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熒光技術(shù)的實驗步驟:
一、準備好試劑與儀器:
磷酸鹽緩沖鹽水、熒光標記的抗體溶液、緩沖甘油、搪瓷桶三只、有蓋搪瓷盒一只、熒光顯微鏡、玻片架、濾紙、37℃溫箱等。
二、實驗步驟
1.滴加0.01mol/L,pH7.4的PBS于待檢標本片上,十分鐘后棄去,使標本保持一定濕度。
2.滴加適當稀釋的熒光標記的抗體溶液,使其完全覆蓋標本,置于有蓋搪瓷盒內(nèi),保溫一定時間以三十分鐘為參考。
3.取出玻片,置玻片架上,先用0.01mol/L,pH7.4的PBS沖洗后,再按順序過0.01mol/L,pH7.4的PBS三缸浸泡,每缸三到五分鐘,并不停地搖晃振蕩。
4.取出玻片,用濾紙吸去多余水分,但不使標本干燥,加一滴緩沖甘油,以蓋玻片覆蓋。
5.立即用熒光顯微鏡觀察。觀察標本的特異性熒光強度。
公司專業(yè)供應(yīng)的抗體,抗體是用于化學反應(yīng)、分析化驗、研究實驗、教學實驗、化學配方使用的純凈化學品,品質(zhì)**,價格實惠,多種規(guī)格供應(yīng),售后完善。本公司產(chǎn)品僅用于科研實驗。
產(chǎn)品名稱 |
表皮生長因子受體5抗體 |
英文名稱 |
Anti-EGFR5/CLEC14A |
貨號 |
BH-K013329 |
英文名稱 表皮生長因子受體5抗體
中文名稱 表皮生長因子受體5抗體
別 名 C type lectin domain family 14, member A; C14orf27; CEG1; ClECT and EGF like domain containing protein; EGFR5; EGFR-5; EGFR 5; Epidermal growth factor receptor 5; CLC14_HUMAN.
濃 度 1mg/1ml
規(guī) 格 1mg/1ml
抗體來源 Rabbit
克隆類型 polyclonal
交叉反應(yīng) Human, Mouse, Rat
產(chǎn)品類型 一抗
研究領(lǐng)域 腫瘤 細胞生物 **學
蛋白分子量 predicted molecular weight: 49kDa
性 狀 Lyophilized or Liquid
免 疫 原 KLH conjugated synthetic peptide derived from human EGFR5/CLEC14A
亞 型 IgG
抗體制備過程:
1.材料與試劑
a.提取的動物 Ig
b.弗氏完全佐劑和弗氏不完全佐劑
c.青霉素和鏈霉素
d.實驗動物 兔
e.其它材料及試劑
2、選擇實驗活體。
3、進行動物實驗。
4、試取血樣進行測試,查看效果。
5、如果成功,殺死實驗活體,采集全部血清。
6、純化出抗體。
7、鑒定抗體。胎牛血清(無菌采制)
實驗原理 :
(1)特異性結(jié)合抗原:抗體本身不能直接溶解或殺傷帶有特異抗原的靶細胞,通常需要補體或吞噬細胞等共同發(fā)揮效應(yīng)以病原微生物或?qū)е虏±頁p傷。然而,抗體可通過與病毒或的特異性結(jié)合,直接發(fā)揮中和病毒的作用。
(2)活補體:IgM、IgG1、IgG2和IgG3可通過經(jīng)典途徑激活補體,凝聚的IgA、IgG4和IgE可通過替代途徑激活補體。
(3)結(jié)合細胞:不同類別的球蛋白,可結(jié)合不同種的細胞,參與應(yīng)答。
(4)可通過胎盤及粘膜:球蛋白G(IgG)能通過胎盤進入胎兒血流中,使胎兒形成自然被動
球蛋白A(IgA)可通過消化道及呼吸道粘膜,是粘膜局部抗感染的主要因素。
(5)具有抗原性:抗體分子是一種蛋白質(zhì),也具有刺機體產(chǎn)生應(yīng)答的性能。不同的球蛋白分子,各具有不同的抗原性。
(6)抗體對理化因子的抵抗力與一般球蛋白相同:不耐熱,60~70℃即被破壞。各種酶及能使蛋白質(zhì)凝固變性的物質(zhì),均能破壞抗體的作用??贵w可被中性鹽類沉淀。在生產(chǎn)上??捎昧蛩徜@或硫酸鈉從血清中沉淀出含有抗體的球蛋白,再經(jīng)透析法將其純化。
