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試劑配制:
1、酶聯(lián)板assay plate :一塊96孔或者48孔。
2、標(biāo)準品standard:2瓶凍干品。
3、樣品稀釋液sample diluent:1×20ml/瓶。
4、生物素標(biāo)記抗體稀釋液biotin-antibody diluent:1×10ml/瓶。
5、辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素稀釋液 hrp-avidin diluent:1×10ml/瓶。
6、生物素標(biāo)記抗體biotin-antibody:1×120μl/瓶1:100
7、辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素hrp-avidin:1×120μl/瓶1:100
8、底物溶液tmb e:1×10ml/瓶。
9、濃洗滌液wash buffer:1×20ml/瓶,使用時每瓶用蒸餾水稀釋25倍。
10、終止液stop solution:1×10ml/瓶2n h2so4。
試劑準備:
1. 使用前將所有的試劑和標(biāo)本緩慢均衡至室溫(18-25oC),試劑不能直接在37oC溶解。
2. 標(biāo)準品(凍干品):每瓶標(biāo)準品加入標(biāo)準品稀釋液1mL,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時反復(fù)顛倒/搓動以助溶解,其濃度為2000pg/mL。準備7個稀釋標(biāo)準品的EP管,每個EP管中加入150μL的標(biāo)準品稀釋液,如圖所示依次倍比稀釋成不同的梯度, 標(biāo)準品稀釋液(0pg/mL)直接作為空白孔。為保證實驗結(jié)果有效性,每次實驗請使用新的標(biāo)準品溶液。
3. 濃洗滌液:用580mL蒸餾水或去離子水將20mL濃洗滌液稀釋至600mL,進行30倍稀釋。
我司主營產(chǎn)品之一,產(chǎn)品皆嚴格按照相關(guān)標(biāo)準進行生產(chǎn),并經(jīng)過了嚴格地反復(fù)地檢測,我們以嚴謹?shù)膽B(tài)度保證產(chǎn)品的質(zhì)量,從而保證您的實驗順利進行。產(chǎn)品供貨周期短,供貨及時,且我司還提供完整的售前和售后服務(wù)。本公司產(chǎn)品僅用于科研。
產(chǎn)品名稱 |
小鼠黏膜地址素細胞黏附分子(MAdCAM1)ELISA Kit |
英文名稱 |
Mouse Mucosal Addressin Cell Adhesion Molecule 1(MAdCAM1)ELISA Kit |
貨號 |
PM105164 |
樣本實驗前準備:
ELISA試劑盒液體樣本:包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細胞培養(yǎng)上清等。
(1)血清
室溫血液自然凝固10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(2)血漿:
應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(3)尿液:
用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實行。
(4)細胞培養(yǎng)上清:
檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。
(5)培養(yǎng)細胞
檢測細胞內(nèi)的成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細胞懸液,細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融或加入組織蛋白萃取試劑,以使細胞破壞并放出細胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(6)組織標(biāo)本
切割標(biāo)本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿化。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。
注意事項:
1. 試劑盒應(yīng)在有效期內(nèi)使用,請不要使用過期的試劑。
2. 試劑盒未使用時應(yīng)保存在 2-8℃冰箱,已復(fù)溶但未用完的標(biāo)準品,請丟棄。
3. 試劑盒使用前請在室溫恢復(fù) 30 min,且充分混勻試劑盒里的各種成份及制備的樣品。
