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熒光技術(shù)的實驗步驟:
一、準備好試劑與儀器:
磷酸鹽緩沖鹽水、熒光標記的抗體溶液、緩沖甘油、搪瓷桶三只、有蓋搪瓷盒一只、熒光顯微鏡、玻片架、濾紙、37℃溫箱等。
二、實驗步驟
1.滴加0.01mol/L,pH7.4的PBS于待檢標本片上,十分鐘后棄去,使標本保持一定濕度。
2.滴加適當稀釋的熒光標記的抗體溶液,使其完全覆蓋標本,置于有蓋搪瓷盒內(nèi),保溫一定時間以三十分鐘為參考。
3.取出玻片,置玻片架上,先用0.01mol/L,pH7.4的PBS沖洗后,再按順序過0.01mol/L,pH7.4的PBS三缸浸泡,每缸三到五分鐘,并不停地搖晃振蕩。
4.取出玻片,用濾紙吸去多余水分,但不使標本干燥,加一滴緩沖甘油,以蓋玻片覆蓋。
5.立即用熒光顯微鏡觀察。觀察標本的特異性熒光強度。
公司專業(yè)供應(yīng)的抗體,抗體是用于化學反應(yīng)、分析化驗、研究實驗、教學實驗、化學配方使用的純凈化學品,品質(zhì)**,價格實惠,多種規(guī)格供應(yīng),售后完善。本公司產(chǎn)品僅用于科研實驗。
產(chǎn)品名稱 |
G蛋白αS抗體(鳥嘌呤核苷酸結(jié)合蛋白Gα s) |
英文名稱 |
Anti-G protein alpha S |
貨號 |
BH-K013847 |
英文名稱 G蛋白αS抗體(鳥嘌呤核苷酸結(jié)合蛋白Gα s)
中文名稱 G蛋白αS抗體(鳥嘌呤核苷酸結(jié)合蛋白Gα s)
別 名 Adenylate cyclase stimulating G alpha protein; AHO; Alternative gene product encoded by XL exon; Extra large alphas protein; GNAS; GNAS complex locus; GNAS1; GPSA; Gs alpha subunit; GSA; GSP; Guanine nucleotide binding protein (G protein) alpha stimulating activity polypeptide 1; Guanine nucleotide binding protein alpha stimulating activity polypeptide 1; Guanine nucleotide binding protein G(s) subunit alpha isoforms short; Guanine nucleotide binding protein G(s) subunit alpha isoforms XLas; Guanine nucleotide regulatory protein; MGC33735; NESP; NESP55; Neuroendocrine secretory protein; PHP1A; PHP1B; POH; Protein ALEX; SCG6; Secretogranin VI; XLalphas; XLas; C20orf45; dJ309F20.1.1; dJ806M20.3.3; GNAS1_HUMAN.
濃 度 1mg/1ml
規(guī) 格 1mg/1ml
抗體來源 Rabbit
克隆類型 polyclonal
交叉反應(yīng) Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Pig, Cow, Horse, Rabbit
產(chǎn)品類型 一抗
研究領(lǐng)域 腫瘤 細胞生物 **學 轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子 結(jié)合蛋白
蛋白分子量 predicted molecular weight: 111kDa
性 狀 Lyophilized or Liquid
免 疫 原 KLH conjugated synthetic peptide derived from human G protein alpha S
亞 型 IgG
抗體制備過程:
1.材料與試劑
a.提取的動物 Ig
b.弗氏完全佐劑和弗氏不完全佐劑
c.青霉素和鏈霉素
d.實驗動物 兔
e.其它材料及試劑
2、選擇實驗活體。
3、進行動物實驗。
4、試取血樣進行測試,查看效果。
5、如果成功,殺死實驗活體,采集全部血清。
6、純化出抗體。
7、鑒定抗體。胎牛血清(無菌采制)
實驗原理 :
(1)特異性結(jié)合抗原:抗體本身不能直接溶解或殺傷帶有特異抗原的靶細胞,通常需要補體或吞噬細胞等共同發(fā)揮效應(yīng)以病原微生物或?qū)е虏±頁p傷。然而,抗體可通過與病毒或的特異性結(jié)合,直接發(fā)揮中和病毒的作用。
(2)活補體:IgM、IgG1、IgG2和IgG3可通過經(jīng)典途徑激活補體,凝聚的IgA、IgG4和IgE可通過替代途徑激活補體。
(3)結(jié)合細胞:不同類別的球蛋白,可結(jié)合不同種的細胞,參與應(yīng)答。
