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熒光技術(shù)的實驗步驟:
一、準備好試劑與儀器:
磷酸鹽緩沖鹽水、熒光標記的抗體溶液、緩沖甘油、搪瓷桶三只、有蓋搪瓷盒一只、熒光顯微鏡、玻片架、濾紙、37℃溫箱等。
二、實驗步驟
1.滴加0.01mol/L,pH7.4的PBS于待檢標本片上,十分鐘后棄去,使標本保持一定濕度。
2.滴加適當稀釋的熒光標記的抗體溶液,使其完全覆蓋標本,置于有蓋搪瓷盒內(nèi),保溫一定時間以三十分鐘為參考。
3.取出玻片,置玻片架上,先用0.01mol/L,pH7.4的PBS沖洗后,再按順序過0.01mol/L,pH7.4的PBS三缸浸泡,每缸三到五分鐘,并不停地搖晃振蕩。
4.取出玻片,用濾紙吸去多余水分,但不使標本干燥,加一滴緩沖甘油,以蓋玻片覆蓋。
5.立即用熒光顯微鏡觀察。觀察標本的特異性熒光強度。
公司專業(yè)供應的抗體,抗體是用于化學反應、分析化驗、研究實驗、教學實驗、化學配方使用的純凈化學品,品質(zhì)**,價格實惠,多種規(guī)格供應,售后完善。本公司產(chǎn)品僅用于科研實驗。
產(chǎn)品名稱 |
磷酸化β-連環(huán)蛋白/β-連環(huán)素/β鏈接素抗體 |
英文名稱 |
Anti-phospho-betaCatenin(Tyr489) |
貨號 |
BH-K016083 |
英文名稱 Anti-phospho-betaCatenin(Tyr489)
中文名稱 磷酸化β-連環(huán)蛋白/β-連環(huán)素/β鏈接素抗體
別 名 beta Catenin (phospho Y489); beta Catenin (phospho Tyr489); p-beta Catenin (Y489); p-beta Catenin (Tyr489); beta-catenin; beta catenin; CTNNB1; CHBCAT; CTNNB1; CTNNB; PRO2286; Cadherin associated protein; Catenin (cadherin associated protein), beta 1, 88kDa; Catenin beta 1; Catenin beta-1; CATNB; CTNB1_HUMAN; CTNNB; CTNNB1; DKFZp686D02253; FLJ25606; FLJ37923; b-catenin; OTTHUMP00000162082; OTTHUMP00000165222; OTTHUMP00000165223; OTTHUMP00000209288; OTTHUMP00000209289.
濃 度 1mg/1ml
規(guī) 格 0.1ml/100μg
抗體來源 Rabbit
克隆類型 polyclonal
交叉反應 Human, Mouse, Rat, Chicken, Pig, Cow, Rabbit, Sheep
產(chǎn)品類型 一抗 磷酸化抗體
研究領域 腫瘤 細胞生物 神經(jīng)生物學 信號轉(zhuǎn)導 干細胞 細胞粘附分子
蛋白分子量 predicted molecular weight: 86kDa
性 狀 Lyophilized or Liquid
免 疫 原 KLH conjugated synthesised phosphopeptide derived from human beta Catenin around the phosphorylation site of Tyr489
產(chǎn)品應用 WB=1:100-500 ELISA=1:500-1000 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 ICC=1:100-500 IF=1:100-500
亞 型 IgG
抗體制備過程:
1.材料與試劑
a.提取的動物 Ig
b.弗氏完全佐劑和弗氏不完全佐劑
c.青霉素和鏈霉素
d.實驗動物 兔
e.其它材料及試劑
2、選擇實驗活體。
3、進行動物實驗。
4、試取血樣進行測試,查看效果。
5、如果成功,殺死實驗活體,采集全部血清。
6、純化出抗體。
7、鑒定抗體。胎牛血清(無菌采制)
實驗原理 :
(1)特異性結(jié)合抗原:抗體本身不能直接溶解或殺傷帶有特異抗原的靶細胞,通常需要補體或吞噬細胞等共同發(fā)揮效應以病原微生物或?qū)е虏±頁p傷。然而,抗體可通過與病毒或的特異性結(jié)合,直接發(fā)揮中和病毒的作用。
(2)活補體:IgM、IgG1、IgG2和IgG3可通過經(jīng)典途徑激活補體,凝聚的IgA、IgG4和IgE可通過替代途徑激活補體。
(3)結(jié)合細胞:不同類別的球蛋白,可結(jié)合不同種的細胞,參與應答。
(4)可通過胎盤及粘膜:球蛋白G(IgG)能通過胎盤進入胎兒血流中,使胎兒形成自然被動
球蛋白A(IgA)可通過消化道及呼吸道粘膜,是粘膜局部抗感染的主要因素。
(5)具有抗原性:抗體分子是一種蛋白質(zhì),也具有刺機體產(chǎn)生應答的性能。不同的球蛋白分子,各具有不同的抗原性。
(6)抗體對理化因子的抵抗力與一般球蛋白相同:不耐熱,60~70℃即被破壞。各種酶及能使蛋白質(zhì)凝固變性的物質(zhì),均能破壞抗體的作用。抗體可被中性鹽類沉淀。在生產(chǎn)上常可用硫酸銨或硫酸鈉從血清中沉淀出含有抗體的球蛋白,再經(jīng)透析法將其純化。
抗體的生活習性:
