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熒光技術(shù)的實驗步驟:
一、準備好試劑與儀器:
磷酸鹽緩沖鹽水、熒光標記的抗體溶液、緩沖甘油、搪瓷桶三只、有蓋搪瓷盒一只、熒光顯微鏡、玻片架、濾紙、37℃溫箱等。
二、實驗步驟
1.滴加0.01mol/L,pH7.4的PBS于待檢標本片上,十分鐘后棄去,使標本保持一定濕度。
2.滴加適當稀釋的熒光標記的抗體溶液,使其完全覆蓋標本,置于有蓋搪瓷盒內(nèi),保溫一定時間以三十分鐘為參考。
3.取出玻片,置玻片架上,先用0.01mol/L,pH7.4的PBS沖洗后,再按順序過0.01mol/L,pH7.4的PBS三缸浸泡,每缸三到五分鐘,并不停地搖晃振蕩。
4.取出玻片,用濾紙吸去多余水分,但不使標本干燥,加一滴緩沖甘油,以蓋玻片覆蓋。
5.立即用熒光顯微鏡觀察。觀察標本的特異性熒光強度。
公司專業(yè)供應(yīng)的抗體,抗體是用于化學反應(yīng)、分析化驗、研究實驗、教學實驗、化學配方使用的純凈化學品,品質(zhì)**,價格實惠,多種規(guī)格供應(yīng),售后完善。本公司產(chǎn)品僅用于科研實驗。
產(chǎn)品名稱 |
表皮生長因子受體III型突變體抗體 |
英文名稱 |
Anti-EGFRvIII |
貨號 |
BH-K013559 |
英文名稱 表皮生長因子受體III型突變體抗體
中文名稱 表皮生長因子受體III型突變體抗體
別 名 GFRvIII; Epidermal growth factor receptor variant type Ⅲ; epidermal growth factor receptor isoform a variant.
濃 度 1mg/1ml
規(guī) 格 1mg/1ml
抗體來源 Rabbit
克隆類型 polyclonal
交叉反應(yīng) Human
產(chǎn)品類型 一抗
研究領(lǐng)域 腫瘤 生長因子和** 細胞膜受體
蛋白分子量 predicted molecular weight: 120kDa
性 狀 Lyophilized or Liquid
免 疫 原 KLH conjugated synthetic peptide derived from human EGFRvIII(11-40aa)
亞 型 IgG
抗體制備過程:
1.材料與試劑
a.提取的動物 Ig
b.弗氏完全佐劑和弗氏不完全佐劑
c.青霉素和鏈霉素
d.實驗動物 兔
e.其它材料及試劑
2、選擇實驗活體。
3、進行動物實驗。
4、試取血樣進行測試,查看效果。
5、如果成功,殺死實驗活體,采集全部血清。
6、純化出抗體。
7、鑒定抗體。胎牛血清(無菌采制)
實驗原理 :
(1)特異性結(jié)合抗原:抗體本身不能直接溶解或殺傷帶有特異抗原的靶細胞,通常需要補體或吞噬細胞等共同發(fā)揮效應(yīng)以病原微生物或?qū)е虏±頁p傷。然而,抗體可通過與病毒或的特異性結(jié)合,直接發(fā)揮中和病毒的作用。
(2)活補體:IgM、IgG1、IgG2和IgG3可通過經(jīng)典途徑激活補體,凝聚的IgA、IgG4和IgE可通過替代途徑激活補體。
(3)結(jié)合細胞:不同類別的球蛋白,可結(jié)合不同種的細胞,參與應(yīng)答。
(4)可通過胎盤及粘膜:球蛋白G(IgG)能通過胎盤進入胎兒血流中,使胎兒形成自然被動
球蛋白A(IgA)可通過消化道及呼吸道粘膜,是粘膜局部抗感染的主要因素。
(5)具有抗原性:抗體分子是一種蛋白質(zhì),也具有刺機體產(chǎn)生應(yīng)答的性能。不同的球蛋白分子,各具有不同的抗原性。
(6)抗體對理化因子的抵抗力與一般球蛋白相同:不耐熱,60~70℃即被破壞。各種酶及能使蛋白質(zhì)凝固變性的物質(zhì),均能破壞抗體的作用??贵w可被中性鹽類沉淀。在生產(chǎn)上常可用硫酸銨或硫酸鈉從血清中沉淀出含有抗體的球蛋白,再經(jīng)透析法將其純化。
抗體的生活習性:
