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熒光技術(shù)的實驗步驟:
一、準備好試劑與儀器:
磷酸鹽緩沖鹽水、熒光標記的抗體溶液、緩沖甘油、搪瓷桶三只、有蓋搪瓷盒一只、熒光顯微鏡、玻片架、濾紙、37℃溫箱等。
二、實驗步驟
1.滴加0.01mol/L,pH7.4的PBS于待檢標本片上,十分鐘后棄去,使標本保持一定濕度。
2.滴加適當稀釋的熒光標記的抗體溶液,使其完全覆蓋標本,置于有蓋搪瓷盒內(nèi),保溫一定時間以三十分鐘為參考。
3.取出玻片,置玻片架上,先用0.01mol/L,pH7.4的PBS沖洗后,再按順序過0.01mol/L,pH7.4的PBS三缸浸泡,每缸三到五分鐘,并不停地搖晃振蕩。
4.取出玻片,用濾紙吸去多余水分,但不使標本干燥,加一滴緩沖甘油,以蓋玻片覆蓋。
5.立即用熒光顯微鏡觀察。觀察標本的特異性熒光強度。
公司專業(yè)供應的抗體,抗體是用于化學反應、分析化驗、研究實驗、教學實驗、化學配方使用的純凈化學品,品質(zhì)**,價格實惠,多種規(guī)格供應,售后完善。本公司產(chǎn)品僅用于科研實驗。
產(chǎn)品名稱 |
肽酰tRNA水解酶ICT1抗體 |
英文名稱 |
Anti-ICT1 |
貨號 |
BH-K014599 |
英文名稱 Anti-ICT1
中文名稱 肽酰tRNA水解酶ICT1抗體
別 名 Digestion substraction 1; DS-1; DS1; Ict1; ICT1_HUMAN; Immature colon carcinoma transcript 1 protein; Immature colon carcinoma transcript 1 protein; mitochondrial; Peptidyl-tRNA hydrolase ICT1, mitochondrial; Peptidyl-tRNA hydrolase ICT1.
濃 度 1mg/1ml
規(guī) 格 1mg/1ml
抗體來源 Rabbit
克隆類型 polyclonal
交叉反應 Human, Mouse, Rat, Rabbit
產(chǎn)品類型 一抗
研究領(lǐng)域 腫瘤
蛋白分子量 predicted molecular weight: 20kDa
性 狀 Lyophilized or Liquid
免 疫 原 KLH conjugated synthetic peptide derived from human ICT1
亞 型 IgG
抗體制備過程:
1.材料與試劑
a.提取的動物 Ig
b.弗氏完全佐劑和弗氏不完全佐劑
c.青霉素和鏈霉素
d.實驗動物 兔
e.其它材料及試劑
2、選擇實驗活體。
3、進行動物實驗。
4、試取血樣進行測試,查看效果。
5、如果成功,殺死實驗活體,采集全部血清。
6、純化出抗體。
7、鑒定抗體。胎牛血清(無菌采制)
實驗原理 :
(1)特異性結(jié)合抗原:抗體本身不能直接溶解或殺傷帶有特異抗原的靶細胞,通常需要補體或吞噬細胞等共同發(fā)揮效應以病原微生物或?qū)е虏±頁p傷。然而,抗體可通過與病毒或的特異性結(jié)合,直接發(fā)揮中和病毒的作用。
(2)活補體:IgM、IgG1、IgG2和IgG3可通過經(jīng)典途徑激活補體,凝聚的IgA、IgG4和IgE可通過替代途徑激活補體。
(3)結(jié)合細胞:不同類別的球蛋白,可結(jié)合不同種的細胞,參與應答。
(4)可通過胎盤及粘膜:球蛋白G(IgG)能通過胎盤進入胎兒血流中,使胎兒形成自然被動
球蛋白A(IgA)可通過消化道及呼吸道粘膜,是粘膜局部抗感染的主要因素。
(5)具有抗原性:抗體分子是一種蛋白質(zhì),也具有刺機體產(chǎn)生應答的性能。不同的球蛋白分子,各具有不同的抗原性。
