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熒光技術(shù)的實(shí)驗(yàn)步驟:
一、準(zhǔn)備好試劑與儀器:
磷酸鹽緩沖鹽水、熒光標(biāo)記的抗體溶液、緩沖甘油、搪瓷桶三只、有蓋搪瓷盒一只、熒光顯微鏡、玻片架、濾紙、37℃溫箱等。
二、實(shí)驗(yàn)步驟
1.滴加0.01mol/L,pH7.4的PBS于待檢標(biāo)本片上,十分鐘后棄去,使標(biāo)本保持一定濕度。
2.滴加適當(dāng)稀釋的熒光標(biāo)記的抗體溶液,使其完全覆蓋標(biāo)本,置于有蓋搪瓷盒內(nèi),保溫一定時(shí)間以三十分鐘為參考。
3.取出玻片,置玻片架上,先用0.01mol/L,pH7.4的PBS沖洗后,再按順序過(guò)0.01mol/L,pH7.4的PBS三缸浸泡,每缸三到五分鐘,并不停地?fù)u晃振蕩。
4.取出玻片,用濾紙吸去多余水分,但不使標(biāo)本干燥,加一滴緩沖甘油,以蓋玻片覆蓋。
5.立即用熒光顯微鏡觀察。觀察標(biāo)本的特異性熒光強(qiáng)度。
公司專業(yè)供應(yīng)的抗體,抗體是用于化學(xué)反應(yīng)、分析化驗(yàn)、研究實(shí)驗(yàn)、教學(xué)實(shí)驗(yàn)、化學(xué)配方使用的純凈化學(xué)品,品質(zhì)**,價(jià)格實(shí)惠,多種規(guī)格供應(yīng),售后完善。本公司產(chǎn)品僅用于科研實(shí)驗(yàn)。
產(chǎn)品名稱 |
Kelch樣蛋白32抗體 |
英文名稱 |
Anti-KLHL32 |
貨號(hào) |
BH-K014699 |
英文名稱 Anti-KLHL32
中文名稱 Kelch樣蛋白32抗體
別 名 BKLHD5; BTB and kelch domain containing 5; BTB and kelch domain containing protein 5; dJ21F7.1; kelch like 32 (Drosophila); kelch like 32; KIAA1900; MGC51280; MGC87753; UG0030H05.
濃 度 1mg/1ml
規(guī) 格 1mg/1ml
抗體來(lái)源 Rabbit
克隆類型 polyclonal
交叉反應(yīng) Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Cow, Horse, Rabbit
產(chǎn)品類型 一抗
研究領(lǐng)域 細(xì)胞生物 **學(xué)
蛋白分子量 predicted molecular weight: 68kDa
性 狀 Lyophilized or Liquid
免 疫 原 KLH conjugated synthetic peptide derived from human KLHL32
亞 型 IgG
抗體制備過(guò)程:
1.材料與試劑
a.提取的動(dòng)物 Ig
b.弗氏完全佐劑和弗氏不完全佐劑
c.青霉素和鏈霉素
d.實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 兔
e.其它材料及試劑
2、選擇實(shí)驗(yàn)活體。
3、進(jìn)行動(dòng)物實(shí)驗(yàn)。
4、試取血樣進(jìn)行測(cè)試,查看效果。
5、如果成功,殺死實(shí)驗(yàn)活體,采集全部血清。
6、純化出抗體。
7、鑒定抗體。胎牛血清(無(wú)菌采制)
實(shí)驗(yàn)原理 :
(1)特異性結(jié)合抗原:抗體本身不能直接溶解或殺傷帶有特異抗原的靶細(xì)胞,通常需要補(bǔ)體或吞噬細(xì)胞等共同發(fā)揮效應(yīng)以病原微生物或?qū)е虏±頁(yè)p傷。然而,抗體可通過(guò)與病毒或的特異性結(jié)合,直接發(fā)揮中和病毒的作用。
(2)活補(bǔ)體:IgM、IgG1、IgG2和IgG3可通過(guò)經(jīng)典途徑激活補(bǔ)體,凝聚的IgA、IgG4和IgE可通過(guò)替代途徑激活補(bǔ)體。
(3)結(jié)合細(xì)胞:不同類別的球蛋白,可結(jié)合不同種的細(xì)胞,參與應(yīng)答。
(4)可通過(guò)胎盤及粘膜:球蛋白G(IgG)能通過(guò)胎盤進(jìn)入胎兒血流中,使胎兒形成自然被動(dòng)
球蛋白A(IgA)可通過(guò)消化道及呼吸道粘膜,是粘膜局部抗感染的主要因素。
(5)具有抗原性:抗體分子是一種蛋白質(zhì),也具有刺機(jī)體產(chǎn)生應(yīng)答的性能。不同的球蛋白分子,各具有不同的抗原性。
(6)抗體對(duì)理化因子的抵抗力與一般球蛋白相同:不耐熱,60~70℃即被破壞。各種酶及能使蛋白質(zhì)凝固變性的物質(zhì),均能破壞抗體的作用。抗體可被中性鹽類沉淀。在生產(chǎn)上??捎昧蛩徜@或硫酸鈉從血清中沉淀出含有抗體的球蛋白,再經(jīng)透析法將其純化。
