抗體反應特點：

1.高度特異性，特異性是抗原抗體反應的主要特征，特定抗原決定簇只與特定抗體結(jié)合；

2.可逆性:抗原與抗體結(jié)合形成抗原抗體復合物的過程是一種動態(tài)平衡, 其反應式為：Ag+AbAg·Ab；

3.適當濃度和比例；

4.敏感性:在測定血清中某一物質(zhì)的含量時，化學比色法的敏感度為mg/ml水平，酶反應測定法的敏感度約為5~10μg/ml，定中凝膠擴散法的敏感度與酶反應法相仿。

抗體反應的因素：

1.電解質(zhì) ：抗原抗體特異結(jié)合后，膠體粒便可發(fā)生脫水作用，此時易受電解質(zhì)影響，如有適當濃度的電解質(zhì)存在就會使它們失去部分負電荷而相互凝聚，于是出現(xiàn)明顯的凝集或沉淀現(xiàn)象。

2.酸堿度:合適的pH為6-8。

3.溫度:37℃通常是抗原體反應溫度。

別    名   ERK/MAPK(phospho T202/Y204); p44/42 MAP Kinase(Phospho-Thr202); ERK 1; ERK; ERK-1; ERK1; Extracellular Signal Regulated Kinase 1; Extracellular signal related kinase 1; Extracellular signal-regulated kinase 1; HGNC6877; HS44KDAP; HUMKER1A; MAP kinase 1; MK03_RAT; MAP Kinase; MAP kinase isoform p44; MAPK 1; MAPK; MAPK1; MAPK3; MGC20180; Mitogen-activated protein kinase 1; OTTHUMP00000174538; OTTHUMP00000174541; p44 ERK1; p44 MAPK; p44-ERK1; p44-MAPK; P44ERK1; P44MAPK;
英文名稱  Anti-phospho-ERK1(Thr202/Tyr204)

中文名稱  磷酸化絲裂原活化蛋白激酶1抗體

濃    度  1mg/1ml

濃    度  1mg/1ml

規(guī)  格  1mg/1ml    

抗體來源  Rabbit  

克隆類型  polyclonal

交叉反應  Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Cow, Horse, Rabbit, Guinea Pig

產(chǎn)品類型  一抗  磷酸化抗體

研究領域  **學 神經(jīng)生物學 信號轉(zhuǎn)導 干細胞 激酶和磷酸酶 

蛋白分子量 predicted molecular weight: 43kDa

性    狀  Lyophilized or Liquid

免 疫 原 KLH conjugated Synthesised phosphopeptide derived from rat ERK1 around the phosphorylation site of Thr201/204

亞    型  IgG 

本公司產(chǎn)品僅用于科研實驗。

抗體的熒光標記法：

（一）基本原理

賴氨酸殘基的游離e-氨基可與FITC(其激發(fā)波長為492nm,發(fā)射光波長為525nm)共價結(jié)合。與FITC結(jié)合的抗體可用為特異性的探針,以測定細胞相應抗原的存在。FITC具有很高的量子產(chǎn)量(發(fā)射光與吸收光的比值,0.85)形成的偶聯(lián)物的穩(wěn)定性很好。

