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熒光技術(shù)的實驗步驟:
一、準備好試劑與儀器:
磷酸鹽緩沖鹽水、熒光標記的抗體溶液、緩沖甘油、搪瓷桶三只、有蓋搪瓷盒一只、熒光顯微鏡、玻片架、濾紙、37℃溫箱等。
二、實驗步驟
1.滴加0.01mol/L,pH7.4的PBS于待檢標本片上,十分鐘后棄去,使標本保持一定濕度。
2.滴加適當稀釋的熒光標記的抗體溶液,使其完全覆蓋標本,置于有蓋搪瓷盒內(nèi),保溫一定時間以三十分鐘為參考。
3.取出玻片,置玻片架上,先用0.01mol/L,pH7.4的PBS沖洗后,再按順序過0.01mol/L,pH7.4的PBS三缸浸泡,每缸三到五分鐘,并不停地搖晃振蕩。
4.取出玻片,用濾紙吸去多余水分,但不使標本干燥,加一滴緩沖甘油,以蓋玻片覆蓋。
5.立即用熒光顯微鏡觀察。觀察標本的特異性熒光強度。
公司專業(yè)供應的抗體,抗體是用于化學反應、分析化驗、研究實驗、教學實驗、化學配方使用的純凈化學品,品質(zhì)**,價格實惠,多種規(guī)格供應,售后完善。本公司產(chǎn)品僅用于科研實驗。
產(chǎn)品名稱 |
EYA3蛋白抗體 |
英文名稱 |
Anti-EYA3 |
貨號 |
BH-K013217 |
英文名稱 EYA3蛋白抗體
中文名稱 EYA3蛋白抗體
別 名 AI844637; DKFZp686C132; EYA3; EYA3_HUMAN; Eyes absent 3; Eyes absent 3 homolog (Drosophila); Eyes absent homolog 3; OTTMUSP00000010370; RP11-460I13.4; RP23-442A20.1.
濃 度 1mg/1ml
規(guī) 格 1mg/1ml
抗體來源 Rabbit
克隆類型 polyclonal
交叉反應 Human, Mouse, Rat, Dog, Pig, Cow, Horse, Rabbit, Sheep
產(chǎn)品類型 一抗
研究領(lǐng)域 細胞生物 發(fā)育生物學 信號轉(zhuǎn)導 干細胞 轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子 激酶和磷酸酶 表觀遺傳學
蛋白分子量 predicted molecular weight: 63kDa
性 狀 Lyophilized or Liquid
免 疫 原 KLH conjugated synthetic peptide derived from human EYA3
亞 型 IgG
抗體制備過程:
1.材料與試劑
a.提取的動物 Ig
b.弗氏完全佐劑和弗氏不完全佐劑
c.青霉素和鏈霉素
d.實驗動物 兔
e.其它材料及試劑
2、選擇實驗活體。
3、進行動物實驗。
4、試取血樣進行測試,查看效果。
5、如果成功,殺死實驗活體,采集全部血清。
6、純化出抗體。
7、鑒定抗體。胎牛血清(無菌采制)
實驗原理 :
(1)特異性結(jié)合抗原:抗體本身不能直接溶解或殺傷帶有特異抗原的靶細胞,通常需要補體或吞噬細胞等共同發(fā)揮效應以病原微生物或?qū)е虏±頁p傷。然而,抗體可通過與病毒或的特異性結(jié)合,直接發(fā)揮中和病毒的作用。
(2)活補體:IgM、IgG1、IgG2和IgG3可通過經(jīng)典途徑激活補體,凝聚的IgA、IgG4和IgE可通過替代途徑激活補體。
(3)結(jié)合細胞:不同類別的球蛋白,可結(jié)合不同種的細胞,參與應答。
(4)可通過胎盤及粘膜:球蛋白G(IgG)能通過胎盤進入胎兒血流中,使胎兒形成自然被動
球蛋白A(IgA)可通過消化道及呼吸道粘膜,是粘膜局部抗感染的主要因素。
(5)具有抗原性:抗體分子是一種蛋白質(zhì),也具有刺機體產(chǎn)生應答的性能。不同的球蛋白分子,各具有不同的抗原性。
(6)抗體對理化因子的抵抗力與一般球蛋白相同:不耐熱,60~70℃即被破壞。各種酶及能使蛋白質(zhì)凝固變性的物質(zhì),均能破壞抗體的作用。抗體可被中性鹽類沉淀。在生產(chǎn)上常可用硫酸銨或硫酸鈉從血清中沉淀出含有抗體的球蛋白,再經(jīng)透析法將其純化。
抗體的生活習性:
