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常用的冷凍保存法:
① 低溫冰箱保存法(-20℃、-50℃或-85℃):低溫冷凍保存時(shí)使用螺旋口試管較為方便,也可在棉塞試管外包裹塑料薄膜。保存時(shí)菌液加量不宜過多,有些可添加保護(hù)劑。此外,也可用φ5mm的玻璃珠來吸附菌液,然后把玻璃珠置于塑料容器內(nèi),再放入低溫冰箱內(nèi)進(jìn)行保存的。
② 干冰保存法(-70℃左右):即將菌種管插入干冰內(nèi),再置于冰箱內(nèi)進(jìn)行冷凍保存。
③ 液氮保存法(-196℃):是適用范圍廣的微生物保存法。
規(guī)格參數(shù):
產(chǎn)品名稱:蘇云金芽孢桿菌培養(yǎng)
拉丁文: Bacillus thuringiensis Berliner
提供形式: 凍干管
**等級(jí): 1
模式菌株: no
應(yīng)用領(lǐng)域: 殺鱗翅目昆蟲
培養(yǎng)基: 營養(yǎng)肉汁瓊脂:蛋白胨 5.0g,牛肉浸取物 3.0g,NaCl 5.0g,瓊脂 15.0g,蒸餾水 1.0L,pH7.0。[注] 培養(yǎng)芽孢桿菌時(shí)加入5mg MnSO4·H2O,則有利于產(chǎn)生芽孢。
生長條件: 30℃,好氧。
存儲(chǔ)條件: 2-8℃
本公司產(chǎn)品僅用科研實(shí)驗(yàn)
產(chǎn)品名稱 |
蘇云金芽孢桿菌培養(yǎng) |
英文名稱 |
Bacillus thuringiensis Berliner |
貨號(hào) |
BH-J011193 |
儀器設(shè)備與器具:
1 恒溫培養(yǎng)箱:36±1℃。
2 1000ml三角燒瓶、1ml、10ml移液管。
3 接種針。
4 顯微鏡。
5 超凈工作臺(tái)。
6 玻片、酒精燈、洗耳球、試管架。
7 天平:感量0.01g。
8 菌釜。
9 培養(yǎng)皿(直徑為90mm)、試管,經(jīng)121℃、30分鐘菌。
10試管夾、酒精燈、秒表、載玻片
保存方法:
傳代保存法:培養(yǎng)基的濃度不宜過高,營養(yǎng)成分不宜過于豐富,尤其是碳水化合物的濃度應(yīng)在可能的范圍內(nèi)盡量降低。培養(yǎng)溫度通常以稍低于適生長溫度為好。若為產(chǎn)酸菌種,則應(yīng)在培養(yǎng)基中添加少量碳酸鈣 [3] 。
液體石蠟覆蓋保存法:該法較前一種方法保存菌種的時(shí)間更長,適用于霉菌、酵母菌、放線菌及需氧等的保存。
懸液保存法:
① 蒸餾水保存法:適用于霉菌、酵母菌及絕大部分放線菌,將其菌體懸浮于蒸餾水中即可在室溫下保存數(shù)年。本法應(yīng)注意避免水分的蒸發(fā)。
② 糖液保存法:適用于酵母菌,如將其菌體懸浮于10%的蔗糖溶液中,然后于冷暗處保存,可長達(dá)10年。除此之外,也可使用緩沖液或食鹽水等進(jìn)行保存。
載體保存法:①土壤保存法;②砂土保存法;③硅膠保存法;④磁珠保存法;⑤麩皮保存法;⑥紙片(濾紙)保存法。
微生物菌種的培養(yǎng):
⒈ 孢子制備
⑴ 放線菌孢子的制備
一般采用瓊脂斜面培養(yǎng)基,培養(yǎng)基中含有一些適合產(chǎn)孢子的營養(yǎng)成分,如麩皮、豌豆浸汁、蛋白胨和一些無機(jī)鹽等。碳源和氮源不要太豐富(碳源約為1%,氮源不超過0.5%),碳源豐富容易造成生理酸性的營養(yǎng)環(huán)境,不利于放線菌孢子的形成,氮源豐富則有利于菌絲繁殖而不利于孢子形成。一般情況下,干燥和限制營養(yǎng)可直接或間接誘導(dǎo)孢子形成。放線菌斜面的培養(yǎng)溫度大多數(shù)為28 ℃,少數(shù)為37 ℃,培養(yǎng)時(shí)間為5~14天。
⑵ 霉菌孢子的制備
霉菌的孢子培養(yǎng),一般以大米、小米、玉米、麩皮、麥粒等天然農(nóng)產(chǎn)品為培養(yǎng)基。這是由于這些農(nóng)產(chǎn)品中的營養(yǎng)成分較適合霉菌的孢子繁殖,而且這類培養(yǎng)基的表面積較大,可獲得大量的孢子。霉菌的培養(yǎng)一般為25~28 ℃,培養(yǎng)時(shí)間為4~14天。
⒉ 種子制備
⑴ 搖瓶種子制備
