試劑配制:

1、酶聯(lián)板assay plate ：一塊96孔或者48孔。
2、標(biāo)準(zhǔn)品standard：2瓶?jī)龈善贰?br> 3、樣品稀釋液sample diluent：1×20ml/瓶。
4、生物素標(biāo)記抗體稀釋液biotin-antibody diluent：1×10ml/瓶。
5、辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素稀釋液 hrp-avidin diluent：1×10ml/瓶。
6、生物素標(biāo)記抗體biotin-antibody：1×120μl/瓶1：100
7、辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素hrp-avidin：1×120μl/瓶1：100
8、底物溶液tmb e：1×10ml/瓶。
9、濃洗滌液wash buffer：1×20ml/瓶，使用時(shí)每瓶用蒸餾水稀釋25倍。
10、終止液stop solution：1×10ml/瓶2n h2so4。

試劑準(zhǔn)備：
1. 使用前將所有的試劑和標(biāo)本緩慢均衡至室溫(18-25oC)，試劑不能直接在37oC溶解。
2. 標(biāo)準(zhǔn)品(凍干品)：每瓶標(biāo)準(zhǔn)品加入標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液1mL，蓋好后室溫靜置大約10分鐘，同時(shí)反復(fù)顛倒/搓動(dòng)以助溶解，其濃度為2000pg/mL。準(zhǔn)備7個(gè)稀釋標(biāo)準(zhǔn)品的EP管，每個(gè)EP管中加入150μL的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液，如圖所示依次倍比稀釋成不同的梯度， 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液(0pg/mL)直接作為空白孔。為保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果有效性，每次實(shí)驗(yàn)請(qǐng)使用新的標(biāo)準(zhǔn)品溶液。
3. 濃洗滌液：用580mL蒸餾水或去離子水將20mL濃洗滌液稀釋至600mL，進(jìn)行30倍稀釋。

我司主營(yíng)產(chǎn)品之一，產(chǎn)品皆嚴(yán)格按照相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行生產(chǎn)，并經(jīng)過了嚴(yán)格地反復(fù)地檢測(cè)，我們以嚴(yán)謹(jǐn)?shù)膽B(tài)度保證產(chǎn)品的質(zhì)量，從而保證您的實(shí)驗(yàn)順利進(jìn)行。產(chǎn)品供貨周期短，供貨及時(shí)，且我司還提供完整的售前和售后服務(wù)。本公司產(chǎn)品僅用于科研。

樣本實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備：
ELISA試劑盒液體樣本：包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清等。
（1）血清
室溫血液自然凝固10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。
（2）血漿：
應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑，混合10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。
（3）尿液：
用無菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實(shí)行。
（4）細(xì)胞培養(yǎng)上清：
檢測(cè)分泌性的成份時(shí)，用無菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。
（5）培養(yǎng)細(xì)胞
檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)的成份時(shí)，用PBS（PH7.2-7.4）稀釋細(xì)胞懸液，細(xì)胞濃度達(dá)到100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融或加入組織蛋白萃取試劑，以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。
（6）組織標(biāo)本
切割標(biāo)本后，稱取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS（PH7.4），或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿化。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測(cè)，其余冷凍備用。

注意事項(xiàng)：

1. 試劑盒應(yīng)在有效期內(nèi)使用，請(qǐng)不要使用過期的試劑。
2. 試劑盒未使用時(shí)應(yīng)保存在 2-8℃冰箱，已復(fù)溶但未用完的標(biāo)準(zhǔn)品，請(qǐng)丟棄。
3. 試劑盒使用前請(qǐng)?jiān)谑覝鼗謴?fù) 30 min，且充分混勻試劑盒里的各種成份及制備的樣品。
4. 在試驗(yàn)中標(biāo)準(zhǔn)品和樣本建議作復(fù)孔檢測(cè)，且加入試劑的順序應(yīng)保持一致。
5. 為避免交叉污染，請(qǐng)?jiān)谠囼?yàn)中使用 1 次性試管，槍頭，封板膜及潔凈塑料容器。
6. 濃縮生物素化抗體和濃縮酶結(jié)合物的體積較少，在運(yùn)輸過程中微量液體會(huì)沾到管壁及瓶蓋上，使用前請(qǐng)離心處理（5-10 S 即可），使管壁上的液體集中在管底部，取用時(shí)，請(qǐng)用移液器小心吹打幾次。
7. 除了試劑盒中的濃縮洗滌液和終止液可以通用外，請(qǐng)不要使用其他來源試劑盒內(nèi)含的試劑代替本試劑盒中的某單個(gè)組分。
8. 為保證結(jié)果準(zhǔn)確，每次檢測(cè)均需做標(biāo)準(zhǔn)曲線。

