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操作流程:
(1)待測樣品孔中每孔加入待測樣品100μl,每種樣品設(shè)3個平行孔;設(shè)兩個陰性對照孔,每孔加未處理組的細(xì)胞裂解液100μl;另設(shè)一個空白對照孔,加入純細(xì)胞裂解液100μl。
(2)酶標(biāo)板置4℃,包被過夜。
(3)洗板:吸干孔內(nèi)反應(yīng)液,用洗滌液過洗一遍(將洗滌液注滿板孔后,即甩去),之后將洗滌液注滿板孔,浸泡1-2分鐘,間歇搖動。甩去孔內(nèi)液體后在吸水紙上拍干。重復(fù)洗滌3-4次。
(4)陰性對照孔每孔加入PBS 50μl,樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。
(5)酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。
(6)洗板,同(4)。
(7)每孔加1:5000稀釋的HRP-標(biāo)記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。
(8)酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。
(9)洗板,同(4)。
(10)每孔加TMB顯色液 100μl,輕輕混勻10s,置37℃暗處反應(yīng)15-20min。
(11)每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應(yīng)。
(12)分別測450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2,終測得的OD值為兩者之差(W1-W2),以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
(13)數(shù)據(jù)處理:在得出標(biāo)本(S)和陰性對照(N)的 OD值后,計(jì)算S/N值。S/N≥2.1為陽性判定標(biāo)準(zhǔn)。
我司主營產(chǎn)品之一,產(chǎn)品皆嚴(yán)格按照相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行生產(chǎn),并經(jīng)過了嚴(yán)格地反復(fù)地檢測,我們以嚴(yán)謹(jǐn)?shù)膽B(tài)度保證產(chǎn)品的質(zhì)量,從而保證您的實(shí)驗(yàn)順利進(jìn)行。產(chǎn)品供貨周期短,供貨及時,且我司還提供完整的售前和售后服務(wù)。本公司產(chǎn)品僅用于科研。
產(chǎn)品名稱 |
小鼠抗酒石酸酸性磷酸酶(ACP5)ELISA Kit |
英文名稱 |
Mouse Acid Phosphatase 5, Tartrate Resistant(ACP5)ELISA Kit |
貨號 |
PM105248 |
試劑配制:
1、酶聯(lián)板assay plate :一塊96孔或者48孔。
2、標(biāo)準(zhǔn)品standard:2瓶凍干品。
3、樣品稀釋液sample diluent:1×20ml/瓶。
4、生物素標(biāo)記抗體稀釋液biotin-antibody diluent:1×10ml/瓶。
5、辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素稀釋液 hrp-avidin diluent:1×10ml/瓶。
6、生物素標(biāo)記抗體biotin-antibody:1×120μl/瓶1:100
7、辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素hrp-avidin:1×120μl/瓶1:100
8、底物溶液tmb e:1×10ml/瓶。
9、濃洗滌液wash buffer:1×20ml/瓶,使用時每瓶用蒸餾水稀釋25倍。
10、終止液stop solution:1×10ml/瓶2n h2so4。
試劑準(zhǔn)備:
1. 使用前將所有的試劑和標(biāo)本緩慢均衡至室溫(18-25oC),試劑不能直接在37oC溶解。
2. 標(biāo)準(zhǔn)品(凍干品):每瓶標(biāo)準(zhǔn)品加入標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液1mL,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時反復(fù)顛倒/搓動以助溶解,其濃度為2000pg/mL。準(zhǔn)備7個稀釋標(biāo)準(zhǔn)品的EP管,每個EP管中加入150μL的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液,如圖所示依次倍比稀釋成不同的梯度, 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液(0pg/mL)直接作為空白孔。為保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果有效性,每次實(shí)驗(yàn)請使用新的標(biāo)準(zhǔn)品溶液。
3. 濃洗滌液:用580mL蒸餾水或去離子水將20mL濃洗滌液稀釋至600mL,進(jìn)行30倍稀釋。
樣本實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備:
ELISA試劑盒液體樣本:包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清等。
(1)血清
室溫血液自然凝固10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(2)血漿:
應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(3)尿液:
用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實(shí)行。
(4)細(xì)胞培養(yǎng)上清:
檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。
(5)培養(yǎng)細(xì)胞
檢測細(xì)胞內(nèi)的成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細(xì)胞懸液,細(xì)胞濃度達(dá)到100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融或加入組織蛋白萃取試劑,以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(6)組織標(biāo)本
切割標(biāo)本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿化。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。
注意事項(xiàng):
1. 試劑盒應(yīng)在有效期內(nèi)使用,請不要使用過期的試劑。
2. 試劑盒未使用時應(yīng)保存在 2-8℃冰箱,已復(fù)溶但未用完的標(biāo)準(zhǔn)品,請丟棄。
3. 試劑盒使用前請?jiān)谑覝鼗謴?fù) 30 min,且充分混勻試劑盒里的各種成份及制備的樣品。
4. 在試驗(yàn)中標(biāo)準(zhǔn)品和樣本建議作復(fù)孔檢測,且加入試劑的順序應(yīng)保持一致。
5. 為避免交叉污染,請?jiān)谠囼?yàn)中使用 1 次性試管,槍頭,封板膜及潔凈塑料容器。
6. 濃縮生物素化抗體和濃縮酶結(jié)合物的體積較少,在運(yùn)輸過程中微量液體會沾到管壁及瓶蓋上,使用前請離心處理(5-10 S 即可),使管壁上的液體集中在管底部,取用時,請用移液器小心吹打幾次。
7. 除了試劑盒中的濃縮洗滌液和終止液可以通用外,請不要使用其他來源試劑盒內(nèi)含的試劑代替本試劑盒中的某單個組分。
8. 為保證結(jié)果準(zhǔn)確,每次檢測均需做標(biāo)準(zhǔn)曲線。
毛蕊異黃酮-7-O-β-D葡萄糖苷 英文名稱 calycosin-7-O-β-D-glucoside 規(guī)格: 20mg/支進(jìn)口/國產(chǎn) 含量: 0.97
1,8-二羥基葸醌 英文名稱 1,8-Dihydroxyanthraquinone 規(guī)格: 20mg/支進(jìn)口/國產(chǎn) 含量: ≥98.0%
獐牙菜 英文名稱 TLC法鑒別 規(guī)格: 20mg/支進(jìn)口/國產(chǎn)
土木香內(nèi)酯 英文名稱 含量測定 規(guī)格: 20mg/支進(jìn)口/國產(chǎn)
烏梅 英文名稱 TLC法鑒別 規(guī)格: 20mg/支進(jìn)口/國產(chǎn)
沙棘油 英文名稱 對照品 規(guī)格: 20mg/支進(jìn)口/國產(chǎn) 含量: 鑒別
羅紅霉素 英文名稱 效價測定 規(guī)格: 20mg/支進(jìn)口/國產(chǎn)
硫線磷 標(biāo)準(zhǔn)品 CAS號:95465-99-9 100mg 英文名稱 規(guī)格: 20mg/支進(jìn)口/國產(chǎn) 含量:
倍他米松標(biāo)準(zhǔn)品 CAS號: 378-44-9 50MG 英文名稱 規(guī)格: 20mg/支進(jìn)口/國產(chǎn) 含量:
木蝴蝶苷B 英文名稱 Baicalin-7-diglucoside 規(guī)格: 20mg/支進(jìn)口/國產(chǎn) 含量: ≥97%
伊曲康 英文名稱 HPLC法含量測定 規(guī)格: 20mg/支進(jìn)口/國產(chǎn) AB-PINACA-d9 (500 ug)(S)-N-(1-amino-3-methyl-1-oxobutan-2-yl)-1-(pentyl-2,2’,3,3’,4,4’,5,5,5-d9)-1H-indazole-3-carboxamide; AB-PINACA-d9
活細(xì)胞熒光示蹤探針CFSE(CFDA-SE)CFSE [5-(and 6)-Carboxyfluorescein diacetate, succinimidyl ester] Mixed isomers
Tenovin-1 (10 mg)N-[[[4-(acetylamino)phenyl]amino]thioxomethyl-4-(1,1-dimethylethyl)]-benzamide; Tenovin-1
MK 0457 (25 mg)Tozasertib|VX 680; N-[4-[[4-(4-methyl-1-pipeazinyl)-6-[(5-methyl-1H-pyrazol-3-yl)amino]-2-pyrimidinyl]thio]phenyl]-cyclopropanecarboxamide
3-Pyridylamide oxime (500 mg)N-hydroxy-3-pyridinecarboximidamide; N-Hydroxynicotinamidine|NSC 208697|NSC 220324; 3-Pyridylamide oxime
DiaEasy Dialyzer (20 ml) MWCO 12-14 kDaDiaEasy Dialyzer (20 ml) MWCO 12-14 kDa
25N-NBOMe (hydrochloride) (10 mg)2;C-N-NBOMe; 2-(2,5-dimethoxy-4-nitrophenyl)-N-(2-methoxybenzyl)ethanamine, monohydrochloride
Rabeprazole (sodium salt) (10 mg)2-[[[4-(3-methoxypropoxy)-3-methyl-2-pyridinyl]methyl]sulfinyl]-1H-benzimidazole, monosodium salt; Aciphex
CHIR98014 (25 mg)N6-[2-[[4-(2,4-dichlorophenyl)-5-(1H-imidazol-2-yl)-2-pyrimidinyl]amino]ethyl]-3-nitro-2,6-pyridinediamine
TCS PIM-1 1 (100 mg)6-(5-bromo-2-hydroxyphenyl)-1,2-dihydro-2-oxo-4-phenyl-3-pyridinecarbonitrile
Sterile DEPC UltraPure Water (60 mL)Sterile DEPC UltraPure Water
Dodecyl maltosideDodecyl-β-D-maltopyranoside
小鼠抗酒石酸酸性磷酸酶(ACP5)ELISA KitKovacs氏靛基質(zhì)試劑盒 特價供應(yīng) 10ml*1 吲哚(靛基質(zhì))試驗(yàn)配套試劑
大鼠促性腺釋放(GnRH)ELISA試劑盒英文名稱:Rat gonadotropin-releasing hormone,GnRH ELISA Kit規(guī)格:96T/48T小鼠網(wǎng)膜素(omentin)ELISA Kit,48T/96T
丙二酸鈉培養(yǎng)基 現(xiàn)貨促銷 10 生化培養(yǎng)基,用于細(xì)丙二酸鹽利用試驗(yàn)(GB、SN標(biāo)準(zhǔn))
大鼠白介素17(IL-17)ELISA試劑盒英文名稱:Rat Interleukin 17,IL-17 ELISA Kit 規(guī)格:96T/48T血栓前體蛋白(TpP)ELISA Kit,48T/96T
衛(wèi)矛醇半固體瓊脂 特價供應(yīng) 10 生化培養(yǎng)基,用于細(xì)衛(wèi)予醇發(fā)酵試驗(yàn)(SN標(biāo)準(zhǔn))
大鼠白介素12(IL-12/P70)ELISA試劑盒英文名稱:Rat Interleukin 12,IL-12/P70 ELISA Kit規(guī)格:96T/48T波形蛋白(VIM)ELISA Kit,48T/96T
GN 增液 現(xiàn)貨促銷 250 主要用于志賀氏的增培養(yǎng),亦可用于沙門氏增培養(yǎng)(GB標(biāo)準(zhǔn))
大鼠皮質(zhì)酮/腎上腺酮(CORT)ELISA試劑盒英文名稱:rat Corticosterone,CORT ELISA Kit規(guī)格:96T/48T抗核抗體(ANA)ELISA Kit,48T/96T
XLD 培養(yǎng)基 特價供應(yīng) 250 選擇性培養(yǎng)基,主要用于分離志賀氏屬,亦可用于分離沙門氏(FDA標(biāo)準(zhǔn))
大鼠白介素4(IL-4)ELISA試劑盒英文名稱:Rat Interleukin 4,IL-4 ELISA Kit規(guī)格:96T/48T抗**/精氨酸加壓素(ADH/VP/AVP)ELISA Kit,48T/96T
WS 瓊脂 現(xiàn)貨促銷 250 用于沙門氏的選擇性分離(GB標(biāo)準(zhǔn))
豚鼠球蛋白E(IgE)ELISA試劑盒英文名稱:guinea pig Immuglobulin E,IgE ELISA Kit 規(guī)格:96T/48T類嗜T細(xì)胞Ⅰ型病毒(HTLV-Ⅰ)ELISA Kit,48T/96T