熒光技術(shù)的實驗步驟：

一、準(zhǔn)備好試劑與儀器：

磷酸鹽緩沖鹽水、熒光標(biāo)記的抗體溶液、緩沖甘油、搪瓷桶三只、有蓋搪瓷盒一只、熒光顯微鏡、玻片架、濾紙、37℃溫箱等。

二、實驗步驟

1.滴加0.01mol/L，pH7.4的PBS于待檢標(biāo)本片上，十分鐘后棄去，使標(biāo)本保持一定濕度。

2.滴加適當(dāng)稀釋的熒光標(biāo)記的抗體溶液，使其完全覆蓋標(biāo)本，置于有蓋搪瓷盒內(nèi)，保溫一定時間以三十分鐘為參考。

3.取出玻片，置玻片架上，先用0.01mol/L，pH7.4的PBS沖洗后，再按順序過0.01mol/L，pH7.4的PBS三缸浸泡，每缸三到五分鐘，并不停地?fù)u晃振蕩。

4.取出玻片，用濾紙吸去多余水分，但不使標(biāo)本干燥，加一滴緩沖甘油，以蓋玻片覆蓋。

5.立即用熒光顯微鏡觀察。觀察標(biāo)本的特異性熒光強(qiáng)度。

公司專業(yè)供應(yīng)的抗體，抗體是用于化學(xué)反應(yīng)、分析化驗、研究實驗、教學(xué)實驗、化學(xué)配方使用的純凈化學(xué)品，品質(zhì)**，價格實惠，多種規(guī)格供應(yīng)，售后完善。本公司產(chǎn)品僅用于科研實驗。

英文名稱  Anti-ID4

中文名稱  DNA結(jié)合抑制因子4抗體

別    名  bHLHb27; Class B basic helix-loop-helix protein 27; DNA binding protein inhibitor ID 4; DNA binding protein inhibitor ID4; DNA-binding protein inhibitor ID-4; ID 4; Id4; ID4_HUMAN; IDB4; Inhibitor of DNA binding 4; Inhibitor of DNA binding 4 dominant negative helix loop helix protein.

濃    度  1mg/1ml

規(guī)  格  1mg/1ml    

抗體來源  Rabbit  

克隆類型  polyclonal

交叉反應(yīng)  Human, Mouse, Rat, Dog, Pig

產(chǎn)品類型  一抗

研究領(lǐng)域  細(xì)胞生物 信號轉(zhuǎn)導(dǎo) 干細(xì)胞 表觀遺傳學(xué) 

蛋白分子量 predicted molecular weight: 18kDa

性    狀  Lyophilized or Liquid

免 疫 原 KLH conjugated synthetic peptide derived from human ID4

亞    型  IgG 

抗體制備過程：

1.材料與試劑

  a．提取的動物 Ig

  b．弗氏完全佐劑和弗氏不完全佐劑

  c．青霉素和鏈霉素

  d．實驗動物 兔

  e．其它材料及試劑

2、選擇實驗活體。

3、進(jìn)行動物實驗。

4、試取血樣進(jìn)行測試，查看效果。

5、如果成功，殺死實驗活體，采集全部血清。

6、純化出抗體。

7、鑒定抗體。胎牛血清（無菌采制）

實驗原理 :

（1）特異性結(jié)合抗原：抗體本身不能直接溶解或殺傷帶有特異抗原的靶細(xì)胞，通常需要補(bǔ)體或吞噬細(xì)胞等共同發(fā)揮效應(yīng)以病原微生物或?qū)е虏±頁p傷。然而，抗體可通過與病毒或的特異性結(jié)合，直接發(fā)揮中和病毒的作用。 

（2）活補(bǔ)體：IgM、IgG1、IgG2和IgG3可通過經(jīng)典途徑激活補(bǔ)體，凝聚的IgA、IgG4和IgE可通過替代途徑激活補(bǔ)體。 