（二）儀器和試劑

1.待偶聯(lián)抗體；

2.碳酸氫鈉緩沖液；

3.疊氮鈉；

4.庵氰酸熒光素；

5.電磁攪拌器。

實驗步驟：

1、石蠟切片，常規(guī)脫蠟至水

2、蒸餾水沖洗，pbs 浸泡5 分鐘（如需采用抗原修復，在此步驟后進行）。

3、3%雙氧水去離子水（無色液體）孵育15-20 分鐘，以消除內(nèi)源性過氧物酶活性。

4、滴加試劑A（藍色液體）室溫孵育15-20 分鐘，傾去，勿洗。

5、滴加適當比例稀釋的一抗，37℃孵育2-3 小時或4℃過夜。

6、PBS 沖洗，3 分鐘3 次。

7、滴加試劑B（黃色液體），室溫或37℃孵育15-20 分鐘。

8、PBS 沖洗，3 分鐘3 次。

9、滴加試劑C（橙色液體），室溫或37℃孵育15-20 分鐘。

10、PBS 沖洗，3 分鐘3 次。

11、顯色劑顯色（DAB 或AEC）

12、自來水充分沖洗。

13、如果需要，可進行復染，脫水，透明。

14、選擇適當?shù)姆馄瑒┓馄?/span>

抗體分子標記技術：

（一）原理

當應用化學氧化法時(NaI)遇強氧化劑,離子被氧化為分子,所**的自由分子可與某些基團進行鹵化反應。蛋白質(zhì)分子可進行鹵化反應的基團主要為酪氨酸殘基,某些組氨酸殘基也可能進行化。在應用胺T( Chloramine T)法的實驗中,所用的氧化劑(1,3,4,6- tetrachloro-3a,6adipheny l-glucoluril)強揮發(fā)性的有機溶劑中。該溶劑加入試管后,先讓其揮發(fā)(即讓氧化劑將試管包被),然后把Na125I和蛋白質(zhì)液加入包被好的試管中,反應完成即將混合液移入他管終止反應。

（二）準備

1.試劑

經(jīng)親和層析純化的多克隆抗體或單克隆抗體；0.5mol/L磷酸鈉緩沖液,pH7.5；無載體的Na125I3.7GBq/ml(100mCi/ml)的NaOH液；100g/L三醋酸；70%乙醇；新鮮制備的含2mg/m1絡胺T的0.5mol/L磷酸鈉緩沖液(pH7.5）；胺T反應終止緩沖液；

2.儀器

凝膠過濾柱；￥-記數(shù)器；玻璃纖維濾。

（三）操作要點

1.用胺T法進行化,也可在大約pH7.0的緩沖液中進行；

2.如果氧化反應損傷蛋白質(zhì)，可將抗體與異硫氰酸熒光素(FITC)偶聯(lián))胺T量減少到0.02mg/m，并將偏重亞硫酸液的濃度降到0.024mg/ml；

3. Iodogen-包被的試管可在干燥器中,于室溫下保存多年；

4.1251標記的抗體,在制備后六周內(nèi)均可使用(1251的半衰期為59.6天）；

5.要注意保證所用的Na1251是新鮮的,陳舊制劑的比活性低；

6.酪氨酸的碘化偶爾會對抗原的抗體結(jié)合位點有干擾,因此降低其結(jié)合能力,但這種情況很少見。

抗體的種類：

抗體是在抗原刺激下產(chǎn)生的，體液性抗體由B淋細胞系產(chǎn)生。根據(jù)其化學結(jié)構(gòu)和抗原的不同可分為IgG、IgM、IgA、 IgE和IgD5種類型.目前對疫球蛋白G、A、M、E了解較多，對D的功能了解較少。

（1） IgG：是血清中濃度大的一類球蛋白，約占疫球蛋白含量的70～80%，50%分布于血漿。機體受到抗原初次刺激后，其產(chǎn)生時間僅次于IgM。在抗體介導的抗感染免中起主要作用。IgG是球蛋白單體，分子量16萬～18萬，可以通過兔的胎盤，但不能通過豬和牛的胎盤。在體內(nèi)可以有效地抵抗**、病毒等微生物侵襲。在體外的血清學反應中，參與沉淀反應、凝集反應、補體結(jié)合反應和中和反應。

（2） IgM：由5個球蛋白單位組成的五聚體，在血清中的含量僅次于IgG，分子量90萬，是體內(nèi)大的球蛋白?？乖醮未碳C體后，IgM出現(xiàn)早,在血清中的含量僅次于IgG，主要分布在血管內(nèi)，可以通過激活補體發(fā)揮溶菌、溶細胞及中和病毒的作用。因其是五聚體，免作用很強，是IgG的100倍，但由于含量僅為IgG的1/10，且持續(xù)時間短，所以在抗感染疫中不能起主要作用。在體外的血清學反應中，參與凝集反應和補體結(jié)合反應。

