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熒光技術的實驗步驟:
一、準備好試劑與儀器:
磷酸鹽緩沖鹽水、熒光標記的抗體溶液、緩沖甘油、搪瓷桶三只、有蓋搪瓷盒一只、熒光顯微鏡、玻片架、濾紙、37℃溫箱等。
二、實驗步驟
1.滴加0.01mol/L,pH7.4的PBS于待檢標本片上,十分鐘后棄去,使標本保持一定濕度。
2.滴加適當稀釋的熒光標記的抗體溶液,使其完全覆蓋標本,置于有蓋搪瓷盒內,保溫一定時間以三十分鐘為參考。
3.取出玻片,置玻片架上,先用0.01mol/L,pH7.4的PBS沖洗后,再按順序過0.01mol/L,pH7.4的PBS三缸浸泡,每缸三到五分鐘,并不停地搖晃振蕩。
4.取出玻片,用濾紙吸去多余水分,但不使標本干燥,加一滴緩沖甘油,以蓋玻片覆蓋。
5.立即用熒光顯微鏡觀察。觀察標本的特異性熒光強度。
公司專業(yè)供應的抗體,抗體是用于化學反應、分析化驗、研究實驗、教學實驗、化學配方使用的純凈化學品,品質**,價格實惠,多種規(guī)格供應,售后完善。本公司產品僅用于科研實驗。
產品名稱 |
磷脂酰基醇蛋白聚糖-5抗體 |
英文名稱 |
Anti-Glypican 5 |
貨號 |
BH-K013799 |
英文名稱 磷脂?;嫉鞍拙厶?5抗體
中文名稱 磷脂酰基醇蛋白聚糖-5抗體
別 名 glypican 5; Glypican 5 precursor; glypican proteoglycan 5; Glypican-5; GPC5; GPC5_HUMAN; Secreted glypican-5.
濃 度 1mg/1ml
規(guī) 格 1mg/1ml
抗體來源 Rabbit
克隆類型 polyclonal
交叉反應 Human, Mouse, Rat, Dog, Pig, Cow, Horse, Rabbit, Guinea Pig
產品類型 一抗
研究領域 細胞生物 **學 信號轉導 細胞骨架
蛋白分子量 predicted molecular weight: 61kDa
性 狀 Lyophilized or Liquid
免 疫 原 KLH conjugated synthetic peptide derived from human Glypican 5
亞 型 IgG
抗體制備過程:
1.材料與試劑
a.提取的動物 Ig
b.弗氏完全佐劑和弗氏不完全佐劑
c.青霉素和鏈霉素
d.實驗動物 兔
e.其它材料及試劑
2、選擇實驗活體。
3、進行動物實驗。
4、試取血樣進行測試,查看效果。
5、如果成功,殺死實驗活體,采集全部血清。
6、純化出抗體。
7、鑒定抗體。胎牛血清(無菌采制)
實驗原理 :
(1)特異性結合抗原:抗體本身不能直接溶解或殺傷帶有特異抗原的靶細胞,通常需要補體或吞噬細胞等共同發(fā)揮效應以病原微生物或導致病理損傷。然而,抗體可通過與病毒或的特異性結合,直接發(fā)揮中和病毒的作用。
(2)活補體:IgM、IgG1、IgG2和IgG3可通過經典途徑激活補體,凝聚的IgA、IgG4和IgE可通過替代途徑激活補體。
(3)結合細胞:不同類別的球蛋白,可結合不同種的細胞,參與應答。
(4)可通過胎盤及粘膜:球蛋白G(IgG)能通過胎盤進入胎兒血流中,使胎兒形成自然被動
球蛋白A(IgA)可通過消化道及呼吸道粘膜,是粘膜局部抗感染的主要因素。
(5)具有抗原性:抗體分子是一種蛋白質,也具有刺機體產生應答的性能。不同的球蛋白分子,各具有不同的抗原性。
(6)抗體對理化因子的抵抗力與一般球蛋白相同:不耐熱,60~70℃即被破壞。各種酶及能使蛋白質凝固變性的物質,均能破壞抗體的作用??贵w可被中性鹽類沉淀。在生產上常可用硫酸銨或硫酸鈉從血清中沉淀出含有抗體的球蛋白,再經透析法將其純化。
抗體的生活習性:
