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熒光技術(shù)的實驗步驟:
一、準備好試劑與儀器:
磷酸鹽緩沖鹽水、熒光標記的抗體溶液、緩沖甘油、搪瓷桶三只、有蓋搪瓷盒一只、熒光顯微鏡、玻片架、濾紙、37℃溫箱等。
二、實驗步驟
1.滴加0.01mol/L,pH7.4的PBS于待檢標本片上,十分鐘后棄去,使標本保持一定濕度。
2.滴加適當稀釋的熒光標記的抗體溶液,使其完全覆蓋標本,置于有蓋搪瓷盒內(nèi),保溫一定時間以三十分鐘為參考。
3.取出玻片,置玻片架上,先用0.01mol/L,pH7.4的PBS沖洗后,再按順序過0.01mol/L,pH7.4的PBS三缸浸泡,每缸三到五分鐘,并不停地搖晃振蕩。
4.取出玻片,用濾紙吸去多余水分,但不使標本干燥,加一滴緩沖甘油,以蓋玻片覆蓋。
5.立即用熒光顯微鏡觀察。觀察標本的特異性熒光強度。
公司專業(yè)供應的抗體,抗體是用于化學反應、分析化驗、研究實驗、教學實驗、化學配方使用的純凈化學品,品質(zhì)**,價格實惠,多種規(guī)格供應,售后完善。本公司產(chǎn)品僅用于科研實驗。
產(chǎn)品名稱 |
兔抗人γ-鏈 |
英文名稱 |
Anti-Rabbit Anti-IgG heavy chain constant region |
貨號 |
BH-K014377 |
英文名稱 Anti-Rabbit Anti-IgG heavy chain constant region
中文名稱 兔抗人γ-鏈
別 名 Rabbit Anti-IgG heavy chain constant region
濃 度 10mg/1ml
規(guī) 格 10mg/1ml
抗體來源 Rabbit
克隆類型 polyclonal
交叉反應 hu
產(chǎn)品類型 一抗
研究領(lǐng)域 研究領(lǐng)域
蛋白分子量 predicted molecular weight: 52kDa
性 狀 Lyophilized or Liquid
免 疫 原 Full length plasma protein
亞 型 IgG
抗體制備過程:
1.材料與試劑
a.提取的動物 Ig
b.弗氏完全佐劑和弗氏不完全佐劑
c.青霉素和鏈霉素
d.實驗動物 兔
e.其它材料及試劑
2、選擇實驗活體。
3、進行動物實驗。
4、試取血樣進行測試,查看效果。
5、如果成功,殺死實驗活體,采集全部血清。
6、純化出抗體。
7、鑒定抗體。胎牛血清(無菌采制)
實驗原理 :
(1)特異性結(jié)合抗原:抗體本身不能直接溶解或殺傷帶有特異抗原的靶細胞,通常需要補體或吞噬細胞等共同發(fā)揮效應以病原微生物或?qū)е虏±頁p傷。然而,抗體可通過與病毒或的特異性結(jié)合,直接發(fā)揮中和病毒的作用。
(2)活補體:IgM、IgG1、IgG2和IgG3可通過經(jīng)典途徑激活補體,凝聚的IgA、IgG4和IgE可通過替代途徑激活補體。
(3)結(jié)合細胞:不同類別的球蛋白,可結(jié)合不同種的細胞,參與應答。
(4)可通過胎盤及粘膜:球蛋白G(IgG)能通過胎盤進入胎兒血流中,使胎兒形成自然被動
球蛋白A(IgA)可通過消化道及呼吸道粘膜,是粘膜局部抗感染的主要因素。
(5)具有抗原性:抗體分子是一種蛋白質(zhì),也具有刺機體產(chǎn)生應答的性能。不同的球蛋白分子,各具有不同的抗原性。
(6)抗體對理化因子的抵抗力與一般球蛋白相同:不耐熱,60~70℃即被破壞。各種酶及能使蛋白質(zhì)凝固變性的物質(zhì),均能破壞抗體的作用。抗體可被中性鹽類沉淀。在生產(chǎn)上??捎昧蛩徜@或硫酸鈉從血清中沉淀出含有抗體的球蛋白,再經(jīng)透析法將其純化。
