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熒光技術(shù)的實驗步驟:
一、準備好試劑與儀器:
磷酸鹽緩沖鹽水、熒光標記的抗體溶液、緩沖甘油、搪瓷桶三只、有蓋搪瓷盒一只、熒光顯微鏡、玻片架、濾紙、37℃溫箱等。
二、實驗步驟
1.滴加0.01mol/L,pH7.4的PBS于待檢標本片上,十分鐘后棄去,使標本保持一定濕度。
2.滴加適當稀釋的熒光標記的抗體溶液,使其完全覆蓋標本,置于有蓋搪瓷盒內(nèi),保溫一定時間以三十分鐘為參考。
3.取出玻片,置玻片架上,先用0.01mol/L,pH7.4的PBS沖洗后,再按順序過0.01mol/L,pH7.4的PBS三缸浸泡,每缸三到五分鐘,并不停地搖晃振蕩。
4.取出玻片,用濾紙吸去多余水分,但不使標本干燥,加一滴緩沖甘油,以蓋玻片覆蓋。
5.立即用熒光顯微鏡觀察。觀察標本的特異性熒光強度。
公司專業(yè)供應的抗體,抗體是用于化學反應、分析化驗、研究實驗、教學實驗、化學配方使用的純凈化學品,品質(zhì)**,價格實惠,多種規(guī)格供應,售后完善。本公司產(chǎn)品僅用于科研實驗。
產(chǎn)品名稱 |
纖連蛋白4抗體 |
英文名稱 |
Anti-EFEMP2/Fibulin 4 |
貨號 |
BH-K013247 |
英文名稱 纖連蛋白4抗體
中文名稱 纖連蛋白4抗體
別 名 EFEMP2; EGF containing fibulin like extracellular matrix protein 2; EGF-containing fibulin-like extracellular matrix protein 2; FBLN 4; FBLN4; FBLN4_HUMAN; FIBL 4; FIBL-4; FIBL4; Fibulin4; Fibulin-4; MBP 1; MBP1; Mutant p53 binding protein 1; Protein UPH1; UPH 1; UPH1; UPH1 protein.
濃 度 1mg/1ml
規(guī) 格 1mg/1ml
抗體來源 Rabbit
克隆類型 polyclonal
交叉反應 Human, Mouse, Rat, Dog, Pig, Cow, Horse, Sheep
產(chǎn)品類型 一抗
研究領(lǐng)域 細胞生物 信號轉(zhuǎn)導 細胞外基質(zhì)
蛋白分子量 predicted molecular weight: 47kDa
性 狀 Lyophilized or Liquid
免 疫 原 KLH conjugated synthetic peptide derived from human EFEMP2/Fibulin 4
亞 型 IgG
抗體制備過程:
1.材料與試劑
a.提取的動物 Ig
b.弗氏完全佐劑和弗氏不完全佐劑
c.青霉素和鏈霉素
d.實驗動物 兔
e.其它材料及試劑
2、選擇實驗活體。
3、進行動物實驗。
4、試取血樣進行測試,查看效果。
5、如果成功,殺死實驗活體,采集全部血清。
6、純化出抗體。
7、鑒定抗體。胎牛血清(無菌采制)
實驗原理 :
(1)特異性結(jié)合抗原:抗體本身不能直接溶解或殺傷帶有特異抗原的靶細胞,通常需要補體或吞噬細胞等共同發(fā)揮效應以病原微生物或?qū)е虏±頁p傷。然而,抗體可通過與病毒或的特異性結(jié)合,直接發(fā)揮中和病毒的作用。
(2)活補體:IgM、IgG1、IgG2和IgG3可通過經(jīng)典途徑激活補體,凝聚的IgA、IgG4和IgE可通過替代途徑激活補體。
(3)結(jié)合細胞:不同類別的球蛋白,可結(jié)合不同種的細胞,參與應答。
(4)可通過胎盤及粘膜:球蛋白G(IgG)能通過胎盤進入胎兒血流中,使胎兒形成自然被動
球蛋白A(IgA)可通過消化道及呼吸道粘膜,是粘膜局部抗感染的主要因素。
(5)具有抗原性:抗體分子是一種蛋白質(zhì),也具有刺機體產(chǎn)生應答的性能。不同的球蛋白分子,各具有不同的抗原性。
(6)抗體對理化因子的抵抗力與一般球蛋白相同:不耐熱,60~70℃即被破壞。各種酶及能使蛋白質(zhì)凝固變性的物質(zhì),均能破壞抗體的作用??贵w可被中性鹽類沉淀。在生產(chǎn)上??捎昧蛩徜@或硫酸鈉從血清中沉淀出含有抗體的球蛋白,再經(jīng)透析法將其純化。