4. 在試驗中標(biāo)準品和樣本建議作復(fù)孔檢測,且加入試劑的順序應(yīng)保持一致。
5. 為避免交叉污染,請在試驗中使用 1 次性試管,槍頭,封板膜及潔凈塑料容器。
6. 濃縮生物素化抗體和濃縮酶結(jié)合物的體積較少,在運輸過程中微量液體會沾到管壁及瓶蓋上,使用前請離心處理(5-10 S 即可),使管壁上的液體集中在管底部,取用時,請用移液器小心吹打幾次。
7. 除了試劑盒中的濃縮洗滌液和終止液可以通用外,請不要使用其他來源試劑盒內(nèi)含的試劑代替本試劑盒中的某單個組分。
8. 為保證結(jié)果準確,每次檢測均需做標(biāo)準曲線。
操作流程:
(1)待測樣品孔中每孔加入待測樣品100μl,每種樣品設(shè)3個平行孔;設(shè)兩個陰性對照孔,每孔加未處理組的細胞裂解液100μl;另設(shè)一個空白對照孔,加入純細胞裂解液100μl。
(2)酶標(biāo)板置4℃,包被過夜。
(3)洗板:吸干孔內(nèi)反應(yīng)液,用洗滌液過洗一遍(將洗滌液注滿板孔后,即甩去),之后將洗滌液注滿板孔,浸泡1-2分鐘,間歇搖動。甩去孔內(nèi)液體后在吸水紙上拍干。重復(fù)洗滌3-4次。
(4)陰性對照孔每孔加入PBS 50μl,樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。
(5)酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。
(6)洗板,同(4)。
(7)每孔加1:5000稀釋的HRP-標(biāo)記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。
(8)酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。
(9)洗板,同(4)。
(10)每孔加TMB顯色液 100μl,輕輕混勻10s,置37℃暗處反應(yīng)15-20min。
(11)每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應(yīng)。
(12)分別測450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2,終測得的OD值為兩者之差(W1-W2),以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
(13)數(shù)據(jù)處理:在得出標(biāo)本(S)和陰性對照(N)的 OD值后,計算S/N值。S/N≥2.1為陽性判定標(biāo)準。
鉆山風(fēng) 英文名稱 中藥對照藥材 規(guī)格: 20mg/支進口/國產(chǎn) 含量: TLC法鑒別
丁香酚 英文名稱 eugenol 規(guī)格: 20mg/支進口/國產(chǎn) 含量: 98%
氧化型谷胱甘肽 英文名稱 檢查 規(guī)格: 20mg/支進口/國產(chǎn)
石椒草 英文名稱 TLC法鑒別 規(guī)格: 20mg/支進口/國產(chǎn)
五靈脂 英文名稱 TLC法鑒別 規(guī)格: 20mg/支進口/國產(chǎn)
尼麥角林 英文名稱 含量測定 規(guī)格: 20mg/支進口/國產(chǎn)
對氨基苯 英文名稱 含量測定 規(guī)格: 20mg/支進口/國產(chǎn)
拉莫三嗪 英文名稱 UV法含量測定 規(guī)格: 20mg/支進口/國產(chǎn)
表沒食子兒茶素沒食子酸酯 英文名稱 EGCG 規(guī)格: 20mg/支進口/國產(chǎn) 含量: (?)-Epigallocatechin gallate
梧桐子 英文名稱 中藥對照藥材 規(guī)格: 20mg/支進口/國產(chǎn) 含量: TLC法鑒別
麥冬皂苷B 英文名稱 Ophiopogonin B 規(guī)格: 20mg/支進口/國產(chǎn) 含量: ≥97%(S-(R,R-(E,E)))-SclerotiorinSclerotiorin
11-deoxy-11-methylene Prostaglandin D2 (1 mg)9。alpha。,15S-dihydroxy-11-methylene-prosta-5Z,13E-dien-1-oic acid; 11-deoxy-11-methylene PGD2; 11-deoxy-11-methylene Prostaglandin D2
Loratadine (10 mg)Claritin|SCH 29851; 4-(8-chloro-5,6-dihydro-11H-benzo[5,6]cyclohepta[1,2-b]pyridin-11-ylidene)-ethyl ester-1-pipeidinecarboxylic acid