抗體的生活習(xí)性:
(1)結(jié)合特異性抗原:抗體與其他球蛋白分子區(qū)別,就在于抗體能與相應(yīng)抗原發(fā)生特異性結(jié)合,在體內(nèi)導(dǎo)致生理或病理效應(yīng);在體外產(chǎn)生各種直接或間接的可見(jiàn)的抗原抗體結(jié)合反應(yīng)??贵w是靠其分子上的特殊的結(jié)合部位與抗原結(jié)合的。
(2)激活補(bǔ)體:抗體與相應(yīng)抗原結(jié)合后,借助暴露的補(bǔ)體結(jié)合點(diǎn)去激活補(bǔ)體系統(tǒng)、激發(fā)補(bǔ)體的溶菌、溶細(xì)胞等疫作用。
(3)結(jié)合細(xì)胞:不同類別的球蛋白,可結(jié)合不同種的細(xì)胞,產(chǎn)生不同的疚,參與疫應(yīng)答。
(4)可通過(guò)胎盤及粘膜:球蛋白G(IgG)能通過(guò)胎盤進(jìn)入胎兒血流中,使胎兒形成自然被動(dòng)疫。疫球蛋白A(IgA)可通過(guò)消化道及呼吸道粘膜,是粘膜局部抗感染疫的主要因素。
(5)具有抗原性:抗體分子是一種蛋白質(zhì),也具有刺激機(jī)體產(chǎn)生疫應(yīng)答的性能。不同的疫球蛋白分子,各具有不同的抗原性。
(6)抗體對(duì)理化因子的抵抗力與一般球蛋白相同:不耐熱,60~70℃即被破壞。各種酶及能使蛋白質(zhì)凝固變性的物質(zhì),均能破壞抗體的作用。抗體可被中性鹽類沉淀。在生產(chǎn)上??捎昧蛩徜@或硫酸鈉從疫血清中沉淀出含有抗體的球蛋白,再經(jīng)透析法將其純化。
肌紅蛋白(MYO)天然蛋白 英文名稱:Native Myoglobin (MYO)
胎兒真皮成纖維完全培養(yǎng)基100mL
霉素瓊脂基礎(chǔ)/霉鑒別瓊脂基礎(chǔ)/AFPA霉分離培養(yǎng)250克國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口
雞鼻炎合成培養(yǎng)基1萬(wàn)毫升/袋國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口
Rustigian氏尿素培養(yǎng)液/ Rustigian氏尿素肉湯/Rustigian Urea Broth細(xì)尿素酶試驗(yàn)100克國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口
1640培養(yǎng)基/1640 Medium/RPMI 1640含L-谷氨酰胺,不含碳酸氫鈉10升國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口
大鼠肺動(dòng)脈成纖維完全培養(yǎng)基100mL
人腎透明腺英文名稱:786-0
程序性死亡蛋白6相互作用蛋白(PDCD6IP)重組蛋白英文名稱:Recombinant Programmed Cell Death Protein 6 Interacting Protein (PDCD6IP)
肌肌酸激酶(CKM)重組蛋白英文名稱:Recombinant Creatine Kinase, Muscle (CKM)
熱休克蛋白40(HSP40)重組蛋白英文名稱:Recombinant Heat Shock Protein 40 (HSP40)
血小板反應(yīng)蛋白(THBS1)重組蛋白英文名稱:Recombinant Thrombospondin 1 (THBS1)
Eca-109(人食管)5×106cells/瓶×2
Kelch樣蛋白32抗體苜蓿中華根瘤 Sinorhizobium meliloti桿屬 Lactobacillus sp.
大豆慢生根瘤 Bradyrhizobium japonicum鏈霉 Streptomyces sp.
大鼠腎實(shí)質(zhì)完全培養(yǎng)基HuTu-80(人十二脂腸腺)
黑曲霉 Aspergillus niger釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae
RN-c, 大鼠皮質(zhì)神經(jīng)元爪哇根霉 Rhizopus javanicus
棲糖蜜棒桿 Corynebacterium melasscola白紋伊蚊
中慢生華癸根瘤 Mesorhizobium huakuii鼠桿 Lactobacillus murinus
嗜酸桿 Lactobacillus acidophilus人胰腺上皮完全培養(yǎng)基
廣譜彩虹預(yù)染蛋白Marker小鼠氣管和支氣管上皮完全培養(yǎng)基
威德摩爾鏈霉 Streptomyces wedmorensis毛柄**(金針菇) Flammulina velutipes
粟酒裂殖酵母 Schizosaccharomyces pombe綠色木霉 Trichoderma viride