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試劑配制:
1、酶聯(lián)板assay plate :一塊96孔或者48孔。
2、標(biāo)準(zhǔn)品standard:2瓶凍干品。
3、樣品稀釋液sample diluent:1×20ml/瓶。
4、生物素標(biāo)記抗體稀釋液biotin-antibody diluent:1×10ml/瓶。
5、辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素稀釋液 hrp-avidin diluent:1×10ml/瓶。
6、生物素標(biāo)記抗體biotin-antibody:1×120μl/瓶1:100
7、辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素hrp-avidin:1×120μl/瓶1:100
8、底物溶液tmb e:1×10ml/瓶。
9、濃洗滌液wash buffer:1×20ml/瓶,使用時每瓶用蒸餾水稀釋25倍。
10、終止液stop solution:1×10ml/瓶2n h2so4。
試劑準(zhǔn)備:
1. 使用前將所有的試劑和標(biāo)本緩慢均衡至室溫(18-25oC),試劑不能直接在37oC溶解。
2. 標(biāo)準(zhǔn)品(凍干品):每瓶標(biāo)準(zhǔn)品加入標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液1mL,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時反復(fù)顛倒/搓動以助溶解,其濃度為2000pg/mL。準(zhǔn)備7個稀釋標(biāo)準(zhǔn)品的EP管,每個EP管中加入150μL的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液,如圖所示依次倍比稀釋成不同的梯度, 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液(0pg/mL)直接作為空白孔。為保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果有效性,每次實(shí)驗(yàn)請使用新的標(biāo)準(zhǔn)品溶液。
3. 濃洗滌液:用580mL蒸餾水或去離子水將20mL濃洗滌液稀釋至600mL,進(jìn)行30倍稀釋。
我司主營產(chǎn)品之一,產(chǎn)品皆嚴(yán)格按照相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行生產(chǎn),并經(jīng)過了嚴(yán)格地反復(fù)地檢測,我們以嚴(yán)謹(jǐn)?shù)膽B(tài)度保證產(chǎn)品的質(zhì)量,從而保證您的實(shí)驗(yàn)順利進(jìn)行。產(chǎn)品供貨周期短,供貨及時,且我司還提供完整的售前和售后服務(wù)。本公司產(chǎn)品僅用于科研。
產(chǎn)品名稱 |
小鼠金屬硫蛋白1(MT1)免費(fèi)代測ELISA Kit |
英文名稱 |
Mouse Metallothionein 1(MT1)ELISA Kit |
貨號 |
PM105264 |
樣本實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備:
ELISA試劑盒液體樣本:包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清等。
(1)血清
室溫血液自然凝固10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(2)血漿:
應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(3)尿液:
用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實(shí)行。
(4)細(xì)胞培養(yǎng)上清:
檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。
(5)培養(yǎng)細(xì)胞
檢測細(xì)胞內(nèi)的成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細(xì)胞懸液,細(xì)胞濃度達(dá)到100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融或加入組織蛋白萃取試劑,以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(6)組織標(biāo)本
切割標(biāo)本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿化。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。
注意事項(xiàng):
