yl）methanone； RCS-4 4-hydroxyphenyl metabolite

5-DTAF[5-（4，6-二氯三嗪基）氨基熒光素]5-DTAF [5-（4，6-Dichlorotriazinyl）aminofluorescein]

小鼠前膠原C端蛋白酶增強子1(PCPE1)ELISA Kit角膜上皮細胞培養(yǎng)基 500 ml特價供應(yīng) CEpiCM-prf

16α羥基雌酮1(16-α OHE-1)ELISA試劑盒英文名稱：Human 16-αHydroxyestrogen 1,16-α OHE-1 ELISA Kit規(guī)格:96T/48T大鼠胃蛋白酶(Pepsin)ELISA Kit，48T/96T 進口/分裝

 滋養(yǎng)層細胞培養(yǎng)基 500 ml現(xiàn)貨促銷 TM-prf

脂多糖結(jié)合蛋白(LBP)ELISA試劑盒 英文名稱：Human lipolysaccharide binding protein,LBP ELISA Kit規(guī)格:96T/48T小鼠二胺氧化酶(DAO)ELISA Kit，48T/96T 進口/國產(chǎn)

 前脂肪細胞培養(yǎng)基 500 ml特價供應(yīng) PAM-prf

乙醛脫氫酶(ALDH)ELISA試劑盒英文名稱：Human aldehyde dehydrogenase,ALDH ELISA Kit規(guī)格:96T/48T活化凝血因子Ⅻ(FⅫa)ELISA Kit，48T/96T 進口/分裝

 前脂肪細胞分化培養(yǎng)基 500 ml現(xiàn)貨促銷 PADM-prf

絲氨酸/蘇氨酸蛋白磷酸酶(STK)ELISA試劑盒 英文名稱：Human serine/threonine protein kinase,STK ELISA Kit規(guī)格:96T/48T小鼠卵清蛋白特異性IgE(OVA sIgE)ELISA Kit，48T/96T 進口/國產(chǎn)

 卵巢上皮細胞培養(yǎng)基 500 ml特價供應(yīng) OEpiCM-prf