Linoleic Acid-d4 (1 mg)9Z,12Z-octadecadienoic-9,10,12,13-d4 acid; Linoleic Acid-d4
phytanoyl-Coenzyme A -triethylammonium salt) (25 mg)Phytanic Acid Coenzyme A Ester (triethylammonium salt)|phytanoyl-CoA (triethylammonium salt), phytanoyl-Coenzyme A -triethylammonium salt)
2-T0070907
Leupeptin (hemisulfate) (25 mg)N-acetyl-L-leucyl-N-[4-[(aminoiminomethyl)amino]-1S-formylbutyl]-L-leucinamide, hemisulfate; Acetyl-L-leucyl-L-leucyl-L-argininal; Leupeptin (hemisulfate)
T20 (PBS) Blocking BufferEZBlock T20 (PBS) Blocking Buffer
N-Ethylpentylone (hydrochloride) (50 mg)1-(1,3-benzodioxol-5-yl)-2-(ethylamino)-1-pentanone, monohydrochloride
NSC 87877 (10 mg)8-hydroxy-7-[2-(6-sulfo-2-naphthalenyl)diazenyl]-5-quinolinesulfonic acid; NSC 87877
L-纈氨(100GM)L-Valine, CAS# 72-18-4; MW 117.15; USP
N,N-dicyclopropyl-4-((1,5-dimethyl-1H-pyrazol-3-yl)amino)-6-ethyl-1-methyl-1,6-dihydroimidazo[4,5-d]pyrrolo[2,3-b]pyridine-7-carboxamideBMS-911543
小鼠黏膜地址素細胞黏附分子(MAdCAM1)ELISA Kit改良牛津培養(yǎng)基 10 支/盒 每支用于 100ml11417 中特價供應(yīng)
大鼠低密度脂蛋白復(fù)合物(LDL-IC)ELISA試劑盒英文名稱:Rat LDL-IC ELISA Kit規(guī)格:96T/48T小鼠水通道蛋白5(AQP-5)ELISA Kit,48T/96T
7.5%化鈉肉湯 250g/瓶 用于金黃色葡萄球的均質(zhì)增現(xiàn)貨促銷
大鼠蛋白激酶B(PKB)ELISA試劑盒英文名稱:Rat protein kinase B,PKB ELISA Kit規(guī)格:96T/48T植物磷脂酸(PA)ELISA Kit,48T/96T
10%化鈉胰酪胨大豆肉湯 250g/瓶 用 于 金 黃 色 葡 萄 球 的 增 和MPN 試驗特價供應(yīng)
大鼠甲狀腺球蛋白(TG)ELISA試劑盒英文名稱:Rat Thyroglobulin,TG ELISA Kit規(guī)格:96T/48T綠膿桿外A(PEA)ELISA Kit,48T/96T
Baird-Parker 瓊脂基礎(chǔ) 250g/瓶 用于金黃色葡萄球的選擇性分 離與計數(shù),每 95ml 培養(yǎng)基中添加1 支 20801現(xiàn)貨促銷
大鼠白介素1β (IL-1β)ELISA試劑盒英文名稱:Rat Interleukin 1β,IL-1β ELISA Kit 規(guī)格:96T/48T磷酸化蛋白激酶C(P-PKC)ELISA Kit,48T/96T
腸產(chǎn)毒培養(yǎng)基 250g/瓶 用于葡萄球產(chǎn)檢驗特價供應(yīng)
大鼠結(jié)締組織生長因子(CTGF)ELISA試劑盒英文名稱:Rat connective tissue growth factor,CTGF ELISA Kit規(guī)格:96T/48T禽腦脊髓炎(AE)ELISA Kit,48T/96T
卵黃化鈉瓊脂培養(yǎng)基 250g/瓶 用于金黃色葡萄球選擇性分離, 每 65ml 培養(yǎng)基中添加 2 支 20804現(xiàn)貨促銷
大鼠腫瘤壞死因子β(TNF-β)ELISA試劑盒英文名稱:Rat Tumor necrosis factor β,TNF-β ELISA Kit規(guī)格:96T/48T膀胱癌抗原(UBC)ELISA Kit,48T/96T