(1)結(jié)合特異性抗原:抗體與其他球蛋白分子區(qū)別,就在于抗體能與相應抗原發(fā)生特異性結(jié)合,在體內(nèi)導致生理或病理效應;在體外產(chǎn)生各種直接或間接的可見的抗原抗體結(jié)合反應。抗體是靠其分子上的特殊的結(jié)合部位與抗原結(jié)合的。
(2)激活補體:抗體與相應抗原結(jié)合后,借助暴露的補體結(jié)合點去激活補體系統(tǒng)、激發(fā)補體的溶菌、溶細胞等疫作用。
(3)結(jié)合細胞:不同類別的球蛋白,可結(jié)合不同種的細胞,產(chǎn)生不同的疚,參與疫應答。
(4)可通過胎盤及粘膜:球蛋白G(IgG)能通過胎盤進入胎兒血流中,使胎兒形成自然被動疫。疫球蛋白A(IgA)可通過消化道及呼吸道粘膜,是粘膜局部抗感染疫的主要因素。
(5)具有抗原性:抗體分子是一種蛋白質(zhì),也具有刺激機體產(chǎn)生疫應答的性能。不同的疫球蛋白分子,各具有不同的抗原性。
(6)抗體對理化因子的抵抗力與一般球蛋白相同:不耐熱,60~70℃即被破壞。各種酶及能使蛋白質(zhì)凝固變性的物質(zhì),均能破壞抗體的作用??贵w可被中性鹽類沉淀。在生產(chǎn)上??捎昧蛩徜@或硫酸鈉從疫血清中沉淀出含有抗體的球蛋白,再經(jīng)透析法將其純化。
固生蛋白抗體 規(guī)格: 1ml 英文::Anti-Tenascin
血管內(nèi)皮生長因子受體2抗體 規(guī)格: 0.1ml 英文::Anti-VEGFR2/VEGF-R2/Flk1
CXCL10趨化因子10/干擾素誘導蛋白10抗體 規(guī)格:0.1ml 英文::Anti-CXCL10/IP-10
ATP結(jié)合蛋白家族5抗體 規(guī)格:0.1ml 英文::Anti-ABCB5/
錨定蛋白G抗體 規(guī)格:0.1ml 英文::Anti-Ankyrin G/ANK-3/ankyrin 3
睪丸受體相關(guān)蛋白16抗體 規(guī)格: 0.2ml 英文::Anti-TRA16
環(huán)化酶相關(guān)蛋白CAP-2抗體 規(guī)格:0.1ml 英文::Anti-CAP2
衰變加速因子CD55抗體 規(guī)格:0.1ml 英文::Anti-CD55/DAF
ADP核糖基化因子相互作用蛋白1抗體 規(guī)格:0.1ml 英文::Anti-Arfaptin 1
丁酰膽堿脂酶抗體(N端) 規(guī)格:0.1ml 英文::Anti-BCHENT
EYA3蛋白抗體3-溴-5-硝-1H-吲唑分子式:242.03分子量: C7H4BrN3O2英文名稱:3- bromo -5- nitro -1H- indazoleCAS號:67400-25-3
4,4'-二氟二砜分子式:254.25分子量: C12H8F2O2S英文名稱:4,4'- two f twoCAS號:383-29-9
4-(1-溴代乙)-5-氟-6-氯嘧分子式:239.47分子量: C6H5BrClFN2英文名稱:4- (1-) -5- -6-CAS號:188416-28-6
炔雌英文名稱:Female alcoholCAS號:57-63-6分子式:296.4分子量: C20H24O2
分散橙1英文名稱:Disperse orange 1CAS號:2581-69-3分子式:318.33分子量: C18H14N4O2
變胺藍B硫鹽(=4--4'-甲氧二胺硫鹽)英文名稱:B sulfate (=4- amino group -4'- two aniline sulfate)CAS號:3169-21-9分子式:分子量: C13H14N2O.H2SO4
2,3,5,4'-四羥二乙-2-O-β-D-葡萄糖苷英文名稱:2,3,5,4'- four hydroxy two styrene -2-O- beta -D-CAS號:82373-94-2分子式:406.38分子量:C20H22O9
2-氟-6-三氟甲吡分子式:165.09分子量: C6H3F4N英文名稱:2- three -6-CAS號:94239-04-0
STC分子式:340.83分子量: C17H13ClN4S英文名稱:STCCAS號:38800-20-3
1,2,3,4-四氟分子式:150.07分子量: C6H2F4英文名稱:Four - 1,2,3,4-CAS號:551-62-2