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規(guī)格參數(shù):
產品名稱:BL21 DE3 pLysS大腸桿菌說明書
拉丁文: Escherichia coli BL21(DE3)pLysS
提供形式: 西林瓶,菌片
**等級: 1
模式菌株: 未知
應用領域: 用于蛋白表達
培養(yǎng)基: LB瓊脂培養(yǎng)基:酵母提取物 5.0 g,蛋白胨 10.0 g,NaCl 10.0 g,瓊脂 15.0 g,蒸餾水 1.0 L,pH 7.0。121℃,15min**。
生長條件: 37℃,有氧,LB
本公司產品僅用科研實驗
產品名稱 |
BL21 DE3 pLysS大腸桿菌說明書 |
英文名稱 |
Escherichia coli BL21(DE3)pLysS |
貨號 |
BH-J011073 |
儀器設備與器具:
1 恒溫培養(yǎng)箱:36±1℃。
2 1000ml三角燒瓶、1ml、10ml移液管。
3 接種針。
4 顯微鏡。
5 超凈工作臺。
6 玻片、酒精燈、洗耳球、試管架。
7 天平:感量0.01g。
8 菌釜。
9 培養(yǎng)皿(直徑為90mm)、試管,經121℃、30分鐘菌。
10試管夾、酒精燈、秒表、載玻片
保存方法:
傳代保存法:培養(yǎng)基的濃度不宜過高,營養(yǎng)成分不宜過于豐富,尤其是碳水化合物的濃度應在可能的范圍內盡量降低。培養(yǎng)溫度通常以稍低于適生長溫度為好。若為產酸菌種,則應在培養(yǎng)基中添加少量碳酸鈣 [3] 。
液體石蠟覆蓋保存法:該法較前一種方法保存菌種的時間更長,適用于霉菌、酵母菌、放線菌及需氧等的保存。
懸液保存法:
① 蒸餾水保存法:適用于霉菌、酵母菌及絕大部分放線菌,將其菌體懸浮于蒸餾水中即可在室溫下保存數(shù)年。本法應注意避免水分的蒸發(fā)。
② 糖液保存法:適用于酵母菌,如將其菌體懸浮于10%的蔗糖溶液中,然后于冷暗處保存,可長達10年。除此之外,也可使用緩沖液或食鹽水等進行保存。
載體保存法:①土壤保存法;②砂土保存法;③硅膠保存法;④磁珠保存法;⑤麩皮保存法;⑥紙片(濾紙)保存法。
常用的冷凍保存法:
① 低溫冰箱保存法(-20℃、-50℃或-85℃):低溫冷凍保存時使用螺旋口試管較為方便,也可在棉塞試管外包裹塑料薄膜。保存時菌液加量不宜過多,有些可添加保護劑。此外,也可用φ5mm的玻璃珠來吸附菌液,然后把玻璃珠置于塑料容器內,再放入低溫冰箱內進行保存的。
② 干冰保存法(-70℃左右):即將菌種管插入干冰內,再置于冰箱內進行冷凍保存。
③ 液氮保存法(-196℃):是適用范圍廣的微生物保存法。
微生物菌種的培養(yǎng):
⒈ 孢子制備
⑴ 放線菌孢子的制備
一般采用瓊脂斜面培養(yǎng)基,培養(yǎng)基中含有一些適合產孢子的營養(yǎng)成分,如麩皮、豌豆浸汁、蛋白胨和一些無機鹽等。碳源和氮源不要太豐富(碳源約為1%,氮源不超過0.5%),碳源豐富容易造成生理酸性的營養(yǎng)環(huán)境,不利于放線菌孢子的形成,氮源豐富則有利于菌絲繁殖而不利于孢子形成。一般情況下,干燥和限制營養(yǎng)可直接或間接誘導孢子形成。放線菌斜面的培養(yǎng)溫度大多數(shù)為28 ℃,少數(shù)為37 ℃,培養(yǎng)時間為5~14天。
⑵ 霉菌孢子的制備
霉菌的孢子培養(yǎng),一般以大米、小米、玉米、麩皮、麥粒等天然農產品為培養(yǎng)基。這是由于這些農產品中的營養(yǎng)成分較適合霉菌的孢子繁殖,而且這類培養(yǎng)基的表面積較大,可獲得大量的孢子。霉菌的培養(yǎng)一般為25~28 ℃,培養(yǎng)時間為4~14天。
⒉ 種子制備
⑴ 搖瓶種子制備
搖瓶種子進罐,常采用母瓶、子瓶兩級培養(yǎng),有時母瓶種子也可以直接進罐。種子培養(yǎng)基要求比較豐富和完全,并易被菌體分解利用,氮源豐富有利于菌絲生長。原則上各種營養(yǎng)成分不宜過濃,子瓶培養(yǎng)基濃度比母瓶略高,更接近種子罐的培養(yǎng)基配方。
