別    名   Cek 8; CEK8; EK8; Eph A4; EPH receptor A4; EPH-like kinase 8; EphA4; EPHA4_HUMAN; Ephrin receptor Eph A4; Ephrin receptor EphA4; Ephrin type A receptor 4; Ephrin type-A receptor 4; HEK 8; HEK8; hEK8; Receptor protein tyrosine kinase HEK 8; Receptor protein tyrosine kinase HEK8; Receptor protein-tyrosine kinase HEK8; Sek 1; SEK; TYRO 1; TYRO 1 protein tyrosine kinase; TYRO1; Tyrosine protein kinase receptor SEK; Tyrosine protein kinase TYRO1; Tyrosine-protein kinase receptor SEK; Tyrosine-protein kinase TYRO1.
英文名稱  Anti-EphA4 R/Eph receptor A4

中文名稱  酪氨酸蛋白激酶A4受體抗體

濃    度  1mg/1ml

濃    度  1mg/1ml

規(guī)  格  1mg/1ml    

抗體來源  Rabbit  

克隆類型  polyclonal

交叉反應(yīng)  Human, Mouse, Rat

產(chǎn)品類型  一抗

研究領(lǐng)域  腫瘤 **學 生長因子和** 細胞膜受體 

蛋白分子量 predicted molecular weight: 106kDa

性    狀  Lyophilized or Liquid

免 疫 原 KLH conjugated synthetic peptide derived from human EphA4 R

亞    型  IgG 

本公司產(chǎn)品僅用于科研實驗。

抗體的熒光標記法：

（一）基本原理

賴氨酸殘基的游離e-氨基可與FITC(其激發(fā)波長為492nm,發(fā)射光波長為525nm)共價結(jié)合。與FITC結(jié)合的抗體可用為特異性的探針,以測定細胞相應(yīng)抗原的存在。FITC具有很高的量子產(chǎn)量(發(fā)射光與吸收光的比值,0.85)形成的偶聯(lián)物的穩(wěn)定性很好。

（二）儀器和試劑

1.待偶聯(lián)抗體；

2.碳酸氫鈉緩沖液；

3.疊氮鈉；

4.庵氰酸熒光素；

5.電磁攪拌器。

抗體反應(yīng)特點：

1.高度特異性，特異性是抗原抗體反應(yīng)的主要特征，特定抗原決定簇只與特定抗體結(jié)合；

2.可逆性:抗原與抗體結(jié)合形成抗原抗體復合物的過程是一種動態(tài)平衡, 其反應(yīng)式為：Ag+AbAg·Ab；

3.適當濃度和比例；

4.敏感性:在測定血清中某一物質(zhì)的含量時，化學比色法的敏感度為mg/ml水平，酶反應(yīng)測定法的敏感度約為5~10μg/ml，定中凝膠擴散法的敏感度與酶反應(yīng)法相仿。

抗體反應(yīng)的因素：

1.電解質(zhì) ：抗原抗體特異結(jié)合后，膠體粒便可發(fā)生脫水作用，此時易受電解質(zhì)影響，如有適當濃度的電解質(zhì)存在就會使它們失去部分負電荷而相互凝聚，于是出現(xiàn)明顯的凝集或沉淀現(xiàn)象。