抗體的生活習性:
(1)結(jié)合特異性抗原:抗體與其他球蛋白分子區(qū)別,就在于抗體能與相應抗原發(fā)生特異性結(jié)合,在體內(nèi)導致生理或病理效應;在體外產(chǎn)生各種直接或間接的可見的抗原抗體結(jié)合反應。抗體是靠其分子上的特殊的結(jié)合部位與抗原結(jié)合的。
(2)激活補體:抗體與相應抗原結(jié)合后,借助暴露的補體結(jié)合點去激活補體系統(tǒng)、激發(fā)補體的溶菌、溶細胞等疫作用。
(3)結(jié)合細胞:不同類別的球蛋白,可結(jié)合不同種的細胞,產(chǎn)生不同的疚,參與疫應答。
(4)可通過胎盤及粘膜:球蛋白G(IgG)能通過胎盤進入胎兒血流中,使胎兒形成自然被動疫。疫球蛋白A(IgA)可通過消化道及呼吸道粘膜,是粘膜局部抗感染疫的主要因素。
(5)具有抗原性:抗體分子是一種蛋白質(zhì),也具有刺激機體產(chǎn)生疫應答的性能。不同的疫球蛋白分子,各具有不同的抗原性。
(6)抗體對理化因子的抵抗力與一般球蛋白相同:不耐熱,60~70℃即被破壞。各種酶及能使蛋白質(zhì)凝固變性的物質(zhì),均能破壞抗體的作用。抗體可被中性鹽類沉淀。在生產(chǎn)上常可用硫酸銨或硫酸鈉從疫血清中沉淀出含有抗體的球蛋白,再經(jīng)透析法將其純化。
補體成分4a(C4a)重組蛋白英文名稱:Recombinant Complement Component 4a (C4a)
Leonurine hydrochloride 鹽酸益母草堿24697-74-320mg
L-Glutamic acid L-谷氨酸56-86-0200mg
兔抗IgG(血清)0.5ml支
5ml芬蘭槍頭300只包
預染超低分子量蛋白Marker20T支
Sulfamonomethoxine 磺胺間甲氧嘧啶5g瓶
人胃腸道間質(zhì)瘤英文名稱:GIST
Alliin 蒜氨酸556-27-420mg
TSA Agar 胰蛋白胨大豆瓊脂TSA250g瓶
Tacrolimus 他克莫司104987-11-320mg
PEG 20000 聚乙二醇 200005kg瓶
N'N-Dimethyldauricine iodideN'N-二甲蝙蝠葛堿碘化物17670-06-310mg
兔抗人γ-鏈中慢生華癸根瘤 Mesorhizobium huakuii香菇 Lentinula edodes
倉鼠腎成纖維宇佐美曲霉 Aspergillus usamii
微黃八疊球 Sarcina subflava微紫青霉 Penicillium janthinellum
檸檬形克勒克酵母 Kloeckera apiculataRH-35(大鼠肝)
金龜子綠僵小孢變種 Metarhizium anisopliae var. anisopliae釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae
H4-IIE(大鼠肝 )人成骨完全培養(yǎng)基
大鼠腦靜脈血管平滑肌完全培養(yǎng)基中分子量單一蛋白Marker(35 kD)
藤黃微球 Micrococcus luteus網(wǎng)狀鐮孢
苜蓿中華根瘤 Sinorhizobium meliloti宛氏擬青霉 Paecilomyces variotii
人胰島β完全培養(yǎng)基大鼠腸粘膜上皮完全培養(yǎng)基
沙地青霉 Penicillium arenicola苜蓿中華根瘤 Sinorhizobium meliloti