⑵ 種子罐種子制備
種子罐種子制備的工藝過程,因菌種不同而異,一般可分為種子、二級種子和三級種子的制備。孢子(或搖瓶菌絲)被接入到體積較小的種子罐中,經培養(yǎng)后形成大量的菌絲,這樣的種子稱為種子,把種子轉入發(fā)酵罐內發(fā)酵,稱為二級發(fā)酵。如果將種子接入體積較大的種子罐內,經過培養(yǎng)形成更多的菌絲,這樣制備的種子稱為二級種子,將二級種子轉入發(fā)酵罐內發(fā)酵,稱為三級發(fā)酵。同樣道理,使用三級種子的發(fā)酵,稱為四級發(fā)酵。
豬受磷蛋白(PLN)吸附測定試劑盒
豬干擾素誘導T細胞α亞族趨化因子 (I-TAC)吸附測定試劑盒
豬趨化因子CCL3樣蛋白1(CCL3L1)吸附測定試劑盒
豬胃泌素抑制肽(GIP)吸附測定試劑盒
豬凝血因子Ⅱ(F2)吸附測定試劑盒
豬果糖二磷酸醛縮酶A(ALDOA)吸附測定試劑盒
豬脂肪酶H (LIPH)吸附測定試劑盒
豬細絲蛋白Bβ(FLNβ)吸附測定試劑盒
豬球蛋白G Fc段受體II(FcγR II/CD32)吸附測定試劑盒
豬血管抑素/血管穩(wěn)定蛋白(ANG)吸附測定試劑盒
豬腦源性神經營養(yǎng)因子(BDNF) 吸附測定試劑盒
BL21 DE3 pLysS大腸桿菌說明書2-甲基四氫呋喃(MeTHF)(Standard for GC,≥99.5%(GC))CAS號:96-47-9Standard for GC,≥99.5%(GC)2-Methyltetrahydrofuran
異戊烷(Standard for GC,≥99.7%(GC))CAS號:78-78-4Standard for GC,≥99.7%(GC)2-Methylbutane
丙烯酸甲酯(MA)(Standard for GC,>99%(GC))CAS號:96-33-3Standard for GC,>99%(GC)Methyl acrylate
丁酸甲酯(Standard for GC,>99.5%(GC))CAS號:623-42-7Standard for GC,>99.5%(GC)Methyl butyrate
α-甲基丙烯酸(Standard for GC)CAS號:79-41-4Standard for GCMethylacrylic acid
乙二醇甲醚(standard for GC,>99.7%(GC))CAS號:109-86-4standard for GC,>99.7%(GC)2-Methoxyethanol
N-甲基吡咯烷酮(NMP)(standard for GC,≥99.6%(GC))CAS號:872-50-4standard for GC,≥99.6%(GC)1-Methyl-2-pyrrolidinone
異丁醇(standard for GC,≥99.5%(GC))CAS號:78-83-1standard for GC,≥99.5%(GC) 2-Methyl-1-propanol
甲基環(huán)己烷(Standard for GC,≥99.8%(GC))CAS號:108-87-2Standard for GC,≥99.8%(GC)Methylcyclohexane
乙酸甲酯(GCS,≥99.9% (GC))CAS號:79-20-9GCS,≥99.9% (GC)Methyl acetate
基本概念:
(1)菌群:由多種合組成的相對穩(wěn)定的群體,具有某些共同性狀。如大腸菌群包括大腸桿菌、產氣腸他們之間的過渡類型。
(2) 菌屬:菌種的上分類,通常性狀相近、親緣關系密切的若干菌種組成一個菌屬,如芽孢桿菌屬、葡萄球菌屬、乳桿菌屬等。
(3)是基本的分類單位,通常指表型特征相似、親緣關系接近的一類群體,與同屬內其他種有著明顯差異;當涉及到保存時,菌種是指的種子(用來長期保存)資源。
(4) 菌型:同一菌種的不同,在某些方面存在較小差異的為同一菌型,通常一個菌種內的可以分為多種不同的菌型。
(5) 菌株:由一個獨立分離的單細胞系培養(yǎng)而成的純遺傳型群體及其一切后代,一種微生物的每一個不同來源的純培養(yǎng)物均可稱為該菌種的一個菌株。