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我司主營產(chǎn)品之一,產(chǎn)品皆嚴格按照相關(guān)標準進行生產(chǎn),并經(jīng)過了嚴格地反復(fù)地檢測,我們以嚴謹?shù)膽B(tài)度保證產(chǎn)品的質(zhì)量,從而保證您的實驗順利進行。產(chǎn)品供貨周期短,供貨及時,且我司還提供完整的售前和售后服務(wù)。本公司產(chǎn)品僅用于科研。
產(chǎn)品名稱 |
小鼠肝配蛋白B2(EFNB2)ELISA試劑盒 |
英文名稱 |
Mouse Ephrin B2(EFNB2)ELISA Kit |
貨號 |
PM105438 |
試劑配制:
1、酶聯(lián)板assay plate :一塊96孔或者48孔。
2、標準品standard:2瓶凍干品。
3、樣品稀釋液sample diluent:1×20ml/瓶。
4、生物素標記抗體稀釋液biotin-antibody diluent:1×10ml/瓶。
5、辣根過氧化物酶標記親和素稀釋液 hrp-avidin diluent:1×10ml/瓶。
6、生物素標記抗體biotin-antibody:1×120μl/瓶1:100
7、辣根過氧化物酶標記親和素hrp-avidin:1×120μl/瓶1:100
8、底物溶液tmb e:1×10ml/瓶。
9、濃洗滌液wash buffer:1×20ml/瓶,使用時每瓶用蒸餾水稀釋25倍。
10、終止液stop solution:1×10ml/瓶2n h2so4。
試劑準備:
1. 使用前將所有的試劑和標本緩慢均衡至室溫(18-25oC),試劑不能直接在37oC溶解。
2. 標準品(凍干品):每瓶標準品加入標準品稀釋液1mL,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時反復(fù)顛倒/搓動以助溶解,其濃度為2000pg/mL。準備7個稀釋標準品的EP管,每個EP管中加入150μL的標準品稀釋液,如圖所示依次倍比稀釋成不同的梯度, 標準品稀釋液(0pg/mL)直接作為空白孔。為保證實驗結(jié)果有效性,每次實驗請使用新的標準品溶液。
3. 濃洗滌液:用580mL蒸餾水或去離子水將20mL濃洗滌液稀釋至600mL,進行30倍稀釋。
樣本實驗前準備:
ELISA試劑盒液體樣本:包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細胞培養(yǎng)上清等。
(1)血清
室溫血液自然凝固10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(2)血漿:
應(yīng)根據(jù)標本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(3)尿液:
用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實行。
(4)細胞培養(yǎng)上清:
檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。
(5)培養(yǎng)細胞
檢測細胞內(nèi)的成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細胞懸液,細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融或加入組織蛋白萃取試劑,以使細胞破壞并放出細胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(6)組織標本
切割標本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。標本融化后仍然保?-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標本勻漿化。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。
注意事項:
1. 試劑盒應(yīng)在有效期內(nèi)使用,請不要使用過期的試劑。
2. 試劑盒未使用時應(yīng)保存在 2-8℃冰箱,已復(fù)溶但未用完的標準品,請丟棄。
3. 試劑盒使用前請在室溫恢復(fù) 30 min,且充分混勻試劑盒里的各種成份及制備的樣品。
4. 在試驗中標準品和樣本建議作復(fù)孔檢測,且加入試劑的順序應(yīng)保持一致。
5. 為避免交叉污染,請在試驗中使用 1 次性試管,槍頭,封板膜及潔凈塑料容器。
6. 濃縮生物素化抗體和濃縮酶結(jié)合物的體積較少,在運輸過程中微量液體會沾到管壁及瓶蓋上,使用前請離心處理(5-10 S 即可),使管壁上的液體集中在管底部,取用時,請用移液器小心吹打幾次。
7. 除了試劑盒中的濃縮洗滌液和終止液可以通用外,請不要使用其他來源試劑盒內(nèi)含的試劑代替本試劑盒中的某單個組分。
8. 為保證結(jié)果準確,每次檢測均需做標準曲線。
小鼠小梁網(wǎng)細胞完全培養(yǎng)基少根根霉 Rhizopus arrhizus
臍動脈平滑肌細胞
桿屬 Lactobacillus sp.MDBK(牛腎細胞)
小鼠成骨細胞完全培養(yǎng)基100mL
大鼠心肌成纖維細胞完全培養(yǎng)基100mL
CCL-149(大鼠肺泡上皮細胞)小鼠骨髓間充質(zhì)干細胞(EGFP標記)
胰酪胨大豆瓊脂/胰酶大豆瓊脂/胰蛋白胨大豆瓊脂/TSA用于藥品、生物制品的無試驗250克國產(chǎn)/進口
蘇云金芽孢桿 Bacillus thuringiensisHela 299(宮頸細胞)
QGY-7703(肝細胞)5×106cells/瓶×2
斯氏假單胞 Pseudomonas stutzeri小鼠外周血白細胞完全培養(yǎng)基
氫卵磷脂(大豆)/大豆氫卵磷脂/氫大豆卵磷脂/HSPCBR,PC=95%1公斤國產(chǎn)/進口Arachidonic Acid-d8 (10 mg)5Z,8Z,11Z,14Z-eicosatetraenoic-5,6,8,9,11,12,14,15-d8 acid; AA-d8; Arachidonic Acid-d8
SGC0946 (10 mg)5-
2-thio-PAF (25 mg)1-O-hexadecyl-2-deoxy-2-thio-S-acetyl-sn-glyceryl-3-phosphorylcholine; 2-thio-PAF
JWH 073 N-butanoic acid metabolite-d5 (100 ug)4-(3-(1-naphthoyl)-1H-indol-1-yl)-2,4,5,6,7-d5-butanoic acid; JWH 073 N-butanoic acid metabolite-d5