(1)結(jié)合特異性抗原:抗體與其他球蛋白分子區(qū)別,就在于抗體能與相應(yīng)抗原發(fā)生特異性結(jié)合,在體內(nèi)導致生理或病理效應(yīng);在體外產(chǎn)生各種直接或間接的可見的抗原抗體結(jié)合反應(yīng)??贵w是靠其分子上的特殊的結(jié)合部位與抗原結(jié)合的。
(2)激活補體:抗體與相應(yīng)抗原結(jié)合后,借助暴露的補體結(jié)合點去激活補體系統(tǒng)、激發(fā)補體的溶菌、溶細胞等疫作用。
(3)結(jié)合細胞:不同類別的球蛋白,可結(jié)合不同種的細胞,產(chǎn)生不同的疚,參與疫應(yīng)答。
(4)可通過胎盤及粘膜:球蛋白G(IgG)能通過胎盤進入胎兒血流中,使胎兒形成自然被動疫。疫球蛋白A(IgA)可通過消化道及呼吸道粘膜,是粘膜局部抗感染疫的主要因素。
(5)具有抗原性:抗體分子是一種蛋白質(zhì),也具有刺激機體產(chǎn)生疫應(yīng)答的性能。不同的疫球蛋白分子,各具有不同的抗原性。
(6)抗體對理化因子的抵抗力與一般球蛋白相同:不耐熱,60~70℃即被破壞。各種酶及能使蛋白質(zhì)凝固變性的物質(zhì),均能破壞抗體的作用??贵w可被中性鹽類沉淀。在生產(chǎn)上??捎昧蛩徜@或硫酸鈉從疫血清中沉淀出含有抗體的球蛋白,再經(jīng)透析法將其純化。
Nfasc186 神經(jīng)束蛋白186抗體 0.2ml
Bik 促凋亡Bik蛋白抗體 0.1ml
CCR5/CD195 細胞表面趨化因子受體5抗體 0.1ml
phospho-Cdc25B (Ser323) 磷酸化細胞分裂周期蛋白25B抗體 0.1ml
CNR-2/PCDHA6 鈣粘蛋白相關(guān)的神經(jīng)受體2抗體 0.2ml
CTCF 轉(zhuǎn)錄阻抑蛋白CTCF抗體 0.2ml
USP28 泛素特異性蛋白酶28抗體 0.2ml
Aurora A/ARK-1/AURKA 有絲分裂激酶A抗體 0.1ml
CaMK2 beta/CaMK2 gamma 鈣/鈣調(diào)素依賴蛋白激酶2b/2γ抗體 0.1ml
CD34 CD34抗體 0.1ml
Gentamicin 慶大霉素抗體 0.2ml
DNAPK/PRKDC DNA依賴蛋白激酶催化亞基抗體 0.2ml
EGFL7 類表皮生長因子域7抗體 0.1ml
表皮生長因子受體III型突變體抗體1,10-菲羅啉(無水)英文名稱:1,10- (anhydrous)CAS號:66-71-7分子式:180.21分子量: C12H8N2
**砜分子式:106.14分子量: C3H6O2S英文名稱:Three methyl groupCAS號:5687-92-3
**酸鋁分子式:162.03分子量: C3H3AlO6英文名稱:Three formic acidCAS號:7360-53-4
磷酸氫二鉀分子式:228.22分子量: K2HPO4·3H2O英文名稱:Potassium hydrogen phosphateCAS號:16788-57-1
醋異氟潑尼松英文名稱:Isoflupredone acetateCAS號:338-98-7分子式:420.4711632分子量: C23H29FO6
丙英文名稱:Propyl etherCAS號:111-43-3分子式:102.17分子量: C6H14O
氟甲砜分子式:174.19分子量: C7H7FO2S英文名稱:Methyl phenyl groupCAS號:20808-12-2
辛可尼丁英文名稱:Sin Coenen MartinCAS號:485-71-2分子式:294.39分子量:C19H22N2O
2-萘分子式:158.2分子量: C10H10N2英文名稱:2- naphthalene hydrazineCAS號:2243-57-4
2,3-二(對甲)-5-氯四氮唑分子式:362.86分子量: C21H19ClN4英文名稱:2,3- two (p-tolyl) -5- phenyl tetrazolium chlorideCAS號:104497-77-0