(6)抗體對理化因子的抵抗力與一般球蛋白相同:不耐熱,60~70℃即被破壞。各種酶及能使蛋白質(zhì)凝固變性的物質(zhì),均能破壞抗體的作用??贵w可被中性鹽類沉淀。在生產(chǎn)上??捎昧蛩徜@或硫酸鈉從血清中沉淀出含有抗體的球蛋白,再經(jīng)透析法將其純化。
抗體的生活習性:
(1)結(jié)合特異性抗原:抗體與其他球蛋白分子區(qū)別,就在于抗體能與相應抗原發(fā)生特異性結(jié)合,在體內(nèi)導致生理或病理效應;在體外產(chǎn)生各種直接或間接的可見的抗原抗體結(jié)合反應??贵w是靠其分子上的特殊的結(jié)合部位與抗原結(jié)合的。
(2)激活補體:抗體與相應抗原結(jié)合后,借助暴露的補體結(jié)合點去激活補體系統(tǒng)、激發(fā)補體的溶菌、溶細胞等疫作用。
(3)結(jié)合細胞:不同類別的球蛋白,可結(jié)合不同種的細胞,產(chǎn)生不同的疚,參與疫應答。
(4)可通過胎盤及粘膜:球蛋白G(IgG)能通過胎盤進入胎兒血流中,使胎兒形成自然被動疫。疫球蛋白A(IgA)可通過消化道及呼吸道粘膜,是粘膜局部抗感染疫的主要因素。
(5)具有抗原性:抗體分子是一種蛋白質(zhì),也具有刺激機體產(chǎn)生疫應答的性能。不同的疫球蛋白分子,各具有不同的抗原性。
(6)抗體對理化因子的抵抗力與一般球蛋白相同:不耐熱,60~70℃即被破壞。各種酶及能使蛋白質(zhì)凝固變性的物質(zhì),均能破壞抗體的作用??贵w可被中性鹽類沉淀。在生產(chǎn)上??捎昧蛩徜@或硫酸鈉從疫血清中沉淀出含有抗體的球蛋白,再經(jīng)透析法將其純化。
Methotrexate 甲氨蝶呤1g瓶
Lipofectamine ® 3000 Transfection Reagent(原裝)0.75ml支
Panaxatriol 人參三醇32791-84-720mg
Rooting Powder 生根粉100g瓶
羊抗人IgG-FITC0.3ml支
Acarbose 阿卡波糖56180-94-020mg
15ml有機離心管管架18孔個
Ammonium Persulfate 過硫酸銨25g瓶
4-Hydroxy-3-methoxybenzyl alcohol-Vanillicalcohol 香草醇498-00-020mg
程序降溫盒18孔個
DNA退火緩沖液(5×)1ml瓶
5%BSA封閉液100ml瓶
Metronidazole 甲硝唑443-48-1100mg
肽酰tRNA水解酶ICT1抗體釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae酸球亞種 Lactococcus lactis subsp. lactis
苜蓿中華根瘤 Sinorhizobium meliloti漆斑 Myrothecium sp.
LLC-WRC 256(大鼠腹水)大鼠小腦顆粒完全培養(yǎng)基
桿屬 Lactobacillus sp.光滑青霉 Penicillium glabrum
爪哇根霉 Rhizopus javanicus大鼠肝內(nèi)膽管上皮完全培養(yǎng)基
Y3-Ag 1.2.3(大鼠骨髓瘤)苜蓿中華根瘤 Sinorhizobium meliloti
解脂亞羅酵母 Yarrowia lipolytica釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae
NIH/3T3(小鼠胚胎)Goat Anti Mouse IgG-Biotin(Ready to Use)/山羊抗鼠IgG,Biotin(IHC工作液)
豇豆慢生根瘤 Bradyrhizobium vigna中慢生華癸根瘤 Mesorhizobium huakuii
粘紅酵母 Rhodotorula glutinis豇豆慢生根瘤 Bradyrhizobium vigna
人睪支持完全培養(yǎng)基釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae