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需自備的儀器和用品:
高效液相色譜儀、示差折光檢測器、低速離心機(jī)、溶劑抽濾裝置、超聲波清洗器、針頭式過濾器(水系,50個,0.22μm)、濾膜(水系1個,0.45μm)、
鈣柱(Carbomix Ca-NP10,7.8 ×300 mm)、可調(diào)式移液器、樣品瓶(50個,2mL)、超純水。
產(chǎn)品名稱 |
規(guī)格 |
貨號 |
TRIzol總RNA提取試劑 |
100ml |
BH-01S3720 |
優(yōu)點如下:
1、快速簡便:操作時間短,48-50T,可測40例樣本左右,96-100T,可測80例樣本左右;
2、取樣量微:常規(guī)操作取樣量50l, 酶標(biāo)儀操作僅需5l即可檢測,部分試劑盒取樣多少請;
3、穩(wěn)定性好:試劑盒2~8℃存放3個月有效;
4、再現(xiàn)性好:20倍稀釋線性仍然良好;
5、回收試驗: X =99%;
6、受外界影響因素小:干擾因素少,重復(fù)性強(qiáng);
7、測試面廣:可測動物血清(漿)、組織、各種體液、灌流液、各種培養(yǎng)細(xì)胞以及細(xì)胞培養(yǎng)上清液等,部分試劑盒適用于檢測植物。
測定步驟:
1.加樣
1. 除包被外都需45度加樣
2.加樣體積要準(zhǔn)確
3.管底加樣,不能加在管壁上
4.加樣時不能產(chǎn)生氣泡
2.溫浴
1.加標(biāo)本后和加結(jié)合物后,應(yīng)立即放入按規(guī)定的反應(yīng)溫 度的水浴箱。
2.各ELISA板不應(yīng)疊在一起。
3.為避免蒸發(fā),板上應(yīng)加蓋,或?qū)迤椒旁诘撞繅|有濕 紗布的金屬濕盒中。
4.加入底物后,反應(yīng)的時間和溫度通常不做嚴(yán)格要求。 如室溫高于20℃,ELISA板可避光放在實驗臺上,以便 不時觀察,待對照管顯色適當(dāng)時,即可終止酶反應(yīng)。
3.洗滌
1.洗滌在ELISA過程中不是反應(yīng)步驟,但卻 是決定實驗成敗的關(guān)鍵。
2.目的是洗去反應(yīng)液中沒有與固相抗原或 抗體結(jié)合的物質(zhì)以及在反應(yīng)過程中非特 異性吸附于固相載體的干擾物質(zhì)。
4.讀板
1.陰性對照顏色極淺,在定性測定中一般 可采用目視比色。
2.如用酶標(biāo)儀測定結(jié)果,準(zhǔn)確性決定于 ELISA板底的平整與透明度、酶標(biāo)儀的質(zhì) 量和軟件的算法。
優(yōu)點如下:
1、快速簡便:全程約50分鐘,可測100例左右樣本。
2、取樣量微:本法取手指或耳垂等末梢血20ul~50ul即可測紅細(xì)胞中的SOD,只需2ml靜脈血可測白細(xì)胞中的SOD及血小板中SOD,只需50mg左右組織就可測組織勻漿、胞漿中的SOD,0.2g組織可測線粒體及微粒體中的SOD。
3、靈敏度高:IC50=0.05g/ml,是鄰苯三酚法的18倍。
4、穩(wěn)定性好:試劑盒2~8℃存放6個月有效。
5、再現(xiàn)性好:變異系數(shù)CV=1.7%。
6、回收試驗: X =103.3%。
7、受外界影響因素小:干擾因素少,重復(fù)性強(qiáng)。
8、測試面廣:可測動物血液、組織、各種體液、灌流液等、各種培養(yǎng)細(xì)胞、植物組織、各種水產(chǎn)以及化妝品、保健品等,效果均佳。
人載脂蛋白B100(apo-B100)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒 MOLT-4全細(xì)胞裂解液100μg100μggersion
小鼠骨成型蛋白受體Ⅱ(BMPR-Ⅱ)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒 Molt-4/急性淋母細(xì)胞白血病細(xì)胞株國產(chǎn)gersion
豬白介素1β (IL-1β)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒 MGC803全細(xì)胞裂解液100ug100uggersion
大鼠尿苷磷酸葡萄糖醛酸轉(zhuǎn)移酶2(UGT2) ELISA試劑盒96T/48T96T/48T MDA231全細(xì)胞裂解液100ug100uggersion
犬C肽(C-Peptide)ELISA試劑盒96T/48T試劑盒 MDA231/乳腺癌細(xì)胞株國產(chǎn)gersion
人復(fù)合前列腺特異性抗原(CPSA)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒 MCF全細(xì)胞裂解液100μg100μggersion
人凝血因子Ⅱ(FⅡ)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒 MCF7/乳腺癌細(xì)胞株國產(chǎn)gersion
人轉(zhuǎn)錄因子抗體-1(ATF-1)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒 Mammalian Protein Extraction Reagent/哺乳動物蛋白抽提試劑25次、100次國產(chǎn)gersion
