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操作流程:
(1)待測樣品孔中每孔加入待測樣品100μl,每種樣品設(shè)3個平行孔;設(shè)兩個陰性對照孔,每孔加未處理組的細(xì)胞裂解液100μl;另設(shè)一個空白對照孔,加入純細(xì)胞裂解液100μl。
(2)酶標(biāo)板置4℃,包被過夜。
(3)洗板:吸干孔內(nèi)反應(yīng)液,用洗滌液過洗一遍(將洗滌液注滿板孔后,即甩去),之后將洗滌液注滿板孔,浸泡1-2分鐘,間歇搖動。甩去孔內(nèi)液體后在吸水紙上拍干。重復(fù)洗滌3-4次。
(4)陰性對照孔每孔加入PBS 50μl,樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。
(5)酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。
(6)洗板,同(4)。
(7)每孔加1:5000稀釋的HRP-標(biāo)記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。
(8)酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。
(9)洗板,同(4)。
(10)每孔加TMB顯色液 100μl,輕輕混勻10s,置37℃暗處反應(yīng)15-20min。
(11)每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應(yīng)。
(12)分別測450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2,終測得的OD值為兩者之差(W1-W2),以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
(13)數(shù)據(jù)處理:在得出標(biāo)本(S)和陰性對照(N)的 OD值后,計算S/N值。S/N≥2.1為陽性判定標(biāo)準(zhǔn)。
我司主營產(chǎn)品之一,產(chǎn)品皆嚴(yán)格按照相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行生產(chǎn),并經(jīng)過了嚴(yán)格地反復(fù)地檢測,我們以嚴(yán)謹(jǐn)?shù)膽B(tài)度保證產(chǎn)品的質(zhì)量,從而保證您的實驗順利進(jìn)行。產(chǎn)品供貨周期短,供貨及時,且我司還提供完整的售前和售后服務(wù)。本公司產(chǎn)品僅用于科研。
產(chǎn)品名稱 |
小鼠解整合素金屬蛋白酶8(ADAM8)ELISA試劑盒 |
英文名稱 |
Mouse A Disintegrin And Metalloprotease 8(ADAM8)ELISA Kit |
貨號 |
PM105266 |
試劑配制:
1、酶聯(lián)板assay plate :一塊96孔或者48孔。
2、標(biāo)準(zhǔn)品standard:2瓶凍干品。
3、樣品稀釋液sample diluent:1×20ml/瓶。
4、生物素標(biāo)記抗體稀釋液biotin-antibody diluent:1×10ml/瓶。
5、辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素稀釋液 hrp-avidin diluent:1×10ml/瓶。
6、生物素標(biāo)記抗體biotin-antibody:1×120μl/瓶1:100
7、辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素hrp-avidin:1×120μl/瓶1:100
8、底物溶液tmb e:1×10ml/瓶。
9、濃洗滌液wash buffer:1×20ml/瓶,使用時每瓶用蒸餾水稀釋25倍。
10、終止液stop solution:1×10ml/瓶2n h2so4。
試劑準(zhǔn)備:
1. 使用前將所有的試劑和標(biāo)本緩慢均衡至室溫(18-25oC),試劑不能直接在37oC溶解。
2. 標(biāo)準(zhǔn)品(凍干品):每瓶標(biāo)準(zhǔn)品加入標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液1mL,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時反復(fù)顛倒/搓動以助溶解,其濃度為2000pg/mL。準(zhǔn)備7個稀釋標(biāo)準(zhǔn)品的EP管,每個EP管中加入150μL的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液,如圖所示依次倍比稀釋成不同的梯度, 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液(0pg/mL)直接作為空白孔。為保證實驗結(jié)果有效性,每次實驗請使用新的標(biāo)準(zhǔn)品溶液。
