試劑配制:

1、酶聯(lián)板assay plate ：一塊96孔或者48孔。
2、標(biāo)準(zhǔn)品standard：2瓶凍干品。
3、樣品稀釋液sample diluent：1×20ml/瓶。
4、生物素標(biāo)記抗體稀釋液biotin-antibody diluent：1×10ml/瓶。
5、辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素稀釋液 hrp-avidin diluent：1×10ml/瓶。
6、生物素標(biāo)記抗體biotin-antibody：1×120μl/瓶1：100
7、辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素hrp-avidin：1×120μl/瓶1：100
8、底物溶液tmb e：1×10ml/瓶。
9、濃洗滌液wash buffer：1×20ml/瓶，使用時(shí)每瓶用蒸餾水稀釋25倍。
10、終止液stop solution：1×10ml/瓶2n h2so4。

試劑準(zhǔn)備：
1. 使用前將所有的試劑和標(biāo)本緩慢均衡至室溫(18-25oC)，試劑不能直接在37oC溶解。
2. 標(biāo)準(zhǔn)品(凍干品)：每瓶標(biāo)準(zhǔn)品加入標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液1mL，蓋好后室溫靜置大約10分鐘，同時(shí)反復(fù)顛倒/搓動以助溶解，其濃度為2000pg/mL。準(zhǔn)備7個(gè)稀釋標(biāo)準(zhǔn)品的EP管，每個(gè)EP管中加入150μL的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液，如圖所示依次倍比稀釋成不同的梯度， 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液(0pg/mL)直接作為空白孔。為保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果有效性，每次實(shí)驗(yàn)請使用新的標(biāo)準(zhǔn)品溶液。
3. 濃洗滌液：用580mL蒸餾水或去離子水將20mL濃洗滌液稀釋至600mL，進(jìn)行30倍稀釋。

我司主營產(chǎn)品之一，產(chǎn)品皆嚴(yán)格按照相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行生產(chǎn)，并經(jīng)過了嚴(yán)格地反復(fù)地檢測，我們以嚴(yán)謹(jǐn)?shù)膽B(tài)度保證產(chǎn)品的質(zhì)量，從而保證您的實(shí)驗(yàn)順利進(jìn)行。產(chǎn)品供貨周期短，供貨及時(shí)，且我司還提供完整的售前和售后服務(wù)。本公司產(chǎn)品僅用于科研。

樣本實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備：
ELISA試劑盒液體樣本：包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清等。
（1）血清
室溫血液自然凝固10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。
（2）血漿：
應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑，混合10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。
（3）尿液：
用無菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實(shí)行。
（4）細(xì)胞培養(yǎng)上清：
檢測分泌性的成份時(shí)，用無菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。
（5）培養(yǎng)細(xì)胞
檢測細(xì)胞內(nèi)的成份時(shí)，用PBS（PH7.2-7.4）稀釋細(xì)胞懸液，細(xì)胞濃度達(dá)到100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融或加入組織蛋白萃取試劑，以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。
（6）組織標(biāo)本
切割標(biāo)本后，稱取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆谩?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS（PH7.4），或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿化。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測，其余冷凍備用。

注意事項(xiàng)：

1. 試劑盒應(yīng)在有效期內(nèi)使用，請不要使用過期的試劑。
2. 試劑盒未使用時(shí)應(yīng)保存在 2-8℃冰箱，已復(fù)溶但未用完的標(biāo)準(zhǔn)品，請丟棄。
3. 試劑盒使用前請?jiān)谑覝鼗謴?fù) 30 min，且充分混勻試劑盒里的各種成份及制備的樣品。
4. 在試驗(yàn)中標(biāo)準(zhǔn)品和樣本建議作復(fù)孔檢測，且加入試劑的順序應(yīng)保持一致。
5. 為避免交叉污染，請?jiān)谠囼?yàn)中使用 1 次性試管，槍頭，封板膜及潔凈塑料容器。
6. 濃縮生物素化抗體和濃縮酶結(jié)合物的體積較少，在運(yùn)輸過程中微量液體會沾到管壁及瓶蓋上，使用前請離心處理（5-10 S 即可），使管壁上的液體集中在管底部，取用時(shí)，請用移液器小心吹打幾次。
7. 除了試劑盒中的濃縮洗滌液和終止液可以通用外，請不要使用其他來源試劑盒內(nèi)含的試劑代替本試劑盒中的某單個(gè)組分。
8. 為保證結(jié)果準(zhǔn)確，每次檢測均需做標(biāo)準(zhǔn)曲線。