抗體的生活習性:
(1)結(jié)合特異性抗原:抗體與其他球蛋白分子區(qū)別,就在于抗體能與相應(yīng)抗原發(fā)生特異性結(jié)合,在體內(nèi)導致生理或病理效應(yīng);在體外產(chǎn)生各種直接或間接的可見的抗原抗體結(jié)合反應(yīng)??贵w是靠其分子上的特殊的結(jié)合部位與抗原結(jié)合的。
(2)激活補體:抗體與相應(yīng)抗原結(jié)合后,借助暴露的補體結(jié)合點去激活補體系統(tǒng)、激發(fā)補體的溶菌、溶細胞等疫作用。
(3)結(jié)合細胞:不同類別的球蛋白,可結(jié)合不同種的細胞,產(chǎn)生不同的疚,參與疫應(yīng)答。
(4)可通過胎盤及粘膜:球蛋白G(IgG)能通過胎盤進入胎兒血流中,使胎兒形成自然被動疫。疫球蛋白A(IgA)可通過消化道及呼吸道粘膜,是粘膜局部抗感染疫的主要因素。
(5)具有抗原性:抗體分子是一種蛋白質(zhì),也具有刺激機體產(chǎn)生疫應(yīng)答的性能。不同的疫球蛋白分子,各具有不同的抗原性。
(6)抗體對理化因子的抵抗力與一般球蛋白相同:不耐熱,60~70℃即被破壞。各種酶及能使蛋白質(zhì)凝固變性的物質(zhì),均能破壞抗體的作用。抗體可被中性鹽類沉淀。在生產(chǎn)上??捎昧蛩徜@或硫酸鈉從疫血清中沉淀出含有抗體的球蛋白,再經(jīng)透析法將其純化。
beta-Amyloid(35-42) β淀粉樣肽/Aβ42抗體 0.1ml
Cancer/testis antigen 1B/1A 腫瘤/抗原1B/1A 0.2ml
DACH1 細胞命運決定因子DACH1抗體 0.2ml
Snf1lk/SIK1 絲氨酸/蘇氨酸蛋白激酶SIK1抗體 0.2ml
CKAP4 細胞骨架相關(guān)蛋白4抗體 0.2ml
XPC DNA補充修復(fù)XPC細胞蛋白抗體 0.1ml
TERT/EST2/Telomerase reverse transcriptase 端粒酶相關(guān)蛋白2抗體(端粒酶逆轉(zhuǎn)錄酶) 0.2ml
plant lectin B4/IB4 植物凝集素IB4 0.2ml
USP3 去泛素化酶3抗體 0.2ml
WNT2 信號通路Wnt2抗體 0.2ml
MEI-1 減數(shù)分裂缺陷蛋白1抗體 0.2ml
CARD7/NALP1 凋亡加強結(jié)構(gòu)域蛋白7抗體 0.2ml
Neutrophil Elastase/ELANE 中性粒細胞彈性蛋白酶ELANE抗體 0.2ml
表皮生長因子受體5抗體2-羥-4-甲吡分子式:109.13分子量: C6H7NO英文名稱:2- hydroxy -4- methyl pyridineCAS號:13466-41-6
托吡酯英文名稱:TopiramateCAS號:97240-79-4分子式:339.36分子量: C12H21NO8S
對氟溴分子式:175.01分子量: C6H4BrF英文名稱:FluorobromobenzeneCAS號:460-00-4
3-乙酰-5-溴吡分子式:200.04分子量: C7H6BrNO英文名稱:3- acetyl -5-CAS號:38940-62-4
異丁酸鉀分子式:126.2分子量: C4H7KO2英文名稱:Potassium butyrateCAS號:19455-20-0
2--4-溴嘧分子式:173.999分子量: C4H4BrN3英文名稱:2- amino -4-CAS號:343926-69-2
1,4-丁內(nèi)酯英文名稱:1,4- butyl esterCAS號:96-48-0分子式:86.09分子量: C4H6O2
燦爛甲酚蘭英文名稱:Brilliant cresyl blueCAS號:分子式:分子量:
金橙黃英文名稱:Jin ChenghuangCAS號:33012-29-2分子式:439.21分子量: C12H5N7O12
直接深棕MM英文名稱:Direct dark brown MMCAS號:分子式:分子量: