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注意事項:
①加入試劑的順序應(yīng)一致,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。
④底物A應(yīng)揮發(fā),避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實驗完成后應(yīng)立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標板時應(yīng)充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標反應(yīng)孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時,避免使用帶金屬部分的加樣器 。
⑦實驗中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。
⑧試劑應(yīng)按標簽說明書儲存,使用前恢復到室溫。稀稀過后的標準品應(yīng)丟棄,不可保存。
⑨不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。
需自備的儀器和用品:
高效液相色譜儀、示差折光檢測器、低速離心機、溶劑抽濾裝置、超聲波清洗器、針頭式過濾器(水系,50個,0.22μm)、濾膜(水系1個,0.45μm)、
鈣柱(Carbomix Ca-NP10,7.8 ×300 mm)、可調(diào)式移液器、樣品瓶(50個,2mL)、超純水。
產(chǎn)品名稱 |
規(guī)格 |
貨號 |
丙酮酸激酶 EC2.7.1.40 |
10KU/瓶 |
BH-01S3816 |
優(yōu)點如下:
1、快速簡便:操作時間短,48-50T,可測40例樣本左右,96-100T,可測80例樣本左右;
2、取樣量微:常規(guī)操作取樣量50l, 酶標儀操作僅需5l即可檢測,部分試劑盒取樣多少請;
3、穩(wěn)定性好:試劑盒2~8℃存放3個月有效;
4、再現(xiàn)性好:20倍稀釋線性仍然良好;
5、回收試驗: X =99%;
6、受外界影響因素?。焊蓴_因素少,重復性強;
7、測試面廣:可測動物血清(漿)、組織、各種體液、灌流液、各種培養(yǎng)細胞以及細胞培養(yǎng)上清液等,部分試劑盒適用于檢測植物。
測定步驟:
1.加樣
1. 除包被外都需45度加樣
2.加樣體積要準確
3.管底加樣,不能加在管壁上
4.加樣時不能產(chǎn)生氣泡
2.溫浴
1.加標本后和加結(jié)合物后,應(yīng)立即放入按規(guī)定的反應(yīng)溫 度的水浴箱。
2.各ELISA板不應(yīng)疊在一起。
3.為避免蒸發(fā),板上應(yīng)加蓋,或?qū)迤椒旁诘撞繅|有濕 紗布的金屬濕盒中。
4.加入底物后,反應(yīng)的時間和溫度通常不做嚴格要求。 如室溫高于20℃,ELISA板可避光放在實驗臺上,以便 不時觀察,待對照管顯色適當時,即可終止酶反應(yīng)。
3.洗滌
1.洗滌在ELISA過程中不是反應(yīng)步驟,但卻 是決定實驗成敗的關(guān)鍵。
2.目的是洗去反應(yīng)液中沒有與固相抗原或 抗體結(jié)合的物質(zhì)以及在反應(yīng)過程中非特 異性吸附于固相載體的干擾物質(zhì)。
4.讀板
1.陰性對照顏色極淺,在定性測定中一般 可采用目視比色。
2.如用酶標儀測定結(jié)果,準確性決定于 ELISA板底的平整與透明度、酶標儀的質(zhì) 量和軟件的算法。
優(yōu)點如下:
1、快速簡便:全程約50分鐘,可測100例左右樣本。
2、取樣量微:本法取手指或耳垂等末梢血20ul~50ul即可測紅細胞中的SOD,只需2ml靜脈血可測白細胞中的SOD及血小板中SOD,只需50mg左右組織就可測組織勻漿、胞漿中的SOD,0.2g組織可測線粒體及微粒體中的SOD。
3、靈敏度高:IC50=0.05g/ml,是鄰苯三酚法的18倍。
4、穩(wěn)定性好:試劑盒2~8℃存放6個月有效。
5、再現(xiàn)性好:變異系數(shù)CV=1.7%。
6、回收試驗: X =103.3%。
7、受外界影響因素小:干擾因素少,重復性強。
8、測試面廣:可測動物血液、組織、各種體液、灌流液等、各種培養(yǎng)細胞、植物組織、各種水產(chǎn)以及化妝品、保健品等,效果均佳。
犬血管內(nèi)皮細胞生長因子(VEGF)ELISA試劑盒96T/48T試劑盒 Poly-L-Lysine Solutiona(5mg/ml)規(guī)格:1ml
人高密度脂蛋白(HDL)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒 胰酶細胞消化液(含酚紅)規(guī)格:100ml
人前列腺素F(PGF)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒 鏈霉素-青霉素(100X)規(guī)格:100ml
山羊膽囊收縮素8(CCK-8)ELISA試劑盒96T/48T試劑盒 Hanks’ Balanced Salt Solution規(guī)格:500ml
小鼠抗IVIgG抗體ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒 Hanks’ Balanced Salt Solution (with Ca2+& Mg2+)規(guī)格:500ml
豬心肌肌鈣蛋白Ⅰ(cTn-Ⅰ)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒 蘇木素伊紅(HE)染色試劑盒規(guī)格:>200次
大鼠糖蛋白130(gp130)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒 尼氏(Nissl)染色液規(guī)格:100ml
人2,3-磷酸甘油酸(2,3-DPG)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒 結(jié)晶紫染色液規(guī)格:100ml
人黑色素瘤相關(guān)抗原(MAGE)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒 中性紅染色液規(guī)格:100ml
兔細胞間粘附分子1(ICAM-1)ELISA試劑盒96T/48T試劑盒 馬松(Masson)三色法染色試劑盒規(guī)格:500ml
人殺傷細胞**球蛋白樣受體(KIR)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒 中性紅染色液(活細胞染色用)規(guī)格:100ml
丙酮酸激酶 EC2.7.1.40CDK6蛋白表達熒光定量檢測試劑盒 進口/國產(chǎn) 規(guī)格:10/50 次
CDK6蛋白表達西方雜交分析試劑盒 進口/國產(chǎn) 規(guī)格:5次
CDK6蛋白**共沉淀分析試劑盒 進口/國產(chǎn) 規(guī)格:5次
CDK6蛋白表達ELISA定量檢測試劑盒 進口/國產(chǎn) 規(guī)格:25次
P16蛋白表達流式 儀檢測試劑盒 進口/國產(chǎn) 規(guī)格:10/20次
人乙型肝炎病毒X抗原(HBxAg)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒 非小肺癌英文名稱:NCI-H1650
小鼠核因子κB受體活化因子配基(RANKL)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒 非小肺癌英文名稱:NCI-H358
豬肉毒堿脂酰轉(zhuǎn)移酶(CACT)ELISA試劑盒96T/48T試劑盒 非小肺腺癌英文名稱:NCI-H157
大鼠嗜酸粒趨化蛋白Eotaxin 1(Eotaxin 1/CCL11)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒 肺癌英文名稱:NCI-H460
人B受體(BCR)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒 肺癌英文名稱:H125
人降鈣素原(PCT)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒 肺癌英文名稱:Calu-1
人維生素D3(VD3)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒 肺癌(淋結(jié)轉(zhuǎn)移)英文名稱:NCI-H292
小鼠CD8分子(CD8)ELISA試劑盒96T/48T試劑盒 肺癌紫杉醇耐藥株英文名稱:A549/ Taxol
小鼠乙酰膽堿轉(zhuǎn)移酶(CHAT)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒 肺成纖維英文名稱:HFL1
綿羊白介素1(IL-1)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒 肺大動脈內(nèi)皮完全培養(yǎng)基100mL
大鼠活性氧簇(ROS)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒 肺成纖維完全培養(yǎng)基100mL