操作流程：
（1）待測(cè)樣品孔中每孔加入待測(cè)樣品100μl，每種樣品設(shè)3個(gè)平行孔；設(shè)兩個(gè)陰性對(duì)照孔，每孔加未處理組的細(xì)胞裂解液100μl；另設(shè)一個(gè)空白對(duì)照孔，加入純細(xì)胞裂解液100μl。 
（2）酶標(biāo)板置4℃，包被過夜。
（3）洗板：吸干孔內(nèi)反應(yīng)液，用洗滌液過洗一遍（將洗滌液注滿板孔后，即甩去），之后將洗滌液注滿板孔，浸泡1-2分鐘，間歇搖動(dòng)。甩去孔內(nèi)液體后在吸水紙上拍干。重復(fù)洗滌3-4次。
（4）陰性對(duì)照孔每孔加入PBS 50μl，樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。 
（5）酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi)，孵育60min。 
（6）洗板，同（4）。 
（7）每孔加1:5000稀釋的HRP-標(biāo)記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。 
（8）酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi)，孵育60min。 
（9）洗板，同（4）。 
（10）每孔加TMB顯色液 100μl，輕輕混勻10s，置37℃暗處反應(yīng)15-20min。 
（11）每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應(yīng)。 
（12）分別測(cè)450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2，終測(cè)得的OD值為兩者之差（W1-W2），以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
（13）數(shù)據(jù)處理：在得出標(biāo)本（S）和陰性對(duì)照（N）的 OD值后，計(jì)算S/N值。S/N≥2.1為陽性判定標(biāo)準(zhǔn)。
己酸羥孕酮 英文名稱 對(duì)照品  規(guī)格:  20mg/支進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 含量： 含量測(cè)定

3,5-O二咖啡?；鼘幩?英文名稱 含量測(cè)定  規(guī)格:  20mg/支進(jìn)口/國(guó)產(chǎn)

單磷酸阿糖腺苷 英文名稱 對(duì)照品  規(guī)格:  20mg/支進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 含量： UV法含量測(cè)定

司帕沙星 英文名稱 對(duì)照品  規(guī)格:  20mg/支進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 含量： 含量測(cè)定

那可丁 英文名稱 含量測(cè)定  規(guī)格:  20mg/支進(jìn)口/國(guó)產(chǎn)

羥氯柳苯胺標(biāo)準(zhǔn)品  CAS號(hào)： 2277-92-1 100mg 英文名稱   規(guī)格:  20mg/支進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 含量：

磷酸苯丙林 英文名稱 含量測(cè)定  規(guī)格:  20mg/支進(jìn)口/國(guó)產(chǎn)

大黃酸 英文名稱 Rhein  規(guī)格:  20mg/支進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 含量： HPLC≥98%

交聯(lián)聚維酮 英文名稱 供鑒別用  規(guī)格:  20mg/支進(jìn)口/國(guó)產(chǎn)

水防風(fēng) 英文名稱 中藥對(duì)照藥材  規(guī)格:  20mg/支進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 含量： TLC法鑒別

益智 英文名稱 中藥對(duì)照藥材  規(guī)格:  20mg/支進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 含量： TLC法鑒別3,4-Dimethylethcathinone -hydrochloride) (50 mg)3,4-DMEC, 3,4-Dimethylethcathinone -hydrochloride), 1-(3,4-dimethylphenyl)-2-(ethylamino)propan-1-one, monohydrochloride

ReadiUse 丙磺舒 25 mM穩(wěn)定的水溶液ReadiUse probenecid 25 mM stabilized aqueous solution

Luzindole （50 mg）N-0774； N-[2-[2-（phenylmethyl）-1H-indol-3-yl]ethyl]-acetamide

8-iso Prostaglandin F1α （1 mg）9。alpha。，11。alpha。，15S-trihydroxy-（8。beta。）-prost-13E-en-1-oic acid； 8-epi PGF1α； 8-iso Prostaglandin F1α