3. 濃洗滌液:用580mL蒸餾水或去離子水將20mL濃洗滌液稀釋至600mL,進(jìn)行30倍稀釋。
樣本實驗前準(zhǔn)備:
ELISA試劑盒液體樣本:包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清等。
(1)血清
室溫血液自然凝固10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(2)血漿:
應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(3)尿液:
用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實行。
(4)細(xì)胞培養(yǎng)上清:
檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。
(5)培養(yǎng)細(xì)胞
檢測細(xì)胞內(nèi)的成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細(xì)胞懸液,細(xì)胞濃度達(dá)到100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融或加入組織蛋白萃取試劑,以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(6)組織標(biāo)本
切割標(biāo)本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿化。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。
注意事項:
1. 試劑盒應(yīng)在有效期內(nèi)使用,請不要使用過期的試劑。
2. 試劑盒未使用時應(yīng)保存在 2-8℃冰箱,已復(fù)溶但未用完的標(biāo)準(zhǔn)品,請丟棄。
3. 試劑盒使用前請在室溫恢復(fù) 30 min,且充分混勻試劑盒里的各種成份及制備的樣品。
4. 在試驗中標(biāo)準(zhǔn)品和樣本建議作復(fù)孔檢測,且加入試劑的順序應(yīng)保持一致。
5. 為避免交叉污染,請在試驗中使用 1 次性試管,槍頭,封板膜及潔凈塑料容器。
6. 濃縮生物素化抗體和濃縮酶結(jié)合物的體積較少,在運(yùn)輸過程中微量液體會沾到管壁及瓶蓋上,使用前請離心處理(5-10 S 即可),使管壁上的液體集中在管底部,取用時,請用移液器小心吹打幾次。
7. 除了試劑盒中的濃縮洗滌液和終止液可以通用外,請不要使用其他來源試劑盒內(nèi)含的試劑代替本試劑盒中的某單個組分。
8. 為保證結(jié)果準(zhǔn)確,每次檢測均需做標(biāo)準(zhǔn)曲線。
氧氟沙星 英文名稱 含量測定 規(guī)格: 20mg/支進(jìn)口/國產(chǎn)
綠原酸 英文名稱 Chlorogenic Acid 規(guī)格: 20mg/支進(jìn)口/國產(chǎn) 含量: ≥98%
薄荷素油 英文名稱 鑒別 規(guī)格: 20mg/支進(jìn)口/國產(chǎn)
木糖醇 英文名稱 鑒別用 規(guī)格: 20mg/支進(jìn)口/國產(chǎn)
百速隆 標(biāo)準(zhǔn)品 CAS號:93697-74-6 100mg 英文名稱 規(guī)格: 20mg/支進(jìn)口/國產(chǎn) 含量:
185 環(huán)丙氨嗪 標(biāo)準(zhǔn)品 CAS號:0.25g 英文名稱 規(guī)格: 20mg/支進(jìn)口/國產(chǎn) 含量:
胰島素 英文名稱 對照品 規(guī)格: 20mg/支進(jìn)口/國產(chǎn) 含量: 鑒別
牛大力(美麗崖豆藤) 英文名稱 中藥對照藥材 規(guī)格: 20mg/支進(jìn)口/國產(chǎn) 含量: TLC法鑒別
橙皮素 英文名稱 規(guī)格: 20mg/支進(jìn)口/國產(chǎn) 含量: Hesperitin
大薊草 英文名稱 TLC法鑒別 規(guī)格: 20mg/支進(jìn)口/國產(chǎn)
柰酚-3-O-蕓香糖苷 英文名稱 規(guī)格: 20mg/支進(jìn)口/國產(chǎn) 含量: 4-Bromomethcathinone (hydrochloride) (10 mg)1-(4-bromophenyl)-2-(methylamino)-1-propanone, monohydrochloride; 4-BMC; 4-Bromomethcathinone (hydrochloride)
CAY10408 (5 mg)9-oxo-11。alpha。,16R-dihydroxy-17-cyclobutyl-5Z,13E-dien-1-oic acid; CAY10408
