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常見(jiàn)樣本處理方法:
1、血清(漿)樣品:直接檢測(cè)。
2、細(xì)胞或組織樣品的制備:培養(yǎng)細(xì)胞:先收集細(xì)胞到離心管內(nèi),離心后棄上清;按照細(xì)胞數(shù)量
(104個(gè)):提取液體積(mL)為500~1000:1 的比例(建議 500萬(wàn)細(xì)胞加入 1mL提取液) ,超聲波破碎細(xì)胞(冰浴,功率20%或200W,超聲 3s,間隔10s,重復(fù)30 次)8000g 4℃離心 10min,取上清,置冰上待測(cè)。
組織:按照組織質(zhì)量(g) :提取液體積(mL)為 1:5~10 的比例(建議稱(chēng)取約 0.1g組織,
加入 1mL提取液),進(jìn)行冰浴勻漿。8000g 4℃離心10min,取上清,置冰上待測(cè)。
特點(diǎn):
1、優(yōu)化設(shè)計(jì)的實(shí)驗(yàn)方案,1小時(shí)即可完成
2、靈敏度高,操作便捷
3、試劑盒提供檢測(cè)果糖所需的全套試劑
產(chǎn)品名稱(chēng) |
RPMI 1640培養(yǎng)基 |
規(guī)格 |
500ml |
貨號(hào) |
BH-01S3853 |
實(shí)驗(yàn)通用規(guī)則:
1、將液體加到酶標(biāo)孔中時(shí),避免槍頭和孔內(nèi)液體接觸,可使槍頭上的液滴和孔壁接觸,液滴會(huì)自然流下去。
2、用槍吸取液體時(shí)速度不能太快,以免產(chǎn)生氣泡而使吸取量不準(zhǔn)確。
3、溫浴時(shí),要用不干膠或膠帶紙封好酶標(biāo)板,防止水分的蒸發(fā)。
4、洗液不夠時(shí),可用蒸餾水自行配制PH7.4,0.02M的磷酸緩沖液,加入0.1%的吐溫20作為洗液。加入1/1000的疊氮鈉后可長(zhǎng)期保存。
5、實(shí)驗(yàn)時(shí),要使底物避光保存。
6、洗板時(shí),每次洗液加入后,應(yīng)靜置1分鐘,使清洗更加徹底。沒(méi)有洗板機(jī)時(shí),倒去液體后,要將酶標(biāo)板在報(bào)紙或毛紙上用力拍干。
7、要在實(shí)驗(yàn)前1小時(shí)將試劑盒從冰箱中取出,使各種試劑都恢復(fù)到室溫,以使結(jié)果更穩(wěn)定。
8、吸取液體時(shí),要用量程和需要量接近的槍去吸,減少誤差。
9、要配備20ul、50ul、100ul、1000ul和排槍各一支。吸取不同的液體后,要更換槍頭。即使是吸取標(biāo)準(zhǔn)品時(shí)。
10、液體全部加完后,可將酶標(biāo)板在桌子上平行輕輕晃動(dòng)30秒,混勻液體。也可以用酶標(biāo)儀的晃動(dòng)功能。
試劑使用須知:
(1)請(qǐng)參照相關(guān)法規(guī)、文獻(xiàn)、MSDS等信息,理解并掌握好試劑的特性,再進(jìn)行**操作。
(2)通常購(gòu)買(mǎi)試劑時(shí)一定要想到一次性用完。若估算不足有剩余的話(huà),更加注意其他保管和管理。
(3)萬(wàn)一試劑操作者并非專(zhuān)業(yè)技術(shù)人員。必須在專(zhuān)業(yè)人士的指導(dǎo)監(jiān)督下進(jìn)行操作。對(duì)于使用后的廢棄物,不要或者舊的試劑,應(yīng)按照相關(guān)法律法規(guī)正當(dāng)處理。
(4)購(gòu)買(mǎi)后,請(qǐng)務(wù)必確認(rèn)標(biāo)簽上的注意事項(xiàng);做好預(yù)防顛倒,摔壞的措施和管理體制;在使用前再次確認(rèn)標(biāo)簽上的注意事項(xiàng),做好必要的**對(duì)策;對(duì)沒(méi)有標(biāo)明其危害特性、有害特性的,也要慎重地進(jìn)行操作;必須帶好防護(hù)用具,小心翼翼進(jìn)行操作。
操作流程:
1.從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用自封袋密封放回4℃。
2. 設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔,標(biāo)準(zhǔn)品孔各加不濃度的標(biāo)準(zhǔn)品50μL;
3. 樣本孔中加入待測(cè)樣本50μL;空白孔不加。
4. 除空白孔外,標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔中每孔加入辣根過(guò)氧化物酶(HRP)標(biāo)記的檢測(cè)抗體100μL,用封板膜封住反應(yīng)孔,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。
5. 棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿(mǎn)洗滌液(350μL),靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復(fù)洗板5次(也可用洗板機(jī)洗板)。
6. 每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。
7. 每孔加入終止液50μL,15min內(nèi),在450nm波長(zhǎng)處測(cè)定各孔的OD值。
人血管性血友病因子/瑞斯托霉素輔因子(VWF)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒 Hs 578T(乳腺癌細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
