試劑配制:

1、酶聯(lián)板assay plate ：一塊96孔或者48孔。
2、標(biāo)準(zhǔn)品standard：2瓶凍干品。
3、樣品稀釋液sample diluent：1×20ml/瓶。
4、生物素標(biāo)記抗體稀釋液biotin-antibody diluent：1×10ml/瓶。
5、辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素稀釋液 hrp-avidin diluent：1×10ml/瓶。
6、生物素標(biāo)記抗體biotin-antibody：1×120μl/瓶1：100
7、辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素hrp-avidin：1×120μl/瓶1：100
8、底物溶液tmb e：1×10ml/瓶。
9、濃洗滌液wash buffer：1×20ml/瓶，使用時每瓶用蒸餾水稀釋25倍。
10、終止液stop solution：1×10ml/瓶2n h2so4。

試劑準(zhǔn)備：
1. 使用前將所有的試劑和標(biāo)本緩慢均衡至室溫(18-25oC)，試劑不能直接在37oC溶解。
2. 標(biāo)準(zhǔn)品(凍干品)：每瓶標(biāo)準(zhǔn)品加入標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液1mL，蓋好后室溫靜置大約10分鐘，同時反復(fù)顛倒/搓動以助溶解，其濃度為2000pg/mL。準(zhǔn)備7個稀釋標(biāo)準(zhǔn)品的EP管，每個EP管中加入150μL的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液，如圖所示依次倍比稀釋成不同的梯度， 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液(0pg/mL)直接作為空白孔。為保證實驗結(jié)果有效性，每次實驗請使用新的標(biāo)準(zhǔn)品溶液。
3. 濃洗滌液：用580mL蒸餾水或去離子水將20mL濃洗滌液稀釋至600mL，進(jìn)行30倍稀釋。

我司主營產(chǎn)品之一，產(chǎn)品皆嚴(yán)格按照相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行生產(chǎn)，并經(jīng)過了嚴(yán)格地反復(fù)地檢測，我們以嚴(yán)謹(jǐn)?shù)膽B(tài)度保證產(chǎn)品的質(zhì)量，從而保證您的實驗順利進(jìn)行。產(chǎn)品供貨周期短，供貨及時，且我司還提供完整的售前和售后服務(wù)。本公司產(chǎn)品僅用于科研。

樣本實驗前準(zhǔn)備：
ELISA試劑盒液體樣本：包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清等。
（1）血清
室溫血液自然凝固10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。
（2）血漿：
應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑，混合10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。
（3）尿液：
用無菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實行。
（4）細(xì)胞培養(yǎng)上清：
檢測分泌性的成份時，用無菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。
（5）培養(yǎng)細(xì)胞
檢測細(xì)胞內(nèi)的成份時，用PBS（PH7.2-7.4）稀釋細(xì)胞懸液，細(xì)胞濃度達(dá)到100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融或加入組織蛋白萃取試劑，以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。
（6）組織標(biāo)本
切割標(biāo)本后，稱取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆谩?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS（PH7.4），或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿化。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測，其余冷凍備用。

注意事項：

1. 試劑盒應(yīng)在有效期內(nèi)使用，請不要使用過期的試劑。
2. 試劑盒未使用時應(yīng)保存在 2-8℃冰箱，已復(fù)溶但未用完的標(biāo)準(zhǔn)品，請丟棄。
3. 試劑盒使用前請在室溫恢復(fù) 30 min，且充分混勻試劑盒里的各種成份及制備的樣品。
4. 在試驗中標(biāo)準(zhǔn)品和樣本建議作復(fù)孔檢測，且加入試劑的順序應(yīng)保持一致。
5. 為避免交叉污染，請在試驗中使用 1 次性試管，槍頭，封板膜及潔凈塑料容器。
6. 濃縮生物素化抗體和濃縮酶結(jié)合物的體積較少，在運輸過程中微量液體會沾到管壁及瓶蓋上，使用前請離心處理（5-10 S 即可），使管壁上的液體集中在管底部，取用時，請用移液器小心吹打幾次。
7. 除了試劑盒中的濃縮洗滌液和終止液可以通用外，請不要使用其他來源試劑盒內(nèi)含的試劑代替本試劑盒中的某單個組分。
8. 為保證結(jié)果準(zhǔn)確，每次檢測均需做標(biāo)準(zhǔn)曲線。

操作流程：
（1）待測樣品孔中每孔加入待測樣品100μl，每種樣品設(shè)3個平行孔；設(shè)兩個陰性對照孔，每孔加未處理組的細(xì)胞裂解液100μl；另設(shè)一個空白對照孔，加入純細(xì)胞裂解液100μl。 
（2）酶標(biāo)板置4℃，包被過夜。
（3）洗板：吸干孔內(nèi)反應(yīng)液，用洗滌液過洗一遍（將洗滌液注滿板孔后，即甩去），之后將洗滌液注滿板孔，浸泡1-2分鐘，間歇搖動。甩去孔內(nèi)液體后在吸水紙上拍干。重復(fù)洗滌3-4次。
（4）陰性對照孔每孔加入PBS 50μl，樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。 
（5）酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi)，孵育60min。 
（6）洗板，同（4）。 
（7）每孔加1:5000稀釋的HRP-標(biāo)記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。 
（8）酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi)，孵育60min。 
（9）洗板，同（4）。 
（10）每孔加TMB顯色液 100μl，輕輕混勻10s，置37℃暗處反應(yīng)15-20min。 
（11）每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應(yīng)。 
（12）分別測450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2，終測得的OD值為兩者之差（W1-W2），以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
（13）數(shù)據(jù)處理：在得出標(biāo)本（S）和陰性對照（N）的 OD值后，計算S/N值。S/N≥2.1為陽性判定標(biāo)準(zhǔn)。
大黃酸 英文名稱   規(guī)格:  20mg/支進(jìn)口/國產(chǎn) 含量： Rhein