搖瓶種子進(jìn)罐,常采用母瓶、子瓶兩級(jí)培養(yǎng),有時(shí)母瓶種子也可以直接進(jìn)罐。種子培養(yǎng)基要求比較豐富和完全,并易被菌體分解利用,氮源豐富有利于菌絲生長。原則上各種營養(yǎng)成分不宜過濃,子瓶培養(yǎng)基濃度比母瓶略高,更接近種子罐的培養(yǎng)基配方。
⑵ 種子罐種子制備
種子罐種子制備的工藝過程,因菌種不同而異,一般可分為種子、二級(jí)種子和三級(jí)種子的制備。孢子(或搖瓶菌絲)被接入到體積較小的種子罐中,經(jīng)培養(yǎng)后形成大量的菌絲,這樣的種子稱為種子,把種子轉(zhuǎn)入發(fā)酵罐內(nèi)發(fā)酵,稱為二級(jí)發(fā)酵。如果將種子接入體積較大的種子罐內(nèi),經(jīng)過培養(yǎng)形成更多的菌絲,這樣制備的種子稱為二級(jí)種子,將二級(jí)種子轉(zhuǎn)入發(fā)酵罐內(nèi)發(fā)酵,稱為三級(jí)發(fā)酵。同樣道理,使用三級(jí)種子的發(fā)酵,稱為四級(jí)發(fā)酵。
基本概念:
(1)菌群:由多種合組成的相對(duì)穩(wěn)定的群體,具有某些共同性狀。如大腸菌群包括大腸桿菌、產(chǎn)氣腸他們之間的過渡類型。
(2) 菌屬:菌種的上分類,通常性狀相近、親緣關(guān)系密切的若干菌種組成一個(gè)菌屬,如芽孢桿菌屬、葡萄球菌屬、乳桿菌屬等。
(3)是基本的分類單位,通常指表型特征相似、親緣關(guān)系接近的一類群體,與同屬內(nèi)其他種有著明顯差異;當(dāng)涉及到保存時(shí),菌種是指的種子(用來長期保存)資源。
(4) 菌型:同一菌種的不同,在某些方面存在較小差異的為同一菌型,通常一個(gè)菌種內(nèi)的可以分為多種不同的菌型。
(5) 菌株:由一個(gè)獨(dú)立分離的單細(xì)胞系培養(yǎng)而成的純遺傳型群體及其一切后代,一種微生物的每一個(gè)不同來源的純培養(yǎng)物均可稱為該菌種的一個(gè)菌株。
豬周期素依賴性激酶9(CDK-9)吸附測定試劑盒
豬信號(hào)傳導(dǎo)轉(zhuǎn)錄激活因子6(STAT56)吸附測定試劑盒
豬乙酰膽堿受體抗體(AChRab)吸附測定試劑盒
豬金屬硫蛋白3 (MT3)吸附測定試劑盒
豬甘露糖結(jié)合蛋白(MBP/MBL)吸附測定試劑盒
豬C-Myc結(jié)合蛋白(MYCBP)吸附測定試劑盒
豬HtrA絲氨酸肽酶1(HTRA1)吸附測定試劑盒
豬Apelin 17(AP17)吸附測定試劑盒
豬乳腺癌抗雌耐藥性基因1(BCAR1)吸附測定試劑盒
豬堿性鞘磷脂磷酸二酯酶(Alk-Smase)吸附測定試劑盒
豬V型膠原α2(COL5α2)吸附測定試劑盒
蘇云金芽孢桿菌培養(yǎng)L-苯丙氨酸乙酯鹽酸鹽CAS號(hào):3182-93-2>98%,BRH-Phe-OEt.HCl
甘氨酸乙酯鹽酸鹽CAS號(hào):623-33-6>98%,BRGlycine ethyl ester hydrochloride
L-蛋氨酸乙酯鹽酸鹽;L-甲硫氨酸乙酯鹽酸鹽CAS號(hào):2899-36-7>98%(T),BRL-Methionine ethyl ester hydrochloride
L-酪氨酸乙酯鹽酸鹽CAS號(hào):4089-07-00.98L-Tyrosine ethyl ester hydrochloride
L-天冬氨酸-β-芐酯/L-天冬氨酸-4-芐酯CAS號(hào):2177-63-1>98%,BRL-Aspartic acid β-benzyl ester
L-谷氨酸-γ-芐酯CAS號(hào):1676-73-90.98L-Glutamic acid γ-benzyl ester
L-苯丙氨酸芐酯鹽酸鹽CAS號(hào):2462-32-00.98L-Phenylalanine benzyl ester hydrochloride
L-脯氨酸芐酯鹽酸鹽CAS號(hào):16652-71-4>98%,BRL-Proline benzyl ester hydrochloride
L-精氨酸-L-谷氨酸鹽CAS號(hào):4320-30-3>98%,BRL-Arginine L-glutamate
L-精氨酸-α-酮戊二酸鹽(2:1)CAS號(hào):5256-76-8>98%,BRL-Arginine AKG 2:1