相對(duì)定量分析方法  ：
2-ΔΔCt
前提：目標(biāo)序列和內(nèi)參序列的擴(kuò)增效率接近100％且偏差在5％以內(nèi)
 1、用內(nèi)參基因的CT值歸一目標(biāo)基因的CT值：
   ΔCT（test）= CT（target,test）-CT（ref,test） 
   ΔCT（calibrator）= CT（target,calibrator）-CT（ref, calibrator） 
 2、用校準(zhǔn)樣本的ΔCT值歸一試驗(yàn)樣本的ΔCT值：
        ΔΔCT= ΔCT（test） - ΔCT（calibrator）
 3、計(jì)算表達(dá)水平比率：
                   2 –ΔΔCT=表達(dá)量的比值

參數(shù)規(guī)格：

產(chǎn)品名稱：PCR檢測(cè)試劑盒
貨號(hào)：BH-205601

使用方法:

一、稀釋 PCR 陽性對(duì)照（以 10E2-10E7 拷貝/μL 這 6 個(gè) 10 倍稀釋度為例）
1. 注意：由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高，因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行，千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分）。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散傳染性病原，本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽性對(duì)照，只提供可以直接使用的 DNA 段作為陽性對(duì)照。
2. 標(biāo)記 6 個(gè)離心管，分別為 7，6，5，4，3，2。
3. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 模板稀釋液（用帶芯槍頭，下同）。
4. 在 7 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的陽性對(duì)照，充分震蕩 1 分鐘，得1×10E7 拷貝/μL 的陽性對(duì)照。放冰上待用。
5. 換槍頭，在 6 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對(duì)照(上步稀釋所得)，充分震蕩 1 分鐘，得 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對(duì)照。放冰上待用。
6. 換槍頭，在 5 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對(duì)照到 5 號(hào)管中，充分震蕩 1 分鐘，得 1×10E5 拷貝/μL 的陽性對(duì)照。放冰上待用。
7. 重復(fù)上面的操作直到得到 6 個(gè)稀釋度的陽性對(duì)照。放冰上待用。

具有下列特點(diǎn)：
1.根據(jù) 指標(biāo)的保守序列設(shè)計(jì)的專一性引物，與相關(guān)病毒無交叉反應(yīng)。
2.靈敏度比常規(guī) PCR 高 2-3 個(gè)數(shù)量級(jí)，可以達(dá)到幾百拷貝/反應(yīng)。
3.即開即用，用戶只需要提供樣品模板，操作簡(jiǎn)單，定量準(zhǔn)確快速。
4.一管式熒光定量 PCR 檢測(cè)，避免后續(xù)污染。
5.本試劑盒足夠 50 次 20μL 反應(yīng)體系的熒光定量 PCR。
6.本產(chǎn)品只適用于科研，不能用于臨床診斷。
需要自備的器材：
1．儀器：分析天平、離心機(jī)、熒光 PCR 擴(kuò)增儀、組織研磨器、-20 ℃冰箱、可調(diào)移液器（2 μL、20
μL、200 μL、1000 μL）。
2．耗材：熒光 PCR 反應(yīng)管、眼科剪、眼科鑷、生理鹽水、1.5 mL 經(jīng)焦碳酸二乙酯（DEPC）水
處理的**離心管、吸頭（10 μL、200 μL、1000 μL）、**雙蒸水。

"30次 一站式乙酸-尿素PAGE電泳套裝  
250mL Tricine-SDS-PAGE配膠液 Tricine-SDS-PAGE Gel Buffer  常溫保存
1000mL Tricine-SDS-PAGE配膠液 Tricine-SDS-PAGE Gel Buffer  常溫保存
5mL Tricine-SDS-PAGE上樣液 Tricine-SDS-PAGE Loading Buffer -20℃保存
1mL Tricine-SDS-PAGE上樣液 Tricine-SDS-PAGE Loading Buffer -20℃保存
10L Tricine-SDS-PAGE陽極電泳液（干粉） Tricine-SDS-PAGE Cathod Buffer 常溫保存
50L Tricine-SDS-PAGE陽極電泳液（干粉） Tricine-SDS-PAGE Cathod Buffer 常溫保存
10L Tricine-SDS-PAGE陰極電泳液（干粉） Tricine SDS-PAGE Anode Buffer 常溫保存
50L Tricine-SDS-PAGE陰極電泳液（干粉） Tricine SDS-PAGE Anode Buffer 常溫保存
30次 一站式蛋白質(zhì)非變性PAGE套裝（高pH 緩沖液套） One-Stop Protein Native PAGE Pack 常溫保存（上樣液需要-20℃保存）
30次 一站式蛋白質(zhì)非變性PAGE套裝（中pH 緩沖液套） One-Stop Protein Native PAGE Pack 常溫保存（上樣液需要-20℃保存）
30次 一站式蛋白質(zhì)非變性PAGE套裝（低pH 緩沖液套） One-Stop Protein Native PAGE Pack 常溫保存（上樣液需要-20℃保存）
PCR檢測(cè)試劑盒30次 高pH 緩沖液套裝 High pH Buffer Set 常溫保存（5×高pH上樣液需要-20℃保存）
人 MTF1 基因全長ORF克隆
人 EFHC2 基因全長ORF克隆
人 ACSBG1 基因全長ORF克隆
人 CNKSR1 基因全長ORF克隆
人 PLS3 基因全長ORF克隆
人 DYNC1I1 基因全長ORF克隆
人 ACOX3 基因全長ORF克隆
人 MTM1 基因全長ORF克隆
人 TKTL1 基因全長ORF克隆
人 ENTPD4 基因全長ORF克隆
人 SMEK1 基因全長ORF克隆"

注意事項(xiàng)：
1. 建議使用新鮮采取的動(dòng)物組織，若為長期冷凍組織，應(yīng)盡量避免反復(fù)凍融，否則會(huì)導(dǎo)致模板的降解，影響PCR效率。
2. 試劑Buffer AL若低溫保存，易產(chǎn)生沉淀。在使用前務(wù)必將其在室溫中放置一段時(shí)間，也可在37℃水浴中預(yù)熱10 min，以溶解沉淀，混勻后再使用。
3. 電泳檢測(cè)時(shí)，切勿使用含有SDS的Loading Buffer。否則，電泳時(shí)會(huì)在泳道中出現(xiàn)一大團(tuán)拖尾亮帶，影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。
4. 建議擴(kuò)增片段長度1 kb以內(nèi)，以便擴(kuò)增效率佳。
?5. 為了您的**和健康，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并佩戴一次性手套操作