1. 試劑盒應(yīng)在有效期內(nèi)使用,請不要使用過期的試劑。
2. 試劑盒未使用時應(yīng)保存在 2-8℃冰箱,已復(fù)溶但未用完的標(biāo)準(zhǔn)品,請丟棄。
3. 試劑盒使用前請?jiān)谑覝鼗謴?fù) 30 min,且充分混勻試劑盒里的各種成份及制備的樣品。
4. 在試驗(yàn)中標(biāo)準(zhǔn)品和樣本建議作復(fù)孔檢測,且加入試劑的順序應(yīng)保持一致。
5. 為避免交叉污染,請?jiān)谠囼?yàn)中使用 1 次性試管,槍頭,封板膜及潔凈塑料容器。
6. 濃縮生物素化抗體和濃縮酶結(jié)合物的體積較少,在運(yùn)輸過程中微量液體會沾到管壁及瓶蓋上,使用前請離心處理(5-10 S 即可),使管壁上的液體集中在管底部,取用時,請用移液器小心吹打幾次。
7. 除了試劑盒中的濃縮洗滌液和終止液可以通用外,請不要使用其他來源試劑盒內(nèi)含的試劑代替本試劑盒中的某單個組分。
8. 為保證結(jié)果準(zhǔn)確,每次檢測均需做標(biāo)準(zhǔn)曲線。
操作流程:
(1)待測樣品孔中每孔加入待測樣品100μl,每種樣品設(shè)3個平行孔;設(shè)兩個陰性對照孔,每孔加未處理組的細(xì)胞裂解液100μl;另設(shè)一個空白對照孔,加入純細(xì)胞裂解液100μl。
(2)酶標(biāo)板置4℃,包被過夜。
(3)洗板:吸干孔內(nèi)反應(yīng)液,用洗滌液過洗一遍(將洗滌液注滿板孔后,即甩去),之后將洗滌液注滿板孔,浸泡1-2分鐘,間歇搖動。甩去孔內(nèi)液體后在吸水紙上拍干。重復(fù)洗滌3-4次。
(4)陰性對照孔每孔加入PBS 50μl,樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。
(5)酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。
(6)洗板,同(4)。
(7)每孔加1:5000稀釋的HRP-標(biāo)記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。
(8)酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。
(9)洗板,同(4)。
(10)每孔加TMB顯色液 100μl,輕輕混勻10s,置37℃暗處反應(yīng)15-20min。
(11)每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應(yīng)。
(12)分別測450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2,終測得的OD值為兩者之差(W1-W2),以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
(13)數(shù)據(jù)處理:在得出標(biāo)本(S)和陰性對照(N)的 OD值后,計(jì)算S/N值。S/N≥2.1為陽性判定標(biāo)準(zhǔn)。
■金花 英文名稱 TLC法鑒別 規(guī)格: 20mg/支進(jìn)口/國產(chǎn)
雙胺 英文名稱 TLC法檢查用 規(guī)格: 20mg/支進(jìn)口/國產(chǎn)
滅丹 標(biāo)準(zhǔn)品 CAS號:133-07-3 250mg 英文名稱 規(guī)格: 20mg/支進(jìn)口/國產(chǎn) 含量:
鹽酸達(dá)克羅寧 英文名稱 HPLC含量測定 規(guī)格: 20mg/支進(jìn)口/國產(chǎn)
諾氟沙星 英文名稱 對照品 規(guī)格: 20mg/支進(jìn)口/國產(chǎn) 含量: 含量測定
馬鞭草 英文名稱 中藥對照藥材 規(guī)格: 20mg/支進(jìn)口/國產(chǎn) 含量: TLC法鑒別
尼群地平 英文名稱 對照品 規(guī)格: 20mg/支進(jìn)口/國產(chǎn) 含量: UV法含量測定
卡托普利二硫化物 英文名稱 對照品 規(guī)格: 20mg/支進(jìn)口/國產(chǎn) 含量: 檢查
牡荊素 英文名稱 Vitexin 規(guī)格: 20mg/支進(jìn)口/國產(chǎn) 含量: ≥98%
樺木醇 英文名稱 Betulin 規(guī)格: 20mg/支進(jìn)口/國產(chǎn) 含量: ≥95%
表沒食子兒茶素沒食子酸酯EGCG 英文名稱 EGCG 規(guī)格: 20mg/支進(jìn)口/國產(chǎn) 含量: ≥98%1,3-PBIT (dihydrobromide) (50 mg)S,S’-1,3-phenylene-bis(1,2-ethanediyl)bis-isothiourea, dihydrobromide; 1,3-PBIT (dihydrobromide)
Lactacystin (50 ug)3S-hydroxy-2R-(1-hydroxy-2-methylpropyl)-4R-methyl-5-oxo-2-pyrrolidinecarboxylate-N-acetyl-L-cysteine; Lactacystin