（3）結(jié)合細(xì)胞：不同類別的球蛋白，可結(jié)合不同種的細(xì)胞，參與應(yīng)答。 

（4）可通過胎盤及粘膜：球蛋白G（IgG）能通過胎盤進(jìn)入胎兒血流中，使胎兒形成自然被動

球蛋白A（IgA）可通過消化道及呼吸道粘膜，是粘膜局部抗感染的主要因素。 

（5）具有抗原性：抗體分子是一種蛋白質(zhì)，也具有刺機(jī)體產(chǎn)生應(yīng)答的性能。不同的球蛋白分子，各具有不同的抗原性。 

（6）抗體對理化因子的抵抗力與一般球蛋白相同：不耐熱，60～70℃即被破壞。各種酶及能使蛋白質(zhì)凝固變性的物質(zhì)，均能破壞抗體的作用?？贵w可被中性鹽類沉淀。在生產(chǎn)上?？捎昧蛩徜@或硫酸鈉從血清中沉淀出含有抗體的球蛋白，再經(jīng)透析法將其純化。

抗體的生活習(xí)性：

(1)結(jié)合特異性抗原：抗體與其他球蛋白分子區(qū)別，就在于抗體能與相應(yīng)抗原發(fā)生特異性結(jié)合，在體內(nèi)導(dǎo)致生理或病理效應(yīng);在體外產(chǎn)生各種直接或間接的可見的抗原抗體結(jié)合反應(yīng)?？贵w是靠其分子上的特殊的結(jié)合部位與抗原結(jié)合的。

(2)激活補(bǔ)體：抗體與相應(yīng)抗原結(jié)合后，借助暴露的補(bǔ)體結(jié)合點去激活補(bǔ)體系統(tǒng)、激發(fā)補(bǔ)體的溶菌、溶細(xì)胞等疫作用。

(3)結(jié)合細(xì)胞：不同類別的球蛋白，可結(jié)合不同種的細(xì)胞，產(chǎn)生不同的疚，參與疫應(yīng)答。

(4)可通過胎盤及粘膜：球蛋白G(IgG)能通過胎盤進(jìn)入胎兒血流中，使胎兒形成自然被動疫。疫球蛋白A(IgA)可通過消化道及呼吸道粘膜，是粘膜局部抗感染疫的主要因素。

(5)具有抗原性：抗體分子是一種蛋白質(zhì)，也具有刺激機(jī)體產(chǎn)生疫應(yīng)答的性能。不同的疫球蛋白分子，各具有不同的抗原性。

(6)抗體對理化因子的抵抗力與一般球蛋白相同：不耐熱，60～70℃即被破壞。各種酶及能使蛋白質(zhì)凝固變性的物質(zhì)，均能破壞抗體的作用。抗體可被中性鹽類沉淀。在生產(chǎn)上?？捎昧蛩徜@或硫酸鈉從疫血清中沉淀出含有抗體的球蛋白，再經(jīng)透析法將其純化。

Hydrazine sulfate salt 硫酸肼25g瓶

超濾離心管 0.5ml-100KD0.5ml個

4×SDS-PAGE分離膠緩沖液(PH=8.8)100ml瓶

T型涂布棒(推樣器）5支滅包

ADPG 腺苷二磷酸葡萄糖10mg瓶

羊抗豬IgG（血清）0.5ml支

(-)-Menthone (-)-薄荷酮14073-97-320mg

Pregnenolone 孕甾烯醇酮145-13-120mg

內(nèi)劑100ml瓶

Wilforlide A 雷公藤內(nèi)酯甲84104-71-220mg

PVPP 聚乙烯聚吡咯烷酮100g瓶

Marker I DNA ladder50T支

Brazilin 巴西蘇木素474-07-710mg

DNA結(jié)合抑制因子4抗體楊氏檸檬酸桿 Citrobacter youngae人成纖維完全培養(yǎng)基

大鼠腎管狀上皮完全培養(yǎng)基靈芝 Ganoderma lucidium

丙酮丁醇梭 Clostridium acetobutylicum小鼠氣管上皮完全培養(yǎng)基

釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae紫孢側(cè)耳(美味側(cè)耳) Pleurotus sapidus

厚垣孢普可尼亞 Pochonia chlamydosporaLS-174T(人結(jié)腸腺)

小鼠腎小球內(nèi)皮完全培養(yǎng)基武夷小單孢 Micromonospora wuyiensis

小鼠關(guān)節(jié)軟骨完全培養(yǎng)基戊糖桿 Lactobacillus pentosus

地衣芽孢桿 Bacillus licheniformis大鼠肝

光帽鱗傘 Pholiota nameko群生殼 Dothiorella gregaria

PANC-1(人胰腺)香菇 Lentinula edodes

桿屬 Lactobacillus sp.植物桿 Lactobacillus plantarum