試劑配制:

1、酶聯(lián)板assay plate ：一塊96孔或者48孔。
2、標(biāo)準(zhǔn)品standard：2瓶凍干品。
3、樣品稀釋液sample diluent：1×20ml/瓶。
4、生物素標(biāo)記抗體稀釋液biotin-antibody diluent：1×10ml/瓶。
5、辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素稀釋液 hrp-avidin diluent：1×10ml/瓶。
6、生物素標(biāo)記抗體biotin-antibody：1×120μl/瓶1：100
7、辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素hrp-avidin：1×120μl/瓶1：100
8、底物溶液tmb e：1×10ml/瓶。
9、濃洗滌液wash buffer：1×20ml/瓶，使用時(shí)每瓶用蒸餾水稀釋25倍。
10、終止液stop solution：1×10ml/瓶2n h2so4。

試劑準(zhǔn)備：
1. 使用前將所有的試劑和標(biāo)本緩慢均衡至室溫(18-25oC)，試劑不能直接在37oC溶解。
2. 標(biāo)準(zhǔn)品(凍干品)：每瓶標(biāo)準(zhǔn)品加入標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液1mL，蓋好后室溫靜置大約10分鐘，同時(shí)反復(fù)顛倒/搓動(dòng)以助溶解，其濃度為2000pg/mL。準(zhǔn)備7個(gè)稀釋標(biāo)準(zhǔn)品的EP管，每個(gè)EP管中加入150μL的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液，如圖所示依次倍比稀釋成不同的梯度， 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液(0pg/mL)直接作為空白孔。為保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果有效性，每次實(shí)驗(yàn)請使用新的標(biāo)準(zhǔn)品溶液。
3. 濃洗滌液：用580mL蒸餾水或去離子水將20mL濃洗滌液稀釋至600mL，進(jìn)行30倍稀釋。

我司主營產(chǎn)品之一，產(chǎn)品皆嚴(yán)格按照相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行生產(chǎn)，并經(jīng)過了嚴(yán)格地反復(fù)地檢測，我們以嚴(yán)謹(jǐn)?shù)膽B(tài)度保證產(chǎn)品的質(zhì)量，從而保證您的實(shí)驗(yàn)順利進(jìn)行。產(chǎn)品供貨周期短，供貨及時(shí)，且我司還提供完整的售前和售后服務(wù)。本公司產(chǎn)品僅用于科研。

樣本實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備：
ELISA試劑盒液體樣本：包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清等。
（1）血清
室溫血液自然凝固10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。
（2）血漿：
應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑，混合10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。
（3）尿液：
用無菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實(shí)行。
（4）細(xì)胞培養(yǎng)上清：
檢測分泌性的成份時(shí)，用無菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。
（5）培養(yǎng)細(xì)胞
檢測細(xì)胞內(nèi)的成份時(shí)，用PBS（PH7.2-7.4）稀釋細(xì)胞懸液，細(xì)胞濃度達(dá)到100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融或加入組織蛋白萃取試劑，以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。
（6）組織標(biāo)本
切割標(biāo)本后，稱取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS（PH7.4），或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿化。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測，其余冷凍備用。

注意事項(xiàng)：

1. 試劑盒應(yīng)在有效期內(nèi)使用，請不要使用過期的試劑。
2. 試劑盒未使用時(shí)應(yīng)保存在 2-8℃冰箱，已復(fù)溶但未用完的標(biāo)準(zhǔn)品，請丟棄。
3. 試劑盒使用前請?jiān)谑覝鼗謴?fù) 30 min，且充分混勻試劑盒里的各種成份及制備的樣品。
4. 在試驗(yàn)中標(biāo)準(zhǔn)品和樣本建議作復(fù)孔檢測，且加入試劑的順序應(yīng)保持一致。
5. 為避免交叉污染，請?jiān)谠囼?yàn)中使用 1 次性試管，槍頭，封板膜及潔凈塑料容器。
6. 濃縮生物素化抗體和濃縮酶結(jié)合物的體積較少，在運(yùn)輸過程中微量液體會沾到管壁及瓶蓋上，使用前請離心處理（5-10 S 即可），使管壁上的液體集中在管底部，取用時(shí)，請用移液器小心吹打幾次。
7. 除了試劑盒中的濃縮洗滌液和終止液可以通用外，請不要使用其他來源試劑盒內(nèi)含的試劑代替本試劑盒中的某單個(gè)組分。
8. 為保證結(jié)果準(zhǔn)確，每次檢測均需做標(biāo)準(zhǔn)曲線。