抗體的生活習性:
(1)結(jié)合特異性抗原:抗體與其他球蛋白分子區(qū)別,就在于抗體能與相應抗原發(fā)生特異性結(jié)合,在體內(nèi)導致生理或病理效應;在體外產(chǎn)生各種直接或間接的可見的抗原抗體結(jié)合反應??贵w是靠其分子上的特殊的結(jié)合部位與抗原結(jié)合的。
(2)激活補體:抗體與相應抗原結(jié)合后,借助暴露的補體結(jié)合點去激活補體系統(tǒng)、激發(fā)補體的溶菌、溶細胞等疫作用。
(3)結(jié)合細胞:不同類別的球蛋白,可結(jié)合不同種的細胞,產(chǎn)生不同的疚,參與疫應答。
(4)可通過胎盤及粘膜:球蛋白G(IgG)能通過胎盤進入胎兒血流中,使胎兒形成自然被動疫。疫球蛋白A(IgA)可通過消化道及呼吸道粘膜,是粘膜局部抗感染疫的主要因素。
(5)具有抗原性:抗體分子是一種蛋白質(zhì),也具有刺激機體產(chǎn)生疫應答的性能。不同的疫球蛋白分子,各具有不同的抗原性。
(6)抗體對理化因子的抵抗力與一般球蛋白相同:不耐熱,60~70℃即被破壞。各種酶及能使蛋白質(zhì)凝固變性的物質(zhì),均能破壞抗體的作用??贵w可被中性鹽類沉淀。在生產(chǎn)上常可用硫酸銨或硫酸鈉從疫血清中沉淀出含有抗體的球蛋白,再經(jīng)透析法將其純化。
載脂蛋白A1抗體 規(guī)格: 0.1ml 英文::Anti-FAS/Apo-a1/CD95
G蛋白偶合受體激酶2抗體 規(guī)格: 0.2ml 英文::Anti-GRK2
干擾素-β抗體 規(guī)格: 0.1ml 英文::Anti-IFN-β Anti-human
白血病抑制因子抗體 規(guī)格: 0.1ml 英文::Anti-LIF
中腦核仁蛋白2抗體 規(guī)格: 0.2ml 英文::Anti-Midnolin isoform Protein 2
神經(jīng)節(jié)肽抗體“甘丙肽” 規(guī)格: 0.2ml 英文::Anti-Galanin
聚組氨酸抗體/抗His tag標簽抗體 規(guī)格: 0.1ml 英文::Anti-HisX6/6His/His tag
胰島素1-51蛋白抗體 規(guī)格: 0.1ml 英文::Anti-Insulin
核小體組裝蛋白1抗體 規(guī)格: 1ml 英文::Anti-NAP1
NADPH氧化酶4抗體 規(guī)格: 0.1ml 英文::Anti-Nox-4/NADH
纖連蛋白4抗體溴靈英文名稱:Bromine ratCAS號:56073-10-0分子式:523.42分子量: C31H23BrO3
2,4-二氯-3,5-二硝三氟甲分子式:305分子量: C7HCl2F3N2O4英文名稱:2,4- two -3,5- two nitro three fCAS號:29091-09-6
3-溴-6-羥-5-硝吡分子式:218.99分子量: C5H3BrN2O3英文名稱:3- -6- hydroxy -5- nitro pyridineCAS號:15862-34-7
3,3,5,5-四甲-1-吡咯啉N-氧物分子式:141.21分子量: C8H15NO英文名稱:3,3,5,5- four -1- N-CAS號:10135-38-3
3-硝鄰二甲分子式:151.16分子量: C8H9NO2英文名稱:3- nitro ortho xyleneCAS號:83-41-0
去甲氧姜黃素英文名稱:Go to aCAS號:33171-16-3分子式:338.35392分子量:C20H18O5
3,4-二氯三氟甲分子式:215分子量: C7H3Cl2F3英文名稱:3,4- two CL threeCAS號:328-84-7
3-溴-5-氯吡分子式:192.44分子量: C5H3BrClN英文名稱:3- -5- chlorideCAS號:73583-39-8
丙噻唑分子式:223.25分子量: C10H9NO3S英文名稱:ProbenazoleCAS號:27605-76-1
2-氯乙氧分子式:156.61分子量: C8H9ClO英文名稱:2- chloride based benzeneCAS號:622-86-6