小鼠白介素2(IL-2)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒 HS 683(腦膠質(zhì)瘤細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
小鼠正常T細(xì)胞表達(dá)和分泌因子(RANTES/CCL5)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒 Hs 746T(胃癌細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
大鼠基質(zhì)細(xì)胞衍生因子1β(SDF-1β/CXCL12)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒 Hs68(男性正常**細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
雞維生素D(VD)ELISA試劑盒96T/48T試劑盒 HSC-T6(大鼠肝星形細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
人促紅細(xì)胞生成素抗原(EPO-Ag)ELISA試劑盒96T/48T試劑盒 HSC-T6, 大鼠肝星狀細(xì)胞系
人粒細(xì)胞集落激因子(G-CSF)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒 HT-1080(纖維肉瘤細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
人胰島素樣生長(zhǎng)因子結(jié)合蛋白2(IGFBP2)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒 HT-29(結(jié)腸癌細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
小鼠單核細(xì)胞趨化蛋白3(MCP-3/CCL7)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒 HT-29, 結(jié)腸癌細(xì)胞
大鼠抗增殖細(xì)胞核抗原抗體(PCNA)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒 HT-29全細(xì)胞裂解液100ug100ug
魚(yú)丙醛(MDA)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒 HT-29/大腸癌細(xì)胞株國(guó)產(chǎn)
RPMI 1640培養(yǎng)基BAD蛋白**共沉淀分析試劑盒 進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 規(guī)格:5次
BAD蛋白表達(dá)ELISA定量檢測(cè)試劑盒 進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 規(guī)格:25次
BAX蛋白表達(dá)流式 儀檢測(cè)試劑盒 進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 規(guī)格:10/20次
載玻片 BAX蛋白表達(dá)熒光顯微鏡檢測(cè)試劑盒 進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 規(guī)格:10/20次
冰凍切片組織BAX蛋白表達(dá)熒光顯微鏡檢測(cè)試劑盒 進(jìn)口/國(guó)產(chǎn) 規(guī)格:10/20次
大鼠色素P450(CYP450)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒 小鼠成纖維英文名稱(chēng):3T3
人p物質(zhì)(SP)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒 小鼠成纖維英文名稱(chēng):L929
人脂肪型脂肪酸結(jié)合蛋白(FABP4)ELISA試劑盒96T/48T試劑盒 小鼠成纖維英文名稱(chēng):NIH?3T3
小鼠花生四烯酸(AA)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒 小鼠成纖維(EGFP標(biāo)記)
豬凋亡相關(guān)因子(FAS/CD95)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒 小鼠垂體瘤英文名稱(chēng):MMQ
大鼠前列腺酸性磷酸酶(PAP)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒 小鼠垂體瘤英文名稱(chēng):MMQ
犬素(Renin)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒 小鼠垂體瘤英文名稱(chēng):AtT20
人肝素輔因子Ⅱ(HCⅡ)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒 小鼠垂體瘤英文名稱(chēng):AtT20
人前白蛋白(PA)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒 小鼠單核巨噬白血病英文名稱(chēng):raw264.7
小鼠巨噬炎性蛋白1α(MIP-1α/CCL3)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒 小鼠肥大癌英文名稱(chēng):P815
山羊白介素10(IL-10)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒 小鼠單核巨噬白血病英文名稱(chēng):raw264.7