小鼠胚胎成纖維細胞NIH/3T3 核提取物NIH/3T3 Nuclear Extract (1000 ug)
MPO Resorufin Standard (1 ea)MPO Resorufin Standard
Ophiobolin A (1 mg)Cochliobolin|NSC 114340; (2’S,3’S,3aR,5’R,6aS,9R,9aS,10aR)-1,3a,4,4’,5’,6a,7,8,9,9a,10,10a-dodecahydro-9-hydroxy-3’,9,10a-trimethyl-5’-spiro[dicyclopenta[a,d]cyclooctene-3(2H),2’(3’H)-furan]-6-carboxaldehyde
Sulfosuccinimidyl-2-(biotinamido)-ethyl-1,3’-dithiopropionate; Biotin disulfide N-Hydroxysulfosuccinimide esterSulfo-NHS-SS-Biotin
JWH 073 2’-naphthyl-N-(1,1-dimethylethyl) isomer (10 mg)(1-(tert-butyl)-1H-indol-3-yl)(naphthalen-2-yl)methanone; JWH 073 2’-naphthyl-N-(1,1-dimethylethyl) isomer
6-Formylpterin (5 mg)2-amino-3,4-dihydro-4-oxo-6-pteridinecarboxaldehyde; 2-Amino-6-formylpteridin-4-one|Pterin-6-aldehyde; 6-Formylpterin
(±)18-HEPE (50 ug)(±)-18-hydroxy-5Z,8Z,11Z,14Z,16E-eicosapentaenoic acid; (±)18-HEPE
Linoleoyl Ethanolamide-d4 (5 mg)N-(2-hydroxyethyl-1,1,2,2-d4)-9Z,12Z-octadecadienamide; Linoleoyl Ethanolamide-d4
小鼠肝配蛋白B2(EFNB2)ELISA試劑盒綠僵 Metarhizium sp.U266B1 [U266], 多發(fā)性骨髓瘤細胞
大鼠巨噬細胞集落激因子(M-CSF)ELISA試劑盒英文名稱:Rat Macrophage Colony-Stimulating Factor,M-CSF ELISA Kit 規(guī)格:96T/48T小鼠N-乙?;?絲氨酰-天門冬酰-賴氨酰-脯氨酸
肝內(nèi)膽管上皮細胞完全培養(yǎng)基釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae
大鼠FMS樣酪氨酸激酶3配體(Flt3L)ELISA試劑盒英文名稱:Rat FMS-like tyrosine kinase 3 ligand,Flt-3L ELISA Kit規(guī)格:96T/48T小鼠表面膜球蛋白A(mIgA)ELISA Kit,48T/96T
SP2/0, 小鼠骨髓瘤細胞香菇 Lentinula edodes
大鼠睪酮(T)ELISA試劑盒英文名稱:Rat Testoterone,T ELISA Kit規(guī)格:96T/48T不對稱二甲基精氨酸(ADMA)ELISA Kit,48T/96T
鼠李糖桿 Lactobacillus rhamsusCa Ski, 宮頸細胞
大鼠腦源性神經(jīng)營養(yǎng)因子(BDNF)ELISA試劑盒英文名稱:Rat Brain derived neurotrophic facor,BDNF ELISA Kit規(guī)格:96T/48T可溶性凋亡相關(guān)因子配體(sFASL)ELISA Kit,48T/96T
蘇云金芽孢桿 Bacillus thuringiensis釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae
豬松弛肽/松弛素(RLN)ELISA試劑盒英文名稱:Porcine Relaxin,RLN ELISA Kit規(guī)格:96T/48T生長結(jié)合蛋白(GHBP)ELISA Kit,48T/96T
SK-NEP-1(腎母細胞瘤細胞)紫色鏈霉 Streptomyces violaceus
豬可溶性P選擇素(sP-Selectin)ELISA試劑盒英文名稱:Porcine soluble P-selectin,sP-Selectin ELISA Kit規(guī)格:96T/48T血小板相關(guān)抗體IgM(PA-IgM)ELISA Kit,48T/96T
操作流程:
(1)待測樣品孔中每孔加入待測樣品100μl,每種樣品設(shè)3個平行孔;設(shè)兩個陰性對照孔,每孔加未處理組的細胞裂解液100μl;另設(shè)一個空白對照孔,加入純細胞裂解液100μl。
(2)酶標板置4℃,包被過夜。
(3)洗板:吸干孔內(nèi)反應(yīng)液,用洗滌液過洗一遍(將洗滌液注滿板孔后,即甩去),之后將洗滌液注滿板孔,浸泡1-2分鐘,間歇搖動。甩去孔內(nèi)液體后在吸水紙上拍干。重復(fù)洗滌3-4次。
(4)陰性對照孔每孔加入PBS 50μl,樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。
(5)酶標板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。
(6)洗板,同(4)。
(7)每孔加1:5000稀釋的HRP-標記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。
(8)酶標板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。
(9)洗板,同(4)。
(10)每孔加TMB顯色液 100μl,輕輕混勻10s,置37℃暗處反應(yīng)15-20min。
(11)每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應(yīng)。
(12)分別測450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2,終測得的OD值為兩者之差(W1-W2),以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
(13)數(shù)據(jù)處理:在得出標本(S)和陰性對照(N)的 OD值后,計算S/N值。S/N≥2.1為陽性判定標準。