操作流程：
（1）待測樣品孔中每孔加入待測樣品100μl，每種樣品設(shè)3個(gè)平行孔；設(shè)兩個(gè)陰性對照孔，每孔加未處理組的細(xì)胞裂解液100μl；另設(shè)一個(gè)空白對照孔，加入純細(xì)胞裂解液100μl。 
（2）酶標(biāo)板置4℃，包被過夜。
（3）洗板：吸干孔內(nèi)反應(yīng)液，用洗滌液過洗一遍（將洗滌液注滿板孔后，即甩去），之后將洗滌液注滿板孔，浸泡1-2分鐘，間歇搖動(dòng)。甩去孔內(nèi)液體后在吸水紙上拍干。重復(fù)洗滌3-4次。
（4）陰性對照孔每孔加入PBS 50μl，樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。 
（5）酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi)，孵育60min。 
（6）洗板，同（4）。 
（7）每孔加1:5000稀釋的HRP-標(biāo)記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。 
（8）酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi)，孵育60min。 
（9）洗板，同（4）。 
（10）每孔加TMB顯色液 100μl，輕輕混勻10s，置37℃暗處反應(yīng)15-20min。 
（11）每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應(yīng)。 
（12）分別測450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2，終測得的OD值為兩者之差（W1-W2），以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
（13）數(shù)據(jù)處理：在得出標(biāo)本（S）和陰性對照（N）的 OD值后，計(jì)算S/N值。S/N≥2.1為陽性判定標(biāo)準(zhǔn)。
依普素 標(biāo)準(zhǔn)品  CAS號：123997-26-2 100mg 英文名稱   規(guī)格:  20mg/支進(jìn)口/國產(chǎn) 含量：

羥喜樹堿 英文名稱 含量測定  規(guī)格:  20mg/支進(jìn)口/國產(chǎn)

阿米卡星 英文名稱 標(biāo)準(zhǔn)品  規(guī)格:  20mg/支進(jìn)口/國產(chǎn) 含量： 效價(jià)測定

伊貝母 英文名稱 中藥對照藥材  規(guī)格:  20mg/支進(jìn)口/國產(chǎn) 含量： TLC法鑒別

鹽酸丁卡因 英文名稱 對照品  規(guī)格:  20mg/支進(jìn)口/國產(chǎn) 含量： HPLC法含量測定用

鹽酸普魯卡因 英文名稱 對照品  規(guī)格:  20mg/支進(jìn)口/國產(chǎn) 含量： HPLC法含量測定

桔梗皂苷D 英文名稱 PlatycodinD  規(guī)格:  20mg/支進(jìn)口/國產(chǎn) 含量： 98%

丹參酚酸A 英文名稱 Salvianolic acid A  規(guī)格:  20mg/支進(jìn)口/國產(chǎn) 含量： ≥96%

對香豆酸 英文名稱 P-Coumaric acid  規(guī)格:  20mg/支進(jìn)口/國產(chǎn) 含量： ≥98%

瓜子金皂苷己 英文名稱 供含量測定  規(guī)格:  20mg/支進(jìn)口/國產(chǎn)

碘海醇雜質(zhì)Ⅲ 英文名稱 HPLC系統(tǒng)  規(guī)格:  20mg/支進(jìn)口/國產(chǎn) Δ6-Testosterone Enanthate (50 mg)Δ6-Testosterone Enanthate, (1R,13S,17S)-1,13-dimethyl-3-oxo-2,3,8,9,1,11,12,13,14,15,16,17-dodecahydro-1H-cyclopenta[a]phenanthren-17-yl heptanoate

Zinpyr-1 （10 mg）4’，5’-bis[[bis（2-pyridinylmethyl）amino]methyl]-2’，7’-dichloro-3’，6’-dihydroxy-spiro[isobenzofuran-1（3H），9’-[9H]xanthen]-3-one； ZP-1； Zinpyr-1

（R）-Lisofylline （10 mg）3，7-dihydro-1-[（5R）-5-hydroxyhexyl]-3，7-dimethyl-1H-purine-2，6-dione； （-）-Lisofylline|（R）-LSF； （R）-Lisofylline

