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熒光技術(shù)的實驗步驟:
一、準備好試劑與儀器:
磷酸鹽緩沖鹽水、熒光標記的抗體溶液、緩沖甘油、搪瓷桶三只、有蓋搪瓷盒一只、熒光顯微鏡、玻片架、濾紙、37℃溫箱等。
二、實驗步驟
1.滴加0.01mol/L,pH7.4的PBS于待檢標本片上,十分鐘后棄去,使標本保持一定濕度。
2.滴加適當稀釋的熒光標記的抗體溶液,使其完全覆蓋標本,置于有蓋搪瓷盒內(nèi),保溫一定時間以三十分鐘為參考。
3.取出玻片,置玻片架上,先用0.01mol/L,pH7.4的PBS沖洗后,再按順序過0.01mol/L,pH7.4的PBS三缸浸泡,每缸三到五分鐘,并不停地搖晃振蕩。
4.取出玻片,用濾紙吸去多余水分,但不使標本干燥,加一滴緩沖甘油,以蓋玻片覆蓋。
5.立即用熒光顯微鏡觀察。觀察標本的特異性熒光強度。
公司專業(yè)供應的抗體,抗體是用于化學反應、分析化驗、研究實驗、教學實驗、化學配方使用的純凈化學品,品質(zhì)**,價格實惠,多種規(guī)格供應,售后完善。本公司產(chǎn)品僅用于科研實驗。
產(chǎn)品名稱 |
磷酸化轉(zhuǎn)錄接頭蛋白EP300抗體 |
英文名稱 |
Anti-phospho-Ep300 (Ser1834) |
貨號 |
BH-K013311 |
英文名稱 磷酸化轉(zhuǎn)錄接頭蛋白EP300抗體
中文名稱 磷酸化轉(zhuǎn)錄接頭蛋白EP300抗體
別 名 CREBBP/EP300 inhibitory protein 1; Cyclic AMP responsive enhancer binding protein; E1A associated protein p300; E1A binding protein p300; EC 2.3.1.48; EP300; EP300: E1A binding protein p300; RB and P300 binding protein EID 1; Histone acetyltransferase p300; p300 HAT; Retinoblastoma protein associated protein.
濃 度 1mg/1ml
規(guī) 格 1mg/1ml
抗體來源 Rabbit
克隆類型 polyclonal
交叉反應 Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Pig, Cow, Horse, Guinea Pig, Daniorerio
產(chǎn)品類型 一抗 磷酸化抗體
研究領(lǐng)域 腫瘤 **學 轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子
蛋白分子量 predicted molecular weight: 266kDa
性 狀 Lyophilized or Liquid
免 疫 原 KLH conjugated Synthesised phosphopeptide derived from human Ep300 around the phosphorylation site of Ser1834
亞 型 IgG
抗體制備過程:
1.材料與試劑
a.提取的動物 Ig
b.弗氏完全佐劑和弗氏不完全佐劑
c.青霉素和鏈霉素
d.實驗動物 兔
e.其它材料及試劑
2、選擇實驗活體。
3、進行動物實驗。
4、試取血樣進行測試,查看效果。
5、如果成功,殺死實驗活體,采集全部血清。
6、純化出抗體。
7、鑒定抗體。胎牛血清(無菌采制)
實驗原理 :
(1)特異性結(jié)合抗原:抗體本身不能直接溶解或殺傷帶有特異抗原的靶細胞,通常需要補體或吞噬細胞等共同發(fā)揮效應以病原微生物或?qū)е虏±頁p傷。然而,抗體可通過與病毒或的特異性結(jié)合,直接發(fā)揮中和病毒的作用。
(2)活補體:IgM、IgG1、IgG2和IgG3可通過經(jīng)典途徑激活補體,凝聚的IgA、IgG4和IgE可通過替代途徑激活補體。
(3)結(jié)合細胞:不同類別的球蛋白,可結(jié)合不同種的細胞,參與應答。
(4)可通過胎盤及粘膜:球蛋白G(IgG)能通過胎盤進入胎兒血流中,使胎兒形成自然被動
球蛋白A(IgA)可通過消化道及呼吸道粘膜,是粘膜局部抗感染的主要因素。