2.酸堿度:合適的pH為6-8。

3.溫度:37℃通常是抗原體反應(yīng)溫度。

實驗步驟：

1、石蠟切片，常規(guī)脫蠟至水

2、蒸餾水沖洗，pbs 浸泡5 分鐘（如需采用抗原修復，在此步驟后進行）。

3、3%雙氧水去離子水（無色液體）孵育15-20 分鐘，以消除內(nèi)源性過氧物酶活性。

4、滴加試劑A（藍色液體）室溫孵育15-20 分鐘，傾去，勿洗。

5、滴加適當比例稀釋的一抗，37℃孵育2-3 小時或4℃過夜。

6、PBS 沖洗，3 分鐘3 次。

7、滴加試劑B（黃色液體），室溫或37℃孵育15-20 分鐘。

8、PBS 沖洗，3 分鐘3 次。

9、滴加試劑C（橙色液體），室溫或37℃孵育15-20 分鐘。

10、PBS 沖洗，3 分鐘3 次。

11、顯色劑顯色（DAB 或AEC）

12、自來水充分沖洗。

13、如果需要，可進行復染，脫水，透明。

14、選擇適當?shù)姆馄瑒┓馄?/span>

抗體分子標記技術(shù)：

（一）原理

當應(yīng)用化學氧化法時(NaI)遇強氧化劑,離子被氧化為分子,所**的自由分子可與某些基團進行鹵化反應(yīng)。蛋白質(zhì)分子可進行鹵化反應(yīng)的基團主要為酪氨酸殘基,某些組氨酸殘基也可能進行化。在應(yīng)用胺T( Chloramine T)法的實驗中,所用的氧化劑(1,3,4,6- tetrachloro-3a,6adipheny l-glucoluril)強揮發(fā)性的有機溶劑中。該溶劑加入試管后,先讓其揮發(fā)(即讓氧化劑將試管包被),然后把Na125I和蛋白質(zhì)液加入包被好的試管中,反應(yīng)完成即將混合液移入他管終止反應(yīng)。

（二）準備

1.試劑

經(jīng)親和層析純化的多克隆抗體或單克隆抗體；0.5mol/L磷酸鈉緩沖液,pH7.5；無載體的Na125I3.7GBq/ml(100mCi/ml)的NaOH液；100g/L三醋酸；70%乙醇；新鮮制備的含2mg/m1絡(luò)胺T的0.5mol/L磷酸鈉緩沖液(pH7.5）；胺T反應(yīng)終止緩沖液；

2.儀器

凝膠過濾柱；￥-記數(shù)器；玻璃纖維濾。

（三）操作要點

1.用胺T法進行化,也可在大約pH7.0的緩沖液中進行；

2.如果氧化反應(yīng)損傷蛋白質(zhì)，可將抗體與異硫氰酸熒光素(FITC)偶聯(lián))胺T量減少到0.02mg/m，并將偏重亞硫酸液的濃度降到0.024mg/ml；

3. Iodogen-包被的試管可在干燥器中,于室溫下保存多年；

4.1251標記的抗體,在制備后六周內(nèi)均可使用(1251的半衰期為59.6天）；

5.要注意保證所用的Na1251是新鮮的,陳舊制劑的比活性低；

6.酪氨酸的碘化偶爾會對抗原的抗體結(jié)合位點有干擾,因此降低其結(jié)合能力,但這種情況很少見。

UACA  葡萄膜自身抗原Uaca抗體 0.2ml

RPL5  核糖體蛋白L5抗體 0.2ml

Coronin 3  冠蛋白3抗體 0.2ml

MEOX 2  間充質(zhì)同源盒蛋白2抗體 0.2ml

ETHE1  乙基丙二酸腦病蛋白抗體 0.2ml

SPC25  紡錘體極點構(gòu)成蛋白25抗體 0.2ml

MPP9/MPHOSPH9  有絲分裂細胞周期蛋白MPP9抗體 0.2ml

ANKRD53  錨蛋白重復域53抗體 0.2ml

ICAM5/Telencephalin  細胞間粘附分子5抗體 0.1ml

CDCREL/SEPT5  細胞周期調(diào)控相關(guān)蛋白1 0.2ml

stabilin1/STAB 1  管內(nèi)皮細胞和血管內(nèi)皮細胞受體1抗體 0.2ml

phospho-MST1R(Tyr1353)   磷酸化原癌基因c-Met相關(guān)酪氨酸激酶抗體 0.1ml

HEATR2/HEAT repeat containing protein 2  HEATR2蛋白抗體 0.2ml

酪氨酸蛋白激酶A4受體抗體2-白氫溴物分子式：264.13分子量： C11H9N3·HBr英文名稱：2- - white Dingqing bromideCAS號：40835-96-9

