別    名   Dual specificity mitogen activated protein kinase kinase 5; MAP kinase kinase 5; MAP kinase kinase MEK5b; MAP2K5; MAPK/ERK kinase 5; MAPKK5; PRKMK5; EC 2.7.12.2.
英文名稱  Anti-MEK5/MAP2K5

中文名稱  絲裂原活化蛋白激酶激酶5抗體

濃    度  1mg/1ml

規(guī)  格  0.1ml/100μg 0.2ml/200μg    

抗體來源  Rabbit  

克隆類型  polyclonal

交叉反應  Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Pig, Cow, Horse, Rabbit

產品類型  一抗

研究領域  腫瘤 **學 信號轉導 轉錄調節(jié)因子 激酶和磷酸酶 

蛋白分子量 predicted molecular weight: 49kDa

性    狀  Lyophilized or Liquid

免 疫 原 KLH conjugated synthetic peptide derived from human MEK5

亞    型  IgG 

本公司產品僅用于科研實驗。

抗體的熒光標記法：

（一）基本原理

賴氨酸殘基的游離e-氨基可與FITC(其激發(fā)波長為492nm,發(fā)射光波長為525nm)共價結合。與FITC結合的抗體可用為特異性的探針,以測定細胞相應抗原的存在。FITC具有很高的量子產量(發(fā)射光與吸收光的比值,0.85)形成的偶聯(lián)物的穩(wěn)定性很好。

（二）儀器和試劑

1.待偶聯(lián)抗體；

2.碳酸氫鈉緩沖液；

3.疊氮鈉；

4.庵氰酸熒光素；

5.電磁攪拌器。

抗體反應特點：

1.高度特異性，特異性是抗原抗體反應的主要特征，特定抗原決定簇只與特定抗體結合；

2.可逆性:抗原與抗體結合形成抗原抗體復合物的過程是一種動態(tài)平衡, 其反應式為：Ag+AbAg·Ab；

3.適當濃度和比例；

4.敏感性:在測定血清中某一物質的含量時，化學比色法的敏感度為mg/ml水平，酶反應測定法的敏感度約為5~10μg/ml，定中凝膠擴散法的敏感度與酶反應法相仿。

抗體反應的因素：

1.電解質 ：抗原抗體特異結合后，膠體粒便可發(fā)生脫水作用，此時易受電解質影響，如有適當濃度的電解質存在就會使它們失去部分負電荷而相互凝聚，于是出現(xiàn)明顯的凝集或沉淀現(xiàn)象。

2.酸堿度:合適的pH為6-8。

3.溫度:37℃通常是抗原體反應溫度。

實驗步驟：

1、石蠟切片，常規(guī)脫蠟至水

2、蒸餾水沖洗，pbs 浸泡5 分鐘（如需采用抗原修復，在此步驟后進行）。

3、3%雙氧水去離子水（無色液體）孵育15-20 分鐘，以消除內源性過氧物酶活性。

4、滴加試劑A（藍色液體）室溫孵育15-20 分鐘，傾去，勿洗。

5、滴加適當比例稀釋的一抗，37℃孵育2-3 小時或4℃過夜。

6、PBS 沖洗，3 分鐘3 次。

7、滴加試劑B（黃色液體），室溫或37℃孵育15-20 分鐘。

8、PBS 沖洗，3 分鐘3 次。

9、滴加試劑C（橙色液體），室溫或37℃孵育15-20 分鐘。

10、PBS 沖洗，3 分鐘3 次。

11、顯色劑顯色（DAB 或AEC）

12、自來水充分沖洗。

13、如果需要，可進行復染，脫水，透明。

14、選擇適當?shù)姆馄瑒┓馄?/span>

抗體分子標記技術：

（一）原理

當應用化學氧化法時(NaI)遇強氧化劑,離子被氧化為分子,所**的自由分子可與某些基團進行鹵化反應。蛋白質分子可進行鹵化反應的基團主要為酪氨酸殘基,某些組氨酸殘基也可能進行化。在應用胺T( Chloramine T)法的實驗中,所用的氧化劑(1,3,4,6- tetrachloro-3a,6adipheny l-glucoluril)強揮發(fā)性的有機溶劑中。該溶劑加入試管后,先讓其揮發(fā)(即讓氧化劑將試管包被),然后把Na125I和蛋白質液加入包被好的試管中,反應完成即將混合液移入他管終止反應。

（二）準備

1.試劑

經親和層析純化的多克隆抗體或單克隆抗體；0.5mol/L磷酸鈉緩沖液,pH7.5；無載體的Na125I3.7GBq/ml(100mCi/ml)的NaOH液；100g/L三醋酸；70%乙醇；新鮮制備的含2mg/m1絡胺T的0.5mol/L磷酸鈉緩沖液(pH7.5）；胺T反應終止緩沖液；

2.儀器

凝膠過濾柱；￥-記數(shù)器；玻璃纖維濾。

（三）操作要點

1.用胺T法進行化,也可在大約pH7.0的緩沖液中進行；

2.如果氧化反應損傷蛋白質，可將抗體與異硫氰酸熒光素(FITC)偶聯(lián))胺T量減少到0.02mg/m，并將偏重亞硫酸液的濃度降到0.024mg/ml；

3. Iodogen-包被的試管可在干燥器中,于室溫下保存多年；

4.1251標記的抗體,在制備后六周內均可使用(1251的半衰期為59.6天）；

5.要注意保證所用的Na1251是新鮮的,陳舊制劑的比活性低；

6.酪氨酸的碘化偶爾會對抗原的抗體結合位點有干擾,因此降低其結合能力,但這種情況很少見。

磷脂酰肌醇特異性磷酯酶Cγ2(PLCγ2)elisa檢測試劑盒英文名稱：PLCγ2 ELISA Kit，英文縮寫：PLCγ2，產品別名：磷脂酰肌醇特異性磷酯酶Cγ2(PLCγ2)ELISA檢測試劑盒，磷脂酰肌醇特異性磷酯酶Cγ2(PLCγ2)檢測試劑盒產品保存：2~8℃、有效期6個月。

連環(huán)蛋白α3(CTNNα3)elisa檢測試劑盒英文名稱：CTNNα3 ELISA Kit，英文縮寫：CTNNα3，產品別名：連環(huán)蛋白α3(CTNNα3)ELISA檢測試劑盒，連環(huán)蛋白α3(CTNNα3)檢測試劑盒產品保存：2~8℃、有效期6個月。

磷酸甘油酸變位酶1(PGAM1)elisa檢測試劑盒英文名稱：PGAM1 ELISA Kit，英文縮寫：PGAM1，產品別名：磷酸甘油酸變位酶1(PGAM1)ELISA檢測試劑盒，磷酸甘油酸變位酶1(PGAM1)檢測試劑盒產品保存：2~8℃、有效期6個月。

快肌肌鈣蛋白C(TNNC2)elisa檢測試劑盒英文名稱：TNNC2 ELISA Kit，英文縮寫：TNNC2，產品別名：快肌肌鈣蛋白C(TNNC2)ELISA檢測試劑盒，快肌肌鈣蛋白C(TNNC2)檢測試劑盒產品保存：2~8℃、有效期6個月。

人抗麥膠蛋白(AGA)elisa檢測試劑盒英文名稱：AGA ELISA Kit，英文縮寫：AGA，產品別名：人抗麥膠蛋白(AGA)ELISA檢測試劑盒，人抗麥膠蛋白(AGA)檢測試劑盒產品保存：2~8℃、有效期6個月。

巨噬炎性蛋白1α(MIP1α)elisa檢測試劑盒英文名稱：MIP1α ELISA Kit，英文縮寫：MIP1α，產品別名：巨噬炎性蛋白1α(MIP1α)ELISA檢測試劑盒，巨噬炎性蛋白1α(MIP1α)檢測試劑盒產品保存：2~8℃、有效期6個月。

解整合素金屬蛋白酶8(ADAM8)elisa檢測試劑盒英文名稱：ADAM8 ELISA Kit，英文縮寫：ADAM8，產品別名：解整合素金屬蛋白酶8(ADAM8)ELISA檢測試劑盒，解整合素金屬蛋白酶8(ADAM8)檢測試劑盒產品保存：2~8℃、有效期6個月。

角蛋白19(KRT19)elisa檢測試劑盒英文名稱：KRT19 ELISA Kit，英文縮寫：KRT19，產品別名：角蛋白19(KRT19)ELISA檢測試劑盒，角蛋白19(KRT19)檢測試劑盒產品保存：2~8℃、有效期6個月。

假尿苷酸合酶1(PUS1)elisa檢測試劑盒英文名稱：PUS1 ELISA Kit，英文縮寫：PUS1，產品別名：假尿苷酸合酶1(PUS1)ELISA檢測試劑盒，假尿苷酸合酶1(PUS1)檢測試劑盒產品保存：2~8℃、有效期6個月。

激肽釋放酶8(KLK8)elisa檢測試劑盒英文名稱：KLK8 ELISA Kit，英文縮寫：KLK8，產品別名：激肽釋放酶8(KLK8)ELISA檢測試劑盒，激肽釋放酶8(KLK8)檢測試劑盒產品保存：2~8℃、有效期6個月。

基質金屬蛋白酶19(MMP19)elisa檢測試劑盒英文名稱：MMP19 ELISA Kit，英文縮寫：MMP19，產品別名：基質金屬蛋白酶19(MMP19)ELISA檢測試劑盒，基質金屬蛋白酶19(MMP19)檢測試劑盒產品保存：2~8℃、有效期6個月。

D/E中和瓊脂    能中和抗微生物的化學試劑，用于環(huán)境標本中檢測和計數(shù)表面微生物500g

DMEM（高糖），液體    含4500mg/l葡萄糖，L-谷氨酰胺

25mM HEPES，不含丙酮酸鈉12430-054

Peptone P 蛋白胨P    Oxoid500g

Stuart 運送培養(yǎng)基 (CM0111)    Oxoid

支原體瓊脂基礎 (CM0401)    Oxoid

DRBC 瓊脂基礎 (CM0727)    Oxoid

乳糖蛋白胨培養(yǎng)液    1000(g)

絲裂原活化蛋白激酶激酶5抗體2,6-二甲吡分子式：107.2CAS號：108-48-5分子量： C7H9N； NC(CH3)CHCHCHC(CH3)

4-氯-6-氟-2-甲喹啉分子式：195.62CAS號：18529-01-6分子量： C10H7ClFN

檸檬酸鉀分子式：324.41CAS號：7778-49-6分子量： K3C6H5O7

4-氟-3-硝砜分子式：344.24CAS號：312-30-1分子量： C12H6F2N2O6S

3-胺聯(lián)分子式：245.33CAS號：198275-79-5分子量： C18H15N

2-溴-3-氟三氟甲分子式：243CAS號：104540-42-3分子量： C7H3BrF4

9-(3-溴)咔唑分子式：322.21CAS號：185112-61-2分子量： C18H12BrN

4-氯靛紅英文名稱：4- isatin chloride分子量： C8H4ClNO2CAS號：1623263

木蘭脂素英文名稱：Magnolia fat分子量：C23H28O7CAS號：31008-18-1

2,5-二醛-1-甲氧-4-(2-乙己氧)分子式：292.37CAS號：203251-22-3分子量： C17H24O4

抗體的種類：

抗體是在抗原刺激下產生的，體液性抗體由B淋細胞系產生。根據(jù)其化學結構和抗原的不同可分為IgG、IgM、IgA、 IgE和IgD5種類型.目前對疫球蛋白G、A、M、E了解較多，對D的功能了解較少。

（1） IgG：是血清中濃度大的一類球蛋白，約占疫球蛋白含量的70～80%，50%分布于血漿。機體受到抗原初次刺激后，其產生時間僅次于IgM。在抗體介導的抗感染免中起主要作用。IgG是球蛋白單體，分子量16萬～18萬，可以通過兔的胎盤，但不能通過豬和牛的胎盤。在體內可以有效地抵抗**、病毒等微生物侵襲。在體外的血清學反應中，參與沉淀反應、凝集反應、補體結合反應和中和反應。

（2） IgM：由5個球蛋白單位組成的五聚體，在血清中的含量僅次于IgG，分子量90萬，是體內大的球蛋白?？乖醮未碳C體后，IgM出現(xiàn)早,在血清中的含量僅次于IgG，主要分布在血管內，可以通過激活補體發(fā)揮溶菌、溶細胞及中和病毒的作用。因其是五聚體，免作用很強，是IgG的100倍，但由于含量僅為IgG的1/10，且持續(xù)時間短，所以在抗感染疫中不能起主要作用。在體外的血清學反應中，參與凝集反應和補體結合反應。

（3） IgA：有單體和雙體兩種形式。單體存在于血清中，分子量約為17萬，亦稱為血清型IgA，有**和抗病毒作用。雙體主要存在于外分泌液中，如唾液、淚液、初乳、氣管分泌液，以初乳中的含量高。雙體IgA亦稱為分泌型IgA，由存在于粘膜和組織上的漿細胞產生，分子量40萬，含量較單體高6～８倍，是粘膜的重要防御因素，可以阻止**或病毒吸附于粘膜表面。

（4） IgE：是一種特殊的糖蛋白，為單位體結構，分子量19萬，由消化道、呼吸道粘膜固有層及局部結中的漿細胞所形成，在血清中含量甚微，是一種致敏抗體，容易吸附在**表面，當與相應抗原結合所引起過敏反應。在機體抵抗**和病毒的感染中幾乎無作用。