ELISA檢測(cè)概述
      ELISA酶聯(lián)試劑盒是以學(xué)反應(yīng)為基礎(chǔ)，將抗原、抗體的特異性反應(yīng)與酶對(duì)底物的高效催化作用相結(jié)合起來的一種敏感性很高的實(shí)驗(yàn)技術(shù)。 由于抗原、抗體的反應(yīng)在一種固相載體-聚苯乙烯微量滴定板的孔中進(jìn)行，每加入一種試劑孵育后，可通過洗滌除去多余的游離反應(yīng)物，從而保證試驗(yàn)結(jié)果的特異性與穩(wěn)定性。

產(chǎn)品名稱：小鼠Ⅰ型前膠原氨基端原肽(PⅠNP)ELISA試劑盒步驟
英文名稱：Mouse Procollagen I N-Terminal Propeptide(PINP)ELISA Kit
貨號(hào)：PM105861
規(guī)格：96T/48T 
保存；2-8℃。
檢測(cè)目的：用于檢測(cè)血漿，血清及相關(guān)液體等樣本。例如灌洗液、腦脊液、血清、血漿、尿液、胸腹水、細(xì)胞培養(yǎng)上清、組織勻漿等標(biāo)本.
檢測(cè)種屬：大鼠、小鼠、豚鼠、倉鼠、裸鼠、兔子、豬、犬、猴、馬、牛、馬鈴薯、鹿、羊、雞、鴨、魚、人、等動(dòng)植物。
實(shí)驗(yàn)流程:
1. 實(shí)驗(yàn)前標(biāo)準(zhǔn)品、試劑及樣本的準(zhǔn)備；
2. 加樣（標(biāo)準(zhǔn)品及樣本）100μL，37°C孵育1小時(shí)；
3. 吸棄，加檢測(cè)溶液A100μL，37°C孵育1小時(shí)；
4. 洗板3次；
5. 加檢測(cè)溶液B100μL，37°C孵育30分鐘；
6. 洗板5次；
7. 加TMB底物90μL，37°C孵育10-20分鐘；
8. 加終止液50μL，立即450nm讀數(shù)。

注意事項(xiàng)：
1加樣：
①實(shí)驗(yàn)樣本過多時(shí)，可分批次操作，以減少實(shí)驗(yàn)時(shí)間延長(zhǎng)造成的誤差；
②加酶試劑后，用吸水紙吸干孔外試劑；
③作定量試驗(yàn)時(shí)，使用加樣器加注試劑，并經(jīng)常校正其準(zhǔn)確性，此外，要做到一份樣本一個(gè)移液頭，防止交叉污染。
2.溫育：
①如有兩種溫度，盡量使用較低的溫育溫度、較長(zhǎng)反應(yīng)時(shí)間的條件；
②用1個(gè)小溫度計(jì)放置在板孔反應(yīng)液中測(cè)量觀察；
③96孔板周圍孔與中心孔在溫育中的熱力學(xué)梯度會(huì)造成“邊緣效應(yīng)”，因此盡量采用水浴；
3.洗板：
①手工洗板時(shí)，拍板時(shí)要垂直，避免交叉污染，用力不能過猛，防止抗原抗體復(fù)合物脫離；
②洗板機(jī)洗板時(shí)應(yīng)經(jīng)常檢查沖洗頭是否通暢，若被雜物堵塞時(shí)可用注射器針頭挑出；
③為了洗滌效果好，實(shí)驗(yàn)室可采用機(jī)器與人工洗滌相結(jié)合的方法，在機(jī)器洗滌后再進(jìn)行人工洗板1-2次，或適當(dāng)增加洗板的次數(shù)；
4.顯色：
ELISA試劑盒中，如以四甲基聯(lián)苯胺(TMB)為底物，則提供的底物為A和B兩瓶應(yīng)用液；如以鄰苯二胺(OPD)為底物，則試劑盒提供鄰苯二胺片劑或粉劑。顯色反應(yīng)條件為37℃或室溫反應(yīng)15-30 min。以鄰苯二胺(OPD)為底物的試劑，要臨用前30 min配制且必須避光。以四甲基聯(lián)苯胺(TMB)為底物的試劑則不需避光，但A、B液應(yīng)盡量避免接觸金屬器械。
5.判定：
讀取結(jié)果要在15-30 min內(nèi)完成，定性測(cè)定用肉眼判讀試驗(yàn)結(jié)果時(shí)，反應(yīng)板應(yīng)水平距離白色背景10-15 cm；定量測(cè)定時(shí)用酶標(biāo)儀讀取結(jié)果，酶標(biāo)儀不應(yīng)置于陽光或強(qiáng)光照射下，需先預(yù)熱15-30 min再進(jìn)行測(cè)試。