小鼠甲狀腺素抗體(TAb)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒 Mammalian Protein Extraction Kit/哺乳動物蛋白抽提試劑盒25次、100次國產(chǎn)gersion
大鼠神經(jīng)營養(yǎng)因子4(NT-4)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒 Lane Marker Loading Buffer(5x)/蛋白示蹤上樣緩沖液(還原,5x)5ml5mlgersion
豬內(nèi)皮型一氧化氮合酶(eNOS)ELISA試劑盒96T/48T試劑盒 Lysozyme Antibody/溶菌酶100mg國產(chǎn)gersion
TRIzol總RNA提取試劑動物 /組織線粒體超氧化物歧化酶(Mn/Fe SOD)分離試劑盒 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:50次
植物組織線粒體超氧化物歧化酶(Mn/Fe SOD)分離試劑盒 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:50次
超氧化物歧化酶(SOD)活性檢測試劑盒(附標(biāo)準(zhǔn)樣) 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:50次
超氧化物歧化酶(SOD)標(biāo)準(zhǔn)曲線測定試劑盒 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:5次
內(nèi)氧化應(yīng)激活性氧(ROS)高質(zhì)綠色熒光測定試劑盒 進(jìn)口/國產(chǎn) 規(guī)格:20次
人巨噬集落激因子(M-CSF)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒 A549/肺癌株國產(chǎn)
人天門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(AST)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒 A549全裂解液100μg100μg
兔子間粘附分子3(ICAM-3/CD50)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒 A673(橫紋肌瘤)5×106cells/瓶×2
小鼠髓過氧化物酶(MPO)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒 A7r5(大鼠胸大動脈平滑肌)5×106cells/瓶×2
大鼠白血病抑制因子受體(LIFR)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒 A875(黑色素瘤)5×106cells/瓶×2
大鼠主要組織相容性復(fù)合體Ⅱ類(MHCⅡ/AgBⅡ/H-1Ⅱ)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒 A875/黑色素瘤株國產(chǎn)
人阿米(Amebiasis)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒 A9(小鼠皮下結(jié)締組織)5×106cells/瓶×2
人抗核仁纖維蛋白抗體(AFA/snoRNP/U3RNP)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒 AAV-293(胚腎)5×106cells/瓶×2
人角蛋白19(CK-19)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒 Acc-2(涎腺腺樣囊性癌)5×106cells/瓶×2
小鼠纖維蛋白肽B(FPB)ELISA試劑盒96T/48T試劑盒 ACHN, 腎腺癌
小鼠16α羥基雌酮1(16-α OHE-1)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒 ACHN(腎癌)5×106cells/瓶×2
注意事項:
①加入試劑的順序應(yīng)一致,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照說明書中標(biāo)明的時間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。
④底物A應(yīng)揮發(fā),避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實驗完成后應(yīng)立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標(biāo)板時應(yīng)充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時,避免使用帶金屬部分的加樣器 。
⑦實驗中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。
⑧試劑應(yīng)按標(biāo)簽說明書儲存,使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄,不可保存。
⑨不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。