A-967079 (10 mg)(1E,3E)-1-(4-fluorophenyl)-2-methyl-1-penten-3-one oxime
Latanoprost (free acid) (5 mg)9。alpha。,11。alpha。,15R-trihydroxy-17-phenyl-18,19,20-trinor-prost-5Z-en-1-oic acid; Lat-FA|PhXA-85|17-phenyl-13,14-dihydro trinor Prostaglandin F2α; Latanoprost (free acid)
Carnosic Acid (5 mg)Rosamox
乙(50 mM)Acetic Acid (50 mM)
HU-308 (10 mg)4-[4-(1,1-dimethylheptyl)-2,6-dimethoxyphenyl]-6,6-dimethyl-bicyclo[3。1。1]hept-2-ene-2-methanol; HU-308
HA-1100 (hydrochloride) (1 mg)5-[(hexahydro-1H-1,4-diazepin-1-yl)sulfonyl]-1(2H)-isoquinolinone, monohydrochloride; Hydroxyfasudil; HA-1100 (hydrochloride)
Prostaglandin E Metabolite EIA Antiserum (100 dtn)Prostaglandin E Metabolite EIA Antiserum
(-)-Warfarin (5 mg)4-hydroxy-3-[(1S)-3-oxo-1-phenylbutyl]-2H-1-benzopyran-2-one; (S)-Warfarin; (-)-Warfarin
Arecoline (hydrobromide) (500 mg)1,2,5,6-tetrahydro-1-methyl-3-pyridinecarboxylic acid methyl ester, monohydrobromide; Arecoline (hydrobromide)
7-keto Cholesterol (100 mg)7-oxo Cholesterol|SC-4722|Δ5-Cholesterol-3β-ol-7-one; 3β-hydroxy-cholest-5-en-7-one
小鼠解整合素金屬蛋白酶8(ADAM8)ELISA試劑盒多粘素B 特價供應(yīng) 1.2mg/支*5 用1ml無水溶解后添加于100ml HB0256中
聚集蛋白(Agrin)ELISA試劑盒英文名稱:Human Agrin ELISA Kit 規(guī)格:96T/48T小鼠抗酒石酸酸性磷酸酶5b(TRACP-5b)ELISA Kit,48T/96T 進(jìn)口/分裝
多價蛋白胨-酵母膏 (PY) 培養(yǎng)基 現(xiàn)貨促銷 250 用于產(chǎn)氣莢膜梭的培養(yǎng)(SN標(biāo)準(zhǔn))
小鼠巨噬細(xì)胞炎性蛋白1β(MIP-1β/CCL4)ELISA試劑盒英文名稱:Mouse Macrophage Inflammatory Protein 1β,MIP-1β ELISA Kit 規(guī)格:96T/48T植物維生素B6(VB6)ELISA Kit,48T/96T 進(jìn)口/國產(chǎn)
皰肉牛肉粒 特價供應(yīng) 100 加入皰肉基礎(chǔ)中,配成皰肉培養(yǎng)基
小鼠可溶性肌球蛋白重鏈2(sMHC-2)ELISA試劑盒 英文名稱:Mouse soluble myosin heavy chain 2,sMHC-2 ELISA Kit規(guī)格:96T/48T抗中性粒細(xì)胞胞漿抗體(cANCA)ELISA Kit,48T/96T 進(jìn)口/分裝
卵黃瓊脂培養(yǎng)基基礎(chǔ) 現(xiàn)貨促銷 250 用于肉毒梭、產(chǎn)氣莢膜梭的分離培養(yǎng)(GB標(biāo)準(zhǔn))
小鼠Toll樣受體9(TLR-9/CD289)ELISA試劑盒 英文名稱:Mouse Toll-like receptor 9,TLR-9 ELISA Kit 規(guī)格:96T/48T大鼠抗胰蛋白酶(AT)ELISA Kit,48T/96T
含鐵牛奶培養(yǎng)基 特價供應(yīng) 250 用于產(chǎn)氣莢膜梭的牛奶發(fā)酵試驗
小鼠5核苷酸酶(5-NT)ELISA試劑盒英文名稱:Mouse 5-Nucleotidase,5-NT ELISA Kit 規(guī)格:96T/48T白介素23(IL-23)ELISA Kit,48T/96T
產(chǎn)氣莢膜梭 肉毒梭 厭氧 現(xiàn)貨促銷
小鼠8異前列腺素(8-iso-PG)ELISA試劑盒英文名稱:Mouse 8-iso prostaglandin,8-iso-PG ELISA Kit規(guī)格:96T/48T小鼠抗內(nèi)皮細(xì)胞抗體(AECA)ELISA Kit,48T/96T