(1)結(jié)合特異性抗原:抗體與其他球蛋白分子區(qū)別,就在于抗體能與相應抗原發(fā)生特異性結(jié)合,在體內(nèi)導致生理或病理效應;在體外產(chǎn)生各種直接或間接的可見的抗原抗體結(jié)合反應??贵w是靠其分子上的特殊的結(jié)合部位與抗原結(jié)合的。
(2)激活補體:抗體與相應抗原結(jié)合后,借助暴露的補體結(jié)合點去激活補體系統(tǒng)、激發(fā)補體的溶菌、溶細胞等疫作用。
(3)結(jié)合細胞:不同類別的球蛋白,可結(jié)合不同種的細胞,產(chǎn)生不同的疚,參與疫應答。
(4)可通過胎盤及粘膜:球蛋白G(IgG)能通過胎盤進入胎兒血流中,使胎兒形成自然被動疫。疫球蛋白A(IgA)可通過消化道及呼吸道粘膜,是粘膜局部抗感染疫的主要因素。
(5)具有抗原性:抗體分子是一種蛋白質(zhì),也具有刺激機體產(chǎn)生疫應答的性能。不同的疫球蛋白分子,各具有不同的抗原性。
(6)抗體對理化因子的抵抗力與一般球蛋白相同:不耐熱,60~70℃即被破壞。各種酶及能使蛋白質(zhì)凝固變性的物質(zhì),均能破壞抗體的作用??贵w可被中性鹽類沉淀。在生產(chǎn)上??捎昧蛩徜@或硫酸鈉從疫血清中沉淀出含有抗體的球蛋白,再經(jīng)透析法將其純化。
神經(jīng)外營養(yǎng)蛋白3(NXPH3)檢測試劑盒(酶聯(lián)吸附試驗法) ELISAKitforNeurexophilin3(NXPH3) 規(guī)格:48T/96T 進口、國產(chǎn)
B-瘤因子2(Bcl2)檢測試劑盒(酶聯(lián)吸附試驗法) ELISAKitforB-CellLeukemia/Lymphoma2(Bcl2) 規(guī)格:48T/96T 進口、國產(chǎn)
白介素16(IL16)檢測試劑盒(酶聯(lián)吸附試驗法) ELISAKitforInterleukin16(IL16) 規(guī)格:48T/96T 進口、國產(chǎn)
L選擇素(SELL)檢測試劑盒(酶聯(lián)吸附試驗法) ELISAKitforSelectin,Leukocyte(SELL) 規(guī)格:48T/96T 進口、國產(chǎn)
原鈣黏素β7(PCDHβ7)檢測試劑盒(酶聯(lián)吸附試驗法) ELISAKitforProtocadherinBeta7(PCDHb7) 規(guī)格:48T/96T 進口、國產(chǎn)
Bcl2關聯(lián)永生基因3(BAG3)檢測試劑盒(酶聯(lián)吸附試驗法) ELISAKitforBcl2AssociatedAthanogene3(BAG3) 規(guī)格:48T/96T 進口、國產(chǎn)
神經(jīng)調(diào)節(jié)素2(NRG2)檢測試劑盒(酶聯(lián)吸附試驗法) ELISAKitforNeuregulin2(NRG2) 規(guī)格:48T/96T 進口、國產(chǎn)
激活素A受體Ⅰ(ACVR1)檢測試劑盒(酶聯(lián)吸附試驗法) ELISAKitforActivinAReceptorTypeI(ACVR1) 規(guī)格:48T/96T 進口、國產(chǎn)
補體因子B(CFB)檢測試劑盒(酶聯(lián)吸附試驗法) ELISAKitforComplementFactorB(CFB) 規(guī)格:48T/96T 進口、國產(chǎn)
生長因子受體結(jié)合蛋白2(Grb2)檢測試劑盒(酶聯(lián)吸附試驗法) ELISAKitforGrowthFactorReceptorBoundProtein2(Grb2) 規(guī)格:48T/96T 進口、國產(chǎn)
組蛋白甲基轉(zhuǎn)移酶SMYD2抗體
溶質(zhì)載體蛋白家族35成員C2抗體
內(nèi)膜抗體
睪丸特異性Y蛋白樣5抗體
末端脫氧核苷酸轉(zhuǎn)移酶抗體
微管蛋白聚合促進蛋白24
Ten-eleven轉(zhuǎn)運基因1蛋白抗體
轉(zhuǎn)錄增強因子TEF3抗體
胸腺素抗體
凝血調(diào)節(jié)蛋白/血栓調(diào)節(jié)素抗體
酪氨酸激酶A抗體
磷酸化β-連環(huán)蛋白/β-連環(huán)素/β鏈接素抗體丁二(>98%,BR)5,6Dimethylbenzimidazole,≥99%25G通用試劑
吐溫601Vinylimidazole,≥99%25G通用試劑
酵母多糖 A(>98% (HPLC),BC)NVinyl carbazole,98%5G通用試劑
鈣(>99%,BR)1(pToluenesulfonyl)imidazole,99%5G通用試劑
二環(huán)己基碳二亞(>99%,BR)1Hydroxybenzotrizole,99%25G通用試劑
鹽鑭六水(>99%,BR)1Hydroxy7azabenzotriazole,99%5ML通用試劑
三氧鉬(>98%,BR)4,5Dicyanoimidazole,99.0%5G通用試劑
木瓜蛋白酶懸浮液6Chloro1hydroxibenzotriazol,98%25G通用試劑
磺(>98%,BR)1,1'Carbonyldi(1,2,4triazole),≥90%1G通用試劑
過氧物歧酶(SOD)N,N'Carbonyldiimidazole,≥97.0%25G通用試劑
三十(>98%,植物**級)Benzimidazole,98%25G通用試劑
4羥基甲醛(>98.0%,BR)1Methylimidazole,99%100G通用試劑
低內(nèi)**牛血清白蛋白6Nitrobenzimidazole,98%25G通用試劑
梭菌蛋白酶3Aminopyrazole,98%1G通用試劑
2'脫氧鳥苷5'一二鹽(分子生物學級)Pyrazole,98%25G通用試劑