4-Bromomethcathinone （hydrochloride） （5 mg）1-（4-bromophenyl）-2-（methylamino）-1-propanone， monohydrochloride； 4-BMC； 4-Bromomethcathinone （hydrochloride）

RVX-208 （25 mg）2-[4-（2-hydroxyethoxy）-3,5-dimethylphenyl]-5,7-dimethoxy-4（3H）-quinazolinone

PA Assay DMSO （1 ml）PA Assay DMSO

組蛋白H3多肽（氨基：15-39）Histone H3 Peptide （residues 15-39） （100 ul）

5-（3-（4-（2-（4-Fluorophenyl）ethoxy）phenyl）propyl）furan-2-carboxylic acidAMPK Activator， D942

Indomethacin heptyl ester （50 mg）1-（4-chlorobenzoyl）-5-methoxy-2-methyl-1H-indole-3-acetic acid， 1-heptyl ester； Indomethacin heptyl ester

Z-LEHD-FMK， Caspase-9抑制劑（氟基）Z-LEHD-FMK

LSD DMSO （2 ml）LSD DMSO

2，5-DMA （10 mg）2，5-dimethoxy-α-methyl-benzeneethanamine； 2，5-Dimethoxyamphetamine； 2，5-DMA

小鼠甲狀旁腺素受體2(PTHR2)ELISA試劑盒Raka-Ray 培養(yǎng)基 特價(jià)供應(yīng) 250 用于啤酒中乳酸檢測和分離培養(yǎng)

雞L苯丙氨酸解氨酶(PAL)ELISA試劑盒 英文名稱：Chicken L-Phenylalanine ammonla-lyase,PAL ELISA Kit 規(guī)格:96T/48T腺苷脫氨酶(ADA)ELISA Kit，48T/96T

SCDLP液體培養(yǎng)基   現(xiàn)貨促銷 250 用于化妝品樣品制備，前增培養(yǎng)（GB標(biāo)準(zhǔn)）

兔尿激酶型纖溶酶原激活物(uPA)ELISA試劑盒英文名稱：Rabbit urokinase plasmigen activator,uPA ELISA Kit 規(guī)格:96T/48T胎盤蛋白(PP)ELISA Kit，48T/96T

卵磷脂吐溫80營養(yǎng)瓊脂   特價(jià)供應(yīng) 250 用于化妝品細(xì)總數(shù)測定（GB標(biāo)準(zhǔn)）

兔半胱氨酸蛋白酶抑制劑/胱抑素C(Cys-C)ELISA試劑盒英文名稱：Rabbit Cystatin C,Cys-C ELISA Kit 規(guī)格:96T/48T肽基脯氨酰順反異構(gòu)酶(PPI)ELISA Kit，48T/96T

乙酰胺瓊脂    現(xiàn)貨促銷 250 用于綠膿桿的選擇性分離培養(yǎng)（GB標(biāo)準(zhǔn)）

兔子基質(zhì)金屬蛋白酶5(MMP-5)ELISA試劑盒英文名稱：rabbit matrix metalloproteinase 5,MMP-5 ELISA Kit規(guī)格:96T/48T肽聚糖(PG)ELISA Kit，48T/96T

十六烷基溴化銨瓊脂   特價(jià)供應(yīng) 250 用于綠膿桿的選擇性分離培養(yǎng)（GB標(biāo)準(zhǔn)）

鴨白介素6(IL-6)ELISA試劑盒 英文名稱：Duck Interleukin 6,IL-6 ELISA Kit 規(guī)格:96T/48T尿素酶相關(guān)蛋白C(UreC)ELISA Kit，48T/96T

甘露醇發(fā)酵培養(yǎng)基   現(xiàn)貨促銷 250 生化試驗(yàn)培養(yǎng)基，用于細(xì)（如金黃色葡萄球）甘露醇發(fā)酵試驗(yàn)（GB標(biāo)準(zhǔn)）

山羊P選擇素(P-Selectin/CD62P/GMP140)ELISA試劑盒英文名稱：Goat P-Selectin/CD62P/GMP-140 ELISA Kit規(guī)格:96T/48T大鼠多巴胺轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白(DAT)ELISA Kit，48T/96T