操作流程：
（1）待測樣品孔中每孔加入待測樣品100μl，每種樣品設(shè)3個(gè)平行孔；設(shè)兩個(gè)陰性對照孔，每孔加未處理組的細(xì)胞裂解液100μl；另設(shè)一個(gè)空白對照孔，加入純細(xì)胞裂解液100μl。 
（2）酶標(biāo)板置4℃，包被過夜。
（3）洗板：吸干孔內(nèi)反應(yīng)液，用洗滌液過洗一遍（將洗滌液注滿板孔后，即甩去），之后將洗滌液注滿板孔，浸泡1-2分鐘，間歇搖動。甩去孔內(nèi)液體后在吸水紙上拍干。重復(fù)洗滌3-4次。
（4）陰性對照孔每孔加入PBS 50μl，樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。 
（5）酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi)，孵育60min。 
（6）洗板，同（4）。 
（7）每孔加1:5000稀釋的HRP-標(biāo)記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。 
（8）酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi)，孵育60min。 
（9）洗板，同（4）。 
（10）每孔加TMB顯色液 100μl，輕輕混勻10s，置37℃暗處反應(yīng)15-20min。 
（11）每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應(yīng)。 
（12）分別測450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2，終測得的OD值為兩者之差（W1-W2），以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
（13）數(shù)據(jù)處理：在得出標(biāo)本（S）和陰性對照（N）的 OD值后，計(jì)算S/N值。S/N≥2.1為陽性判定標(biāo)準(zhǔn)。
茅膏菜 英文名稱 TLC法鑒別  規(guī)格:  20mg/支進(jìn)口/國產(chǎn)

枸櫞酸血根堿 英文名稱 Sanguinarine citrate  規(guī)格:  20mg/支進(jìn)口/國產(chǎn) 含量： ≥98%

可的松 英文名稱 供HPLC法  規(guī)格:  20mg/支進(jìn)口/國產(chǎn)

鹽酸丙卡特羅 英文名稱 含量測定  規(guī)格:  20mg/支進(jìn)口/國產(chǎn)

林可霉素(） 標(biāo)準(zhǔn)品  CAS號：21462-39-5 100mg 英文名稱   規(guī)格:  20mg/支進(jìn)口/國產(chǎn) 含量：

氨乙酯 標(biāo)準(zhǔn)品  CAS號：34584 100MG 英文名稱   規(guī)格:  20mg/支進(jìn)口/國產(chǎn) 含量：

7-ACA 英文名稱 對照品  規(guī)格:  20mg/支進(jìn)口/國產(chǎn) 含量： 檢查

金銀花 英文名稱 中藥對照藥材  規(guī)格:  20mg/支進(jìn)口/國產(chǎn) 含量： TLC法鑒別

鷓鴣菜 英文名稱 中藥對照藥材  規(guī)格:  20mg/支進(jìn)口/國產(chǎn) 含量： TLC法鑒別

白花前胡甲素 英文名稱 (-)-pareruptorin A  規(guī)格:  20mg/支進(jìn)口/國產(chǎn) 含量： HPLC≥98%

參皂苷 Rh3 英文名稱 Ginsenoside Rh3  規(guī)格:  20mg/支進(jìn)口/國產(chǎn) 含量： ≥98%DL-Lauroylcarnitine （chloride） （25 mg）3-

AOZ-BSA偶聯(lián)物[用于ELISA]3-Amino-2-oxazolidine （AOZ）-BSA Conjugate

SC-58125 （25 mg）5-（4-fluorophenyl）-1-[4-（methylsulfonyl）phenyl]-3-（trifluoromethyl）-1H-pyrazole； SC-58125

Phentolamine （mesylate） （1 g）Regitine|Vasomax； 3-[[（4,5-dihydro-1H-imidazol-2-yl）methyl]（4-methylphenyl）amino]-phenol, monomethanesulfonate

25C-NBOMe （hydrochloride） （1 mg）2-（4-chloro-2，5-dimethoxyphenyl）-N-（2-methoxybenzyl）ethanamine， monohydrochloride； 2C-C-NBOMe； 25C-NBOMe （hydrochloride）