(4)可通過胎盤及粘膜:球蛋白G(IgG)能通過胎盤進入胎兒血流中,使胎兒形成自然被動
球蛋白A(IgA)可通過消化道及呼吸道粘膜,是粘膜局部抗感染的主要因素。
(5)具有抗原性:抗體分子是一種蛋白質(zhì),也具有刺機體產(chǎn)生應(yīng)答的性能。不同的球蛋白分子,各具有不同的抗原性。
(6)抗體對理化因子的抵抗力與一般球蛋白相同:不耐熱,60~70℃即被破壞。各種酶及能使蛋白質(zhì)凝固變性的物質(zhì),均能破壞抗體的作用??贵w可被中性鹽類沉淀。在生產(chǎn)上常可用硫酸銨或硫酸鈉從血清中沉淀出含有抗體的球蛋白,再經(jīng)透析法將其純化。
抗體的生活習性:
(1)結(jié)合特異性抗原:抗體與其他球蛋白分子區(qū)別,就在于抗體能與相應(yīng)抗原發(fā)生特異性結(jié)合,在體內(nèi)導(dǎo)致生理或病理效應(yīng);在體外產(chǎn)生各種直接或間接的可見的抗原抗體結(jié)合反應(yīng)??贵w是靠其分子上的特殊的結(jié)合部位與抗原結(jié)合的。
(2)激活補體:抗體與相應(yīng)抗原結(jié)合后,借助暴露的補體結(jié)合點去激活補體系統(tǒng)、激發(fā)補體的溶菌、溶細胞等疫作用。
(3)結(jié)合細胞:不同類別的球蛋白,可結(jié)合不同種的細胞,產(chǎn)生不同的疚,參與疫應(yīng)答。
(4)可通過胎盤及粘膜:球蛋白G(IgG)能通過胎盤進入胎兒血流中,使胎兒形成自然被動疫。疫球蛋白A(IgA)可通過消化道及呼吸道粘膜,是粘膜局部抗感染疫的主要因素。
(5)具有抗原性:抗體分子是一種蛋白質(zhì),也具有刺激機體產(chǎn)生疫應(yīng)答的性能。不同的疫球蛋白分子,各具有不同的抗原性。
(6)抗體對理化因子的抵抗力與一般球蛋白相同:不耐熱,60~70℃即被破壞。各種酶及能使蛋白質(zhì)凝固變性的物質(zhì),均能破壞抗體的作用。抗體可被中性鹽類沉淀。在生產(chǎn)上??捎昧蛩徜@或硫酸鈉從疫血清中沉淀出含有抗體的球蛋白,再經(jīng)透析法將其純化。
HET-1A, 人食管上皮細胞大鼠肺血管平滑肌細胞完全培養(yǎng)基
赭曲霉 Aspergillus ochraceusBxPC-3, 人原位胰腺腺細胞株
黑曲霉 Aspergillus niger釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae
蘇云金芽孢桿 Bacillus thuringiensisJAR(人胎盤絨毛膜細胞)
HAN(人羊膜細胞)熱帶假絲酵母 Candida tropicalis
珊瑚色諾卡氏 Nocardia corallina肉桂色曲霉 Aspergillus cinnamomeus
豇豆慢生根瘤 Bradyrhizobium vigna釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae
大鼠腎動脈平滑肌細胞完全培養(yǎng)基J774A.1(小鼠單核巨噬細胞)
酸球霍氏亞種 Lactococcus lactis subsp. Hordniae釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae
柄鏈格孢=柄格孢 Alternaria longipes糙皮側(cè)耳 Pleurotus ostreatus
人胚肺成纖維細胞DU 145, 人前列腺細胞
大鼠肺大靜脈內(nèi)皮細胞完全培養(yǎng)基地衣芽孢桿 Bacillus licheniformis
新型隱球酵母 Cryptococcus neoformans香菇 Lentinula edodes
G蛋白αS抗體(鳥嘌呤核苷酸結(jié)合蛋白Gα s)一磷酸腺苷鈉 英文名稱:Adenosine monophosphate sodium 保存:-20℃ 規(guī)格:20mg/支
人胰島素 英文名稱:Human insulin 保存:-20℃ 規(guī)格:2mg/支
玻璃酸酶 英文名稱:Hyaluronidase 保存:-20℃ 規(guī)格:200 IU/支
拉氧頭孢 英文名稱:Latamoxef 保存:-20℃ 規(guī)格:100mg
加替沙星 英文名稱:Gatifloxacin 保存:-20℃ 規(guī)格:100mg
環(huán)丙沙星 英文名稱:Ciprofloxacin 保存:-20℃ 規(guī)格:100mg
4-差向四環(huán)素 英文名稱:4 - epitetracycline 保存:-20℃ 規(guī)格:50mg
乙酸乙酯 英文名稱:Ethyl acetate 保存:-20℃ 規(guī)格:1ml
紫蘇子 英文名稱:Zi Suzi 保存:-20℃ 規(guī)格:1g
戰(zhàn)骨 英文名稱:War bone 保存:-20℃ 規(guī)格:8g
酸棗仁 英文名稱:Semen Ziziphi Spinosae 保存:-20℃ 規(guī)格:1g
朱砂根 英文名稱:Ardisia crenata 保存:-20℃ 規(guī)格:1g