（3） IgA：有單體和雙體兩種形式。單體存在于血清中，分子量約為17萬，亦稱為血清型IgA，有**和抗病毒作用。雙體主要存在于外分泌液中，如唾液、淚液、初乳、氣管分泌液，以初乳中的含量高。雙體IgA亦稱為分泌型IgA，由存在于粘膜和組織上的漿細胞產(chǎn)生，分子量40萬，含量較單體高6～８倍，是粘膜的重要防御因素，可以阻止**或病毒吸附于粘膜表面。

（4） IgE：是一種特殊的糖蛋白，為單位體結(jié)構(gòu)，分子量19萬，由消化道、呼吸道粘膜固有層及局部結(jié)中的漿細胞所形成，在血清中含量甚微，是一種致敏抗體，容易吸附在**表面，當與相應抗原結(jié)合所引起過敏反應。在機體抵抗**和病毒的感染中幾乎無作用。

phospho-ANAPC1 (Ser355)  磷酸化細胞周期末期促進復合蛋白APC1抗體 0.1ml

EphA6/Eph receptor A6  酪氨酸蛋白激酶受體A6抗體 0.2ml

HIPK4  同源相互作用蛋白激酶4抗體 0.2ml

NEK1  絲氨酸/蘇氨酸蛋白激酶NEK1抗體 0.2ml

ENC1/KLHL35  外胚層神經(jīng)皮層蛋白1抗體 0.2ml

CCDC96  卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白96抗體 0.2ml

CADM2/IGSF4D/Cell adhesion molecule 2  細胞粘附分子2 0.2ml

Septin 8  細胞分化蛋白SEPT8抗體 0.2ml

Hyp/hydroxyproline  羥脯氨酸抗體 0.2ml

CAPD2/CNAP1  染色體相關蛋白2抗體 0.2ml

Robo2  軸突導向受體蛋白2抗體 0.1ml

UBE2D4  泛素蛋白連接酶D4抗體 0.2ml

FNDC1  Ⅲ型纖維連接蛋白域蛋白1 0.2ml

磷酸化絲裂原活化蛋白激酶1抗體二氫異并呋喃分子式：120.15分子量： C8H8O英文名稱：Two hydrogen ISOCAS號：496-14-0

亞甲藍(無水)英文名稱：Methylene blue (anhydrous)CAS號：61-73-4分子式：319.85分子量： C16H18ClN3S

3--9-乙咔唑(AEC)英文名稱：3- -9- (AEC) - ethylcarbazoleCAS號：132-32-1分子式：210.28分子量： C14H14N2

間氯三氟甲分子式：180.55分子量： C7H4ClF3英文名稱：Between three fCAS號：98-15-7

氘代對二甲-d{10}分子式：116.23分子量： C8D10英文名稱：Deuterated xylene -d{10}CAS號：41051-88-1

1-碘異喹啉分子式：255.06分子量： C9H6IN英文名稱：1- iodideCAS號：19658-77-6

R-效唑分子式：291.78分子量： C15H18ClN3O英文名稱：R-.CAS號：83657-16-3

原甲三乙酯英文名稱：Three ethyl acetateCAS號：122-51-0分子式：148.2分子量： C7H16O3

4,4’-雙[2-(2-甲氧)亞乙]-1,1’-聯(lián)分子式：418.53分子量： C30H26O2英文名稱：4,4 '- bis]-1,1 (2-, [2-, phenyl group), ethylCAS號：40470-68-6

4,4'-二溴-2,2'-聯(lián)吡分子式：313.98分子量： C10H6Br2N2英文名稱：4,4'- dibromo -2,2'- bipyridineCAS號：18511-71-2