(1)結合特異性抗原:抗體與其他球蛋白分子區(qū)別,就在于抗體能與相應抗原發(fā)生特異性結合,在體內導致生理或病理效應;在體外產生各種直接或間接的可見的抗原抗體結合反應。抗體是靠其分子上的特殊的結合部位與抗原結合的。
(2)激活補體:抗體與相應抗原結合后,借助暴露的補體結合點去激活補體系統(tǒng)、激發(fā)補體的溶菌、溶細胞等疫作用。
(3)結合細胞:不同類別的球蛋白,可結合不同種的細胞,產生不同的疚,參與疫應答。
(4)可通過胎盤及粘膜:球蛋白G(IgG)能通過胎盤進入胎兒血流中,使胎兒形成自然被動疫。疫球蛋白A(IgA)可通過消化道及呼吸道粘膜,是粘膜局部抗感染疫的主要因素。
(5)具有抗原性:抗體分子是一種蛋白質,也具有刺激機體產生疫應答的性能。不同的疫球蛋白分子,各具有不同的抗原性。
(6)抗體對理化因子的抵抗力與一般球蛋白相同:不耐熱,60~70℃即被破壞。各種酶及能使蛋白質凝固變性的物質,均能破壞抗體的作用??贵w可被中性鹽類沉淀。在生產上??捎昧蛩徜@或硫酸鈉從疫血清中沉淀出含有抗體的球蛋白,再經透析法將其純化。
稻梨孢 Pyricularia oryzae扣囊復膜孢酵母 Saccharomycopsis fibuligera
小鼠脈絡膜血管細胞完全培養(yǎng)基厚垣孢普可尼亞 Pochonia chlamydosporia
灰色產色鏈霉 Streptomyces griseochromogenesPVDF膜(0.22um)
釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae紫孢側耳(美味側耳) Pleurotus sapidus
MA, 小鼠星形膠質細胞中慢生華癸根瘤 Mesorhizobium huakuii
苜蓿中華根瘤黃芪黃酮
II型膠原酶(含100mL酶解緩沖液)RN-s, 大鼠紋狀體神經元
藤倉赤霉 Gibberella fujikuroi爪哇根霉
人星形膠質細胞小鼠腮腺細胞完全培養(yǎng)基
鼠李糖桿 Lactobacillus rhamnosus異常漢遜酵母異常變種 Hansenula anomala var. anomala
人腸微血管內皮細胞完全培養(yǎng)基米曲霉 Aspergillus oryzae
中華鱉心肌來源細胞植物桿 Lactobacillus plantarum
異常漢遜酵母 Hansenula anomala人結直腸腺細胞
磷脂?;嫉鞍拙厶?5抗體賴脯胰島素 英文名稱:Insulin lispro 保存:-20℃ 規(guī)格:25mg/支
科博肽 英文名稱:Kobo 保存:-20℃ 規(guī)格:5mg/支
磷酸轉乙酰化酶 英文名稱:Phosphotransacetylase enzyme 保存:-20℃ 規(guī)格:120U /支
環(huán)丙沙星雜質E 英文名稱:Ciprofloxacin impurity E 保存:-20℃ 規(guī)格:50mg
頭孢孟多酯 英文名稱:Cefamandole Nafate 保存:-20℃ 規(guī)格:100mg
帕珠沙星 英文名稱:Pazufloxacin 保存:-20℃ 規(guī)格:100mg
氨芐西林 英文名稱:Ampicillin 保存:-20℃ 規(guī)格:100mg
土 英文名稱:Oxytetracycline 保存:-20℃ 規(guī)格:200mg
羊開口 英文名稱:Sheep openings 保存:-20℃ 規(guī)格:5g
五倍子(青麩楊) 英文名稱:Galla chinensis (Rhus potaninii) 保存:-20℃ 規(guī)格:1g
熊膽粉 英文名稱:Bear bile powder 保存:-20℃ 規(guī)格:0.1g
廣天仙子 英文名稱:Wide sky Fairy 保存:-20℃ 規(guī)格:1g