Prostaglandin F2α Alcohol methyl ether （5 mg）1-methoxy-9。alpha。，11。alpha。，15S-trihydroxyprosta-5Z，13E-diene； AGN191129|PGF2α-OMe； Prostaglandin F2α Alcohol methyl ether

2-（2’，3-dimethyl-[2，4’-bipyridin]-5-yl）-N-（5-（pyrazin-2-yl）pyridin-2-yl）acetamideLGK974

9，12-Octadecadiynoic Acid （10 mg）9，12-octadecadiynoic acid； Ro 3-1314； 9，12-Octadecadiynoic Acid

7-methoxy-4-（（6-phenyl-[1，2，4]triazolo[4，3-b]pyridazin-3-yl）methoxy）quinolineAMG-208

Docosapentaenoic Acid (5 mg)Docosapentaenoic Acid, 7Z,1Z,13Z,16Z,19Z-docosapentaenoic acid

（S）-10-hydroxy-Camptothecin （25 mg）（4S）-4-ethyl-4，9-dihydroxy-1H-pyrano[3’，4’:6，7]indolizino[1，2-b]quinoline-3，14（4H，12H）-dione； ChEMBL 273862|NSC 107124； （S）-10-hydroxy-Camptothecin

iPF2α-VI EIA Antiserum (100 dtn)iPF2α-VI EIA Antiserum

小鼠角質(zhì)轉(zhuǎn)谷氨酰胺酶(TGM1)ELISA試劑盒BETA-SSA 瓊脂 特價(jià)供應(yīng) 250 用于鏈球的選擇性分離培養(yǎng)(ACUMEDIA方法)

豬B細(xì)胞瘤因子2(Bcl-2)ELISA試劑盒英文名稱：Porcine B-cell leukemia/lymphoma 2,Bcl-2 ELISA Kit規(guī)格:96T/48T唾液酸(SA)ELISA Kit，48T/96T

小腸結(jié)腸炎耶爾森氏 現(xiàn)貨促銷  

豬球蛋白M(IgM)ELISA試劑盒英文名稱：Porcine Immuglobulin M,IgM ELISA Kit規(guī)格:96T/48T抗肝特異性脂蛋白抗體(LSP)ELISA Kit，48T/96T

改良Y培養(yǎng)基    特價(jià)供應(yīng) 250 用于分離小腸結(jié)腸炎耶爾森氏 （GB標(biāo)準(zhǔn)）

雞脂多糖/內(nèi)(LPS)ELISA試劑盒英文名稱：Chicken Lipopolysaccharides,LPS ELISA Kit規(guī)格:96T/48T豬Bcl-2相關(guān)X蛋白(BAX)ELISA Kit，48T/96T

改良磷酸鹽緩沖液PSB   現(xiàn)貨促銷 250 用于小腸結(jié)腸炎耶爾森氏冷增培養(yǎng) （GB標(biāo)準(zhǔn)）

雞腫瘤壞死因子相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體3(TRAIL-R3)ELISA試劑盒英文名稱：Chicken tumor necrosis factor-related apoptosis-inducing ligand 3,TRAIL-R3 ELISA Kit 規(guī)格:96T/48T血纖蛋白(Fibrin)ELISA Kit，48T/96T

ITC 肉湯 特價(jià)供應(yīng) 250 用于分離培養(yǎng)耶爾森氏(ISO方法)

兔尿激酶型纖溶酶原激活物受體(PLAUR/uPAR)ELISA試劑盒 英文名稱：Rabbit Urokinase-type Plasmigen Activator Receptor,PLAUR/uPAR ELISA Kit 規(guī)格:96T/48T胎盤催乳素(HPL)ELISA Kit，48T/96T

CIN-1I培養(yǎng)基基礎(chǔ)     現(xiàn)貨促銷 250 用于分離小腸結(jié)腸炎耶爾森氏 （GB標(biāo)準(zhǔn)）

兔糖化血紅蛋白A1c(GHbA1c)ELISA試劑盒英文名稱：Rabbit Glycated hemoglobin A1c,GHbA1c ELISA Kit 規(guī)格:96T/48T鳥氨酸氨基甲酰轉(zhuǎn)移酶(OCT)ELISA Kit，48T/96T