綠膿素測(cè)定用培養(yǎng)基/PDP瓊脂/King Medium A綠膿色素測(cè)定250克國產(chǎn)/進(jìn)口

大鼠心肌細(xì)胞完全培養(yǎng)基MDA-MB-415(腺細(xì)胞)

A7r5(大鼠胸大動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

睫狀神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子(CNTF)重組蛋白英文名稱：Recombinant Ciliary Neurotrophic Factor (CNTF)

MA, 小鼠星形膠質(zhì)細(xì)胞

Rustigian氏尿素培養(yǎng)液/ Rustigian氏尿素肉湯/Rustigian Urea Broth細(xì)尿素酶試驗(yàn)100克國產(chǎn)/進(jìn)口

丹參酮IIAU-2 OS, 骨肉瘤細(xì)胞

基質(zhì)金屬蛋白酶15(MMP15)重組蛋白英文名稱：Recombinant Matrix Metalloproteinase 15 (MMP15)

淡紫擬青霉 Paecilomyces lilacinus弗吉尼亞鏈霉 Streptomyces virginiae

7.5% NaHCO3溶液規(guī)格：100ml

HE瓊脂/Hektoen瓊脂培養(yǎng)基/腸道病培養(yǎng)用瓊脂/Hektoen Enteric Agar用于沙門氏屬和志賀屬的分離培養(yǎng)250克國產(chǎn)/進(jìn)口

小鼠Ⅰ型前膠原氨基端原肽(PⅠNP)ELISA試劑盒步驟2 ug pHY43 pHY43 低溫運(yùn)輸，-20℃保存人 S100A8 基因全長(zhǎng)ORF克隆

2 ug pIC111 pIC111 低溫運(yùn)輸，-20℃保存人 S100A16 基因全長(zhǎng)ORF克隆

2 ug pIEXBac-1 pIEXBac-1 低溫運(yùn)輸，-20℃保存人 S100A3 基因全長(zhǎng)ORF克隆

2 ug pIE1-neo pIE1-neo 低溫運(yùn)輸，-20℃保存人 LGALS12 轉(zhuǎn)錄變體2 基因全長(zhǎng)ORF克隆

2 ug pIEXBac-c-EGFP-1 pIEXBac-c-EGFP-1 低溫運(yùn)輸，-20℃保存人 FGF13 基因全長(zhǎng)ORF克隆

2 ug pIEXBac-c-EGFP-2 pIEXBac-c-EGFP-2 低溫運(yùn)輸，-20℃保存人 PTAFR 基因全長(zhǎng)ORF克隆

2 ug pIEXBac-c-EGFP-3 pIEXBac-c-EGFP-3 低溫運(yùn)輸，-20℃保存人 AGPAT6 基因全長(zhǎng)ORF克隆

2 ug pIEXBac-c-EGFP-4 pIEXBac-c-EGFP-4 低溫運(yùn)輸，-20℃保存人 UBE3A 轉(zhuǎn)錄變體1 基因全長(zhǎng)ORF克隆

2 ug PiggyBac 3’LTR PiggyBac 3’LTR 低溫運(yùn)輸，-20℃保存人源CES3 基因cDNA克隆

2 ug PiggyBac 5’LTR PiggyBac 5’LTR 低溫運(yùn)輸，-20℃保存人 GALNT14 基因全長(zhǎng)ORF克隆

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