(5)具有抗原性:抗體分子是一種蛋白質(zhì),也具有刺機體產(chǎn)生應答的性能。不同的球蛋白分子,各具有不同的抗原性。
(6)抗體對理化因子的抵抗力與一般球蛋白相同:不耐熱,60~70℃即被破壞。各種酶及能使蛋白質(zhì)凝固變性的物質(zhì),均能破壞抗體的作用。抗體可被中性鹽類沉淀。在生產(chǎn)上??捎昧蛩徜@或硫酸鈉從血清中沉淀出含有抗體的球蛋白,再經(jīng)透析法將其純化。
抗體的生活習性:
(1)結(jié)合特異性抗原:抗體與其他球蛋白分子區(qū)別,就在于抗體能與相應抗原發(fā)生特異性結(jié)合,在體內(nèi)導致生理或病理效應;在體外產(chǎn)生各種直接或間接的可見的抗原抗體結(jié)合反應??贵w是靠其分子上的特殊的結(jié)合部位與抗原結(jié)合的。
(2)激活補體:抗體與相應抗原結(jié)合后,借助暴露的補體結(jié)合點去激活補體系統(tǒng)、激發(fā)補體的溶菌、溶細胞等疫作用。
(3)結(jié)合細胞:不同類別的球蛋白,可結(jié)合不同種的細胞,產(chǎn)生不同的疚,參與疫應答。
(4)可通過胎盤及粘膜:球蛋白G(IgG)能通過胎盤進入胎兒血流中,使胎兒形成自然被動疫。疫球蛋白A(IgA)可通過消化道及呼吸道粘膜,是粘膜局部抗感染疫的主要因素。
(5)具有抗原性:抗體分子是一種蛋白質(zhì),也具有刺激機體產(chǎn)生疫應答的性能。不同的疫球蛋白分子,各具有不同的抗原性。
(6)抗體對理化因子的抵抗力與一般球蛋白相同:不耐熱,60~70℃即被破壞。各種酶及能使蛋白質(zhì)凝固變性的物質(zhì),均能破壞抗體的作用。抗體可被中性鹽類沉淀。在生產(chǎn)上常可用硫酸銨或硫酸鈉從疫血清中沉淀出含有抗體的球蛋白,再經(jīng)透析法將其純化。
程序性死亡配體2抗體 規(guī)格:0.1ml 英文::Anti-B7-DC/PDL2/CD273
血管位蛋白樣4/血管生成素樣蛋白-4抗體 規(guī)格: 0.2ml 英文::Anti-ANGPTL4/ANG-4
鈣蛋白酶抗體 規(guī)格: 0.1ml 英文::Anti-Calpain 1
周期素依賴性激酶2抗體 規(guī)格: 0.1ml 英文::Anti-CDK2
c-mer原癌基因酪氨酸激酶抗體 規(guī)格: 0.1ml 英文::Anti-C-Mer/MERTK
脂聯(lián)素受體-1抗體 規(guī)格: 0.1ml 英文::Anti-Adipo R1
相關(guān)死亡促進因子Bad抗體 規(guī)格: 0.1ml 英文::Anti-Bad
活化白細胞粘附分子抗體 規(guī)格: 0.2ml 英文::anti-CD166/ALCAM
細胞表面趨化因子受體1抗體 規(guī)格: 0.2ml 英文::Anti-CXC-R1
絲裂原依賴性癌基因蛋白抗體 規(guī)格: 1ml 英文::anti-DJ-1
磷酸化轉(zhuǎn)錄接頭蛋白EP300抗體3--2-氯-5-甲吡分子式:142.59分子量: C6H7ClN2英文名稱:3- amino -2- -5-CAS號:34552-13-1
4-羥-1-吡唑并[3,4-D]嘧分子式:212.21分子量: C11H8N4O英文名稱:4- hydroxy -1- phenyl [3,4-D]CAS號:21314-17-0
硫酸甲酯鉀分子式:150.2分子量: CH3KO4S英文名稱:Potassium methyl sulfateCAS號:562-54-9
2,5-二甲噻唑分子式:113.18分子量: C5H7NS英文名稱:2,5-二甲噻唑CAS號:4175-66-0
2,8-二三氟甲-4-羥喹啉分子式:281.15分子量: C11H5F6NO英文名稱:2,8- two or three hydroxy -4-CAS號:35853-41-9
弱性深蘭5R英文名稱:Weak acid deep blue 5RCAS號:分子式:分子量:
3,6-二咔唑分子式:319.41分子量: C24H17N英文名稱:3,6- two phenyl carbazoleCAS號:56525-79-2
丙二乙英文名稱:Propylene glycol etherCAS號:1569-02-4分子式:104.15分子量: C5H12O2
吡分子式:79.1分子量: C5H5N英文名稱:PyridineCAS號:110-86-1
3-吡咯啉分子式:69.11分子量: C4H7N英文名稱:3- theCAS號:109-96-6