鐵鉀分子式：329.25分子量： K3FeC6N6英文名稱：Potassium ferricyanideCAS號：13746-66-2

3-（1-嗪）-1，2-并異噻唑分子式：219.31分子量： C11H13N3S英文名稱：3- (1- -1, 2- piperazine) benzisothiazoleCAS號：87691-87-0

直接湖藍6B英文名稱：Direct blue 6BCAS號：259444分子式：992.8分子量： C34H24N6Na4O16S4

番瀉苷B英文名稱：The BCAS號：128-57-4分子式：862.73912分子量：C43H38O20

2-氯-5-硝甲分子式：171.58分子量： C7H6ClNO2英文名稱：2- -5- nitro tolueneCAS號：13290-74-9

2,2'-雙((4S)-4-芐-2-惡唑啉)分子式：320.39分子量： C20H20N2O2英文名稱：2,2'- ((4S) - 4 - benzyl - 2 - oxazoline)CAS號：133463-88-4

錫酸鉀分子式：298.95分子量： K2SnO3 ·3H2O英文名稱：Potassium tinCAS號：12125-03-0

1-(4-氟芐)-2-氯并咪唑分子式：260.69分子量： C14H10ClFN2英文名稱：1- (4-) -2-CAS號：84946-20-3

1-溴-4-異丙分子式：199.09分子量： C9H11Br英文名稱：1- -4- ISOCAS號：586-61-8

抗體的種類：

抗體是在抗原刺激下產(chǎn)生的，體液性抗體由B淋細胞系產(chǎn)生。根據(jù)其化學結(jié)構(gòu)和抗原的不同可分為IgG、IgM、IgA、 IgE和IgD5種類型.目前對疫球蛋白G、A、M、E了解較多，對D的功能了解較少。

（1） IgG：是血清中濃度大的一類球蛋白，約占疫球蛋白含量的70～80%，50%分布于血漿。機體受到抗原初次刺激后，其產(chǎn)生時間僅次于IgM。在抗體介導的抗感染免中起主要作用。IgG是球蛋白單體，分子量16萬～18萬，可以通過兔的胎盤，但不能通過豬和牛的胎盤。在體內(nèi)可以有效地抵抗**、病毒等微生物侵襲。在體外的血清學反應(yīng)中，參與沉淀反應(yīng)、凝集反應(yīng)、補體結(jié)合反應(yīng)和中和反應(yīng)。

（2） IgM：由5個球蛋白單位組成的五聚體，在血清中的含量僅次于IgG，分子量90萬，是體內(nèi)大的球蛋白?？乖醮未碳C體后，IgM出現(xiàn)早,在血清中的含量僅次于IgG，主要分布在血管內(nèi)，可以通過激活補體發(fā)揮溶菌、溶細胞及中和病毒的作用。因其是五聚體，免作用很強，是IgG的100倍，但由于含量僅為IgG的1/10，且持續(xù)時間短，所以在抗感染疫中不能起主要作用。在體外的血清學反應(yīng)中，參與凝集反應(yīng)和補體結(jié)合反應(yīng)。

（3） IgA：有單體和雙體兩種形式。單體存在于血清中，分子量約為17萬，亦稱為血清型IgA，有**和抗病毒作用。雙體主要存在于外分泌液中，如唾液、淚液、初乳、氣管分泌液，以初乳中的含量高。雙體IgA亦稱為分泌型IgA，由存在于粘膜和組織上的漿細胞產(chǎn)生，分子量40萬，含量較單體高6～８倍，是粘膜的重要防御因素，可以阻止**或病毒吸附于粘膜表面。

（4） IgE：是一種特殊的糖蛋白，為單位體結(jié)構(gòu)，分子量19萬，由消化道、呼吸道粘膜固有層及局部結(jié)中的漿細胞所形成，在血清中含量甚微，是一種致敏抗體，容易吸附在**表面，當與相應(yīng)抗原結(jié)合所引起過敏反應(yīng)。在機體抵抗**和病毒的感染中幾乎無作用。