Z-LEHD-ProRed 620Z-LEHD-ProRed 620

TacrolimusFK-506

JWH 210 5-ethylnaphthyl isomer （5 mg）（5-ethylnaphthalen-1-yl）（1-pentyl-1H-indol-3-yl）methanone； JWH 210 5-ethylnaphthyl isomer

Fast Green FCF （25 g）N-ethyl-N-[4-[[4-[ethyl[（3-sulfophenyl）methyl]amino]phenyl]（4-hydroxy-2-sulfophenyl）methylene]-2，5-cyclohexadien-1-ylidene]-3-sulfo-benzenemethanaminium， disodium salt； NSC 379443； Fast Green FCF

-R)-Bromoenol lactone-d7 (5 mg)(R)-BEL-d7, -R)-Bromoenol lactone-d7, 6E-(bromoethylene)tetrahydro-3R-(1-naphthalenyl-2,3,4,5,6,7,8-d7)-2H-pyran-2-one

4’-fluoro-α-Pyrrolidinopropiophenone （hydrochloride） （50 mg）1-（4-fluorophenyl）-2-（1-pyrrolidinyl）-1-propanone， monohydrochloride； 4’F-α-PPP； 4’-fluoro-α-Pyrrolidinopropiophenone （hydrochloride）

PtdIns--3)-P1 -1,2-dioctanoyl) -sodium salt) (250 ug)Phosphatidylinositol-3-monophosphate C-8|DOPI-3-P1, PtdIns--3)-P1 -1,2-dioctanoyl) -sodium salt), 1-(1,2-dioctanoylphosphatidyl)inositol-3-phosphate, disodium salt

p-nitro-Pifithrin-α （25 mg）p-nitro-PFT-α； 1-

小鼠堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子(FGF2)ELISA Kit吖啶黃素 特價(jià)供應(yīng) 2.7mg*5 添加于225ml HB4160中制成LB1

魚精蛋白1(PRM1)ELISA試劑盒英文名稱：Human Protamine 1,PRM1 ELISA Kit規(guī)格:96T/48T大鼠生長(zhǎng)釋放多肽(GHRP)ELISA Kit，48T/96T 進(jìn)口/原裝

七葉苷培養(yǎng)基    現(xiàn)貨促銷 10 生化試驗(yàn)培養(yǎng)基，用于細(xì)七葉苷利用試驗(yàn)（SN標(biāo)準(zhǔn)）

抗凝血酶受體(ATR)ELISA試劑盒英文名稱：Human anti-thrombin receptor,ATR ELISA Kit規(guī)格:96T/48T雞碳酸酐酶(CA)ELISA Kit，48T/96T 特價(jià)促銷

半固體動(dòng)力培養(yǎng)基   特價(jià)供應(yīng) 250 用于動(dòng)力觀察，種保存，H抗原位相變異試驗(yàn)等（SN標(biāo)準(zhǔn)）

泛素蛋白D(UBD)ELISA試劑盒英文名稱：human ubiquitin D,UBD ELISA Kit規(guī)格:96T/48T犬腎素(Renin)ELISA Kit，48T/96T 進(jìn)口/原裝

牛津瓊脂(OXA)基礎(chǔ)    現(xiàn)貨促銷 250 用于單增李氏的選擇性分離

Agouti相關(guān)蛋白(AGRP)ELISA試劑盒英文名稱：Human Agouti Related Protein,AGRP ELISA Kit 規(guī)格:96T/48T大鼠抗酒石酸酸性磷酸酶5b(TRACP-5b)ELISA Kit，48T/96T 特價(jià)促銷

多粘素E 特價(jià)供應(yīng) 2mg/支*5 添于100ml HB4171中

小鼠巨噬細(xì)胞炎性蛋白3α(MIP-3α/CCL20)ELISA試劑盒英文名稱：Mouse Macrophage Inflammatory Protein 3α,MIP-3α ELISA Kit 規(guī)格:96T/48T大鼠維生素B6(VB6)ELISA Kit，48T/96T 進(jìn)口/原裝

溴甲酚紫葡萄糖肉湯    現(xiàn)貨促銷 250 用于低酸性罐頭食品商業(yè)無檢驗(yàn)

小鼠可溶性肌球蛋白重鏈1(sMHC-1)ELISA試劑盒 英文名稱：Mouse soluble myosin heavy chain 1,sMHC-1 ELISA Kit規(guī)格:96T/48T抗中性粒細(xì)胞核周抗體(pANCA)ELISA Kit，48T/96T 特價(jià)促銷