酪蛋白 英文名稱 標(biāo)準(zhǔn)試劑  規(guī)格:  20mg/支進(jìn)口/國產(chǎn) 含量： 效價測定

7—甲氧基香素 英文名稱 對照品  規(guī)格:  20mg/支進(jìn)口/國產(chǎn) 含量： 鑒別

氨甲環(huán)酸 英文名稱 對照品  規(guī)格:  20mg/支進(jìn)口/國產(chǎn) 含量： 檢查

馬來酸氨氯地平 英文名稱 對照品  規(guī)格:  20mg/支進(jìn)口/國產(chǎn) 含量： HPLC法含量測定

白花前胡甲素 英文名稱 Praeruptorin A  規(guī)格:  20mg/支進(jìn)口/國產(chǎn) 含量： ≥98%

醋酸奧曲肽 英文名稱 HPLC法含量測定  規(guī)格:  20mg/支進(jìn)口/國產(chǎn)

蘆薈苷A 英文名稱 Barbaloin A  規(guī)格:  20mg/支進(jìn)口/國產(chǎn) 含量： ≥98%

D-半乳糖醛酸 英文名稱 UV法含量測定  規(guī)格:  20mg/支進(jìn)口/國產(chǎn)

鹽酸丁咯地爾 英文名稱 含量測定  規(guī)格:  20mg/支進(jìn)口/國產(chǎn)

苯丙酸諾龍 英文名稱 含量測定  規(guī)格:  20mg/支進(jìn)口/國產(chǎn) 4-hydroxy Nonenal （1 mg）（±）-4-hydroxy-2E-nonenal； 4-HNE； 4-hydroxy Nonenal

CAY10621 （10 mg）2，2-dimethyl-4S-（1-oxo-2-hexadecyn-1-yl）-1，1-dimethylethyl ester-3-oxazolidinecarboxylic acid； SPHK 1 Inhibitor 5C|SKI 5C； CAY10621

2-methoxy Ketamine （hydrochloride） （1 mg）2-（2-methoxyphenyl）-2-（methylamino）-cyclohexanone, monohydrochloride

Ac-Calpastatin （184-210） （1 mg）Calpastatin Peptide B27-WT

GANT 61 （100 mg）2，2’-[[dihydro-2-（4-pyridinyl）-1，3（2H，4H）-pyrimidinediyl]bis（methylene）]bis（N，N-dimethyl-benzenamine）； NSC 136476； GANT 61

N-[3-（1H-Benzimidazol-2-yl）-4-chlorophenyl]-3，4，5-triethoxybenzamideSANT-2

[（2R，3R，4S，5R）-5-（6-amino-2-fluoro-purin-9-yl）- 3，4-dihydroxy-oxolan-2-yl]methoxyphosphonic acid； FludaraFludarabine Phosphate

EGTA，四鈉鹽 10mM水溶液EGTA tetrasodium salt 10 mM aqueous solution

2-[（2-Hydroxynaphthalen-1-ylmethylene）amino]-N-（1-phenethyl）benzamide； Sir Two Inhibitor NaphtholSirtinol

Arachidoyl glycine （100 mg）N-（1-oxoeicosyl）-glycine； Arachidoyl glycine

4-amino-1-（2-deoxy-β-D-erythro-pentofuranosyl）-3，5-triazin-2（1H）-one； Decitabine5-Aza-2’-deoxycytidine

DEA Buffer Concentrate （10X） （12。5 mL）Diethanolamine Buffer Concentrate （10X）； DEA Buffer Concentrate （10X）

小鼠葡萄糖苷酸酶β(GUSβ)ELISA試劑盒 蛋白胨-鹽溶液  250g/瓶 用于樣品的稀釋（NY）特價供應(yīng)

豬生長釋放肽ghrelin(GHRP-Ghrelin)ELISA試劑盒英文名稱：Porcine growth hormone releasing peptide-Ghrelin,GHRP-Ghrelin ELISA Kit規(guī)格:96T/48T周期素依賴性激酶4(CDK-4)ELISA Kit，48T/96T

 Amies 運送培養(yǎng)基 250g/瓶 用于致病標(biāo)本的采集、運輸和保存現(xiàn)貨促銷

豬胰島素(INS)ELISA試劑盒英文名稱：Porcine Insulin,INS ELISA Kit規(guī)格:96T/48T貓細(xì)小病毒抗體(FPV)ELISA Kit，48T/96T

 Cary-Blair 氏運送培養(yǎng)基 250g/瓶 用于致病標(biāo)本的采集、運輸和保存特價供應(yīng)

豬單核細(xì)胞增多性李斯特素O((LLO)ELISA試劑盒英文名稱：Porcine listeriolysin O,LLO ELISA Kit規(guī)格:96T/48T纖維母細(xì)胞表面抗原(FSP)ELISA Kit，48T/96T

 Stuart 運送培養(yǎng)基 250g/瓶 用于致病標(biāo)本的采集、運輸和保存現(xiàn)貨促銷

雞白介素4(IL-4)ELISA試劑盒 英文名稱：Chicken Interleukin 4,IL-4 ELISA Khway inhibitor,TFPI ELISA Kit規(guī)格:96T/48T甘露糖結(jié)合蛋白/甘露糖結(jié)合凝集素(MBP/MBL)