sEH Assay Buffer (10X) (1 ea)sEH Assay Buffer (10X)
Docosahexaenoyl Glycine (10 mg)N-(1-oxo-4Z,7Z,10Z,13Z,16Z,19Z-docosahexaenyl)-glycine; Docosahexaenoyl Glycine
N-Hydroxy-1,3-dioxo-1H-benz[de]isoquinoline-2(3H)-hexanamideScriptaid
S-Nitroso-L-glutathione (5 mg)N-(N-L-。gamma。-glutamyl-S-nitroso-L-cysteinyl)-glycine; GSNO; S-Nitroso-L-glutathione
AM-2282Staurosporine
Biotinylated Bovine Serum Albumin (Biotin-LC-BSA) (3 biotin/BSA)Biotinylated Bovine Serum Albumin (Biotin-LC-BSA) (3 biotin/BSA)
3,4-Methylenedioxy-5-methylethcathinone (hydrochloride) (5 mg)2-(ethylamino)-1-(7-methyl-1,3-benzodioxol-5-yl)-1-propanone, monohydrochloride; R-MMC|3,4-Methylenedioxy-5-methyl-N-ethyl Cathinone; 3,4-Methylenedioxy-5-methylethcathinone (hydrochloride)
草甘膦(5GM)Glyphosate, CAS# 1071-83-6; MW 169.07
mBBr[單氯二胺] 超級純mBCl [Monochlorobimane] UltraPure Grade
4-(6-{4-[3-(4-Hydroxymethyl-phenyl)-ureido]-phenyl}-4-morpholin-4-yl-pyrazolo[3,4-d]pyrimidin-1-yl)-pipeidine-1-carboxylic acid methyl estermTOR Inhibitor, WYE-28
小鼠金屬硫蛋白1(MT1)免費(fèi)代測ELISA Kit蠟樣芽孢桿 特價供應(yīng)
新生甲狀腺素(NN-T4)ELISA試劑盒英文名稱:Human Neonatal Thyroxine,NN-T4 ELISA Kit規(guī)格:96T/48T膀胱腫瘤抗原(BTA)ELISA Kit,48T/96T 進(jìn)口/分裝
甘露醇卵黃多粘素瓊脂基礎(chǔ)(MYP) 現(xiàn)貨促銷 250 用于蠟樣芽孢桿的固體平板計(jì)數(shù)(GB.SN標(biāo)準(zhǔn))
葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白1(GLUT1)ELISA試劑盒英文名稱:Human Glucose transporter 1,GLUT1 ELISA Kit規(guī)格:96T/48TⅠ型膠原C端肽(CTX-Ⅰ)ELISA Kit,48T/96T 進(jìn)口/國產(chǎn)
胰酪胨大豆多粘素肉湯基礎(chǔ) 特價供應(yīng) 250 用于蠟樣芽孢桿的MPN值測定 (SN標(biāo)準(zhǔn))
尿苷二磷酸葡萄糖神經(jīng)酰胺葡萄糖基轉(zhuǎn)移酶(UGCG)ELISA試劑盒英文名稱:human UDP-glucose ceramide glucosyltransferase ELISA Kit規(guī)格:96T/48T大鼠巨噬細(xì)胞移動抑制因子(MIF)ELISA Kit,48T/96T 進(jìn)口/分裝
改良V-P培養(yǎng)基 現(xiàn)貨促銷 250 用于蠟樣芽孢桿的V-P試驗(yàn)(SN標(biāo)準(zhǔn))
硫氧還蛋白還原酶(TrxR)ELISA試劑盒英文名稱:Human thioredoxin reductase,TrxR ELISA Kit規(guī)格:96T/48T牛細(xì)胞因子ELISA Kit,48T/96T 進(jìn)口/國產(chǎn)
胰酪胨大豆羊血瓊脂基礎(chǔ) 特價供應(yīng) 250 用于蠟樣芽孢桿的溶血測試驗(yàn)(SN標(biāo)準(zhǔn))
可溶性磷脂酶A2(sPL-A2)ELISA試劑盒英文名稱:Human soluble Phospholipase A2,sPL-A2 ELISA Kit規(guī)格:96T/48T乳狀瘤病毒抗體(HPV) ELISA Kit,48T/96T 進(jìn)口/分裝
酪蛋白瓊脂 現(xiàn)貨促銷 250 用于蠟樣芽孢桿的酪蛋白分解試驗(yàn) (GB標(biāo)準(zhǔn))
基質(zhì)金屬蛋白酶1(MMP-1)ELISA試劑盒英文名稱:Human Matrix metalloproteinase 1,MMP-1 ELISA Kit 規(guī)格:96T/48T大鼠αL巖藻糖苷酶(AFU)ELISA Kit,